层析分离2）离子交换层析●作为不溶性母体的不溶性物质通常有苯乙烯树脂、酚醛树脂、纤维素、葡聚糖、琼脂糖等。引入不溶性母体的活性基团，可以是酸性集团，也可以是碱性基团。酸性集团如磺酸基（一SOH）。碱性基团如季铵（【一N+（CH3）3l）。引入酸性基团的离子交换剂可以解离出氢离子（H+），在一定条件下，H+可以与其他阳离子进行交换，称为阳离子交换剂；引入碱性基团的离子交换剂，在一定条件下，与氢氧根（一OH）结合后，可以与其他阴离子交换，称为阴离子交换剂
2）离子交换层析 作为不溶性母体的不溶性物质通常有苯乙烯树脂、酚醛树脂、纤维素、 葡聚糖、琼脂糖等。 引入不溶性母体的活性基团，可以是酸性集团，也可以是碱性基团。酸 性集团如磺酸基（—SO3H）。碱性基团如季铵（[—N+（CH3）3 ]）。 引入酸性基团的离子交换剂可以解离出氢离子（H+ ），在一定条件下，H+ 可以与其他阳离子进行交换，称为阳离子交换剂；引入碱性基团的离子交 换剂，在一定条件下，与氢氧根（—OH- ）结合后，可以与其他阴离子交换，称为阴离子交换剂。 层析分离
离子交换剂--带有电荷基团的不溶性载体+阴离子交换剂的珠子阳离子交换剂的珠子（可吸附带正电的蛋白质（可吸附带负电的蛋白质-
离子交换剂 -带有电荷基团的不溶性载体 阴离子交换剂的珠子 (可吸附带负电的蛋白质 ) 阳离子交换剂的珠子 (可吸附带正电的蛋白质 )
809KeyLarge netpositive chargeNet poaitive chargeONet negative chargeLargenet negativechargPolymer beadswith negativelyhargedfunctional groupeProtein mixtureisaddedto columntainingcation exchangers,ahcolumnatrates determinecytheir net chargeatthePHWithtemovefnster and elute earlie(a)
层析分离?2）离子交换层析原理：在溶液的pH大于酶（蛋白质）的等电点时，酶分子带负电，而当溶液pH小于酶的等电点时，酶分子带正电荷。因此，混合溶液中各组分所带电荷的正负和数量不同。因此，将欲分离的混合溶液加入到离子交换柱中，采用适当的洗脱液，将吸附在离子交换剂上的组分离子逐次洗脱下来，可以达到分离的目的。洗脱液中应当含有与离子交换剂的亲和力较大的离子，以便把吸附在交换剂上的离子交换下来。有时候，同一种洗脱液往往不能达到良好的分离效果，为此可以采用不同的洗脱液进行洗脱
2）离子交换层析原理： 在溶液的pH大于酶（蛋白质）的等电点时，酶分子带负电，而当溶液 pH小于酶的等电点时，酶分子带正电荷。因此，混合溶液中各组分所带 电荷的正负和数量不同。 因此，将欲分离的混合溶液加入到离子交换柱中，采用适当的洗脱液， 将吸附在离子交换剂上的组分离子逐次洗脱下来，可以达到分离的目的。 洗脱液中应当含有与离子交换剂的亲和力较大的离子，以便把吸附在交换 剂上的离子交换下来。有时候，同一种洗脱液往往不能达到良好的分离效 果，为此可以采用不同的洗脱液进行洗脱。 层析分离
阴离子交换剂分离蛋白质的过程免oS★★口口clcrCi★★口CcF平衡去吸附分离结束再生吸附低口高盐盐利用不同盐浓度将不同蛋白质洗脱下来
阴离子交换剂分离蛋白质的过程 平衡 吸附 去吸附 分离结束 再生 + 低 盐 高 盐 利用不同盐浓度将不同蛋白质洗脱下来 Cl- ClCl- ClClClClClClClClClClCl- ClClCl- ClClCl-