生物大分子波增学原理 吴季辉 HNCA 7.4.1.2 CT-HNCA HNCA(b) 2 X Φ1 X 3 T/2 T/2 t/2 T/2 T/2 decouple ①4 /2 d F1(D->F3N,t1)->F2(Ca,t2)-> 13c0 F3N)->F1(H,t3) 所用相循环为1=x,-x;2y,y;3=4x),4y),4-x),4(-y)φ4=16(x),16(-x),φs-16(y),16(-y方 62(x),2(-x;r©f=2(X-X-XX-Xx,x,-x),2(-xx,x-x,x-x-XX)。此处2x=
HNCA 生物大分子波谱学原理 吴季辉 F1(H) -> F3(N,t1) -> F2(Ca,t2) -> F3(N) -> F1(H,t3)
生物大分子波谱学原理 7.4.1.2 CT-HNCA 吴季辉 HNCA HNCA (b) decouple n Af-o 4 从HN的信号出发,经过第一个INEPT,传递给15N:O。=-2HN k=15y)16-y 在恒时期间,15N与H及13CO的偶合不起作用,而与13C的偶合全程起作 用,因而保持对H的反相磁化,同时产生15N相对C的反相磁化: =4HN CgT (T)+4HN CaT2 (T)3 xcos(Qh) 此处I1(T)=sin(πHewT)cos(πIcwI) Iz(T)=cos(πGNT)sin(πJcwT) 通常取T=22~28ms,这时两个T函数值大致最大 紧接着15N和13C的90度脉冲产生极化转移: =4HNCg(T)+4HNC(T)x cos()
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生物大分子波谱学原理 7.4.1.2 CT-HNCA 吴季辉 HNCA HNCA (b) H decouple BCO 在t2期间,13C同其他核的偶合均被相应的180度脉冲去除,只有13C的化 学位移被标记,但13C与13C的偶合保留: yφ416(x),16(-xs-16y).16(y x),此处2x= 1 4HNCg cos((T)+4HNC cos(T(T) ×cos(2x4)cos(Jcct) 因此,2的最大时间不得超过 一,通常取8-10ms。 随后的回传过程产生: .=Hco(T)+cs((T)x)cos() 当T=6=2时,结果与前一序列一样,但是前一序列信号演化多经历了 t时间,因此考虑到弛豫,恒时版本的信号衰减略小一些。对于abiquitin大小的 蛋白质,信噪比可提高10%左右
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