生物大分子波谱学原理 吴季辉 Side Chain Assignment (H)C(CO)NH-TOCSY:Side Chain C chemical shifts H(CC)(CO)NH-TOCSY:Side chain H chemical shifts HCCH-COSY:adjacent C-C correlation HCCH-TOCSY:long range C-C correlation within one residue
Side Chain Assignment 生物大分子波谱学原理 吴季辉 (H)C(CO)NH-TOCSY: Side Chain C chemical shifts H(CC)(CO)NH-TOCSY: Side chain H chemical shifts HCCH-COSY: adjacent C-C correlation HCCH-TOCSY: long range C-C correlation within one residue
生物大分子波谱学原理 吴季辉 CCONH-TOCSY Basic triple resonance experiments:(H)CCCONH TOCSY 3D (HCC(CO)NH Haliph.->Caliph-(t1)->Ca.->C'->N(t2)->HN(t3) 3 S3 S2 S1 T 2 2 DIPSI-2(x) al .2S33 15N isu GARP ,2ST, 21Ty 13C 222Ds-2 2S3】 BSP 2SSzy KGz Gz K=+/-10V=+/-y91=y;92=2(x,2(-x)+TPPI(t53=x5 94=Xg5=x,-X9e=X,2(-x,k △'-3.6ms,A"=2.4ms,△=5.4ms,t=13.5ms,=3.4ms,=4.5ms
CCONH -TOCSY 生物大分子波谱学原理 吴季辉
生物大分子波谱学原理 吴季梅 HCONH-TOCSY Basic triple resonance experiments:H(CC)CONH TOCSY 3D H(CC)(CO)NH ti,t H 2 2DIPSI-22) DIPs-22 △j, 15N 凯 GARP 13C BSP t2 DIPSI-2() BSP Gz Gz K=+-10Ψ=+/-y;01=y,-y+TPPI5◆2=x;93=x;◆4=x; 05=2(x),2(-x596=X07=x;中e=X,2(-x),x △=5.4ms,t=13.5ms,t1=6ms,t2=12ms,=3.4ms,n=4.5ms. using homo-and heteronuclear TOCSY transfer ·→time-saving by simultaneous1H-13℃and13C-13℃transfer
HCONH-TOCSY 生物大分子波谱学原理 吴季辉
生物大分子波谐学原理 吴季辉 13℃一13℃相关谱 碳一碳相关谱 HCCH-COSY (H-13C-13C-IH correlation spectroscopy HCCH-TOCSY (H-13C-13C-'H total correlation spectroscopy) 用于证认13C标记蛋白质的脂肪链H及13C,信号传递是从H开 始，经过单键J偶合到13C,再通过类似同核COSY及TOCSY的 机制传递到其他13℃，最后通过单键J偶合回传到H。所以这类 实验可以看作H同核COSY及TOCSY在13C上的推广。除了可 以获得3C的信息，也可得到H的信息，对于大蛋白质而言， 效果比H同核COSY及TOCSY更好，因为在H同核COSY及 TOCSY中起作用的是比较小的H同核J偶合（一般小于10Hz) 而这里虽有三步传递，却均是比较大的J偶合，其中JC约 140Hz,JcC约35Hz。因此这类实验对于大蛋白质的侧链H, 13C的证认非常重要
13C－13C相关谱 生物大分子波谱学原理 吴季辉 碳－碳相关谱 HCCH-COSY（1H- 13C- 13C- 1H correlation spectroscopy） 及HCCH-TOCSY（1H- 13C- 13C- 1H total correlation spectroscopy） 用于证认13C标记蛋白质的脂肪链1H及13C，信号传递是从1H开 始，经过单键J偶合到13C，再通过类似同核COSY及TOCSY的 机制传递到其他13C，最后通过单键J偶合回传到1H。所以这类 实验可以看作1H同核COSY及TOCSY在13C上的推广。除了可 以获得13C的信息，也可得到1H的信息，对于大蛋白质而言， 效果比1H同核COSY及TOCSY更好，因为在1H同核COSY及 TOCSY中起作用的是比较小的1H同核J偶合（一般小于10Hz）， 而这里虽有三步传递，却均是比较大的J偶合，其中JHC约 140Hz，JCC约35Hz。因此这类实验对于大蛋白质的侧链1H， 13C的证认非常重要
生物大分子波谱学原理 吴季辉 13℃一13℃相关谱 在以下的讨论中，用C(k=1,,K)代表氨基酸残基中的 非羰基碳，C'代表羰基碳：H代表C上连接的第n个H: 1H同核J偶合不予考虑，15N与13C的J偶合也不考虑。因此 对于C的自由进动lamilton可以写成： M K a=2C+∑2 cHC+∑2 meeCC+2 ecoCC! m=1 =2 其他的类似
13C－13C相关谱 生物大分子波谱学原理 吴季辉