层析分离?各种柱层析方法及其原理：1）吸附层析（重要：P97页）定义：利用吸附剂对不同物质的吸附力不同，而使混合液中的各组分分离的方法。·吸附剂：硅藻土，氧化铝，磷酸钙，活性碳吸附剂一般在低pH低离子强度条件下，对酶有较强的吸附作用。而在改变pH和增加离子强度的条件下，酶可被解吸而洗脱下来。因此可以用洗脱剂（具有一定pH和离子强度）洗脱下来。过程：吸附，洗涤，洗脱
各种柱层析方法及其原理： 1）吸附层析（重要；P97页） 定义：利用吸附剂对不同物质的吸附力不同，而使混合液中的各组分分 离的方法。 吸附剂：硅藻土，氧化铝，磷酸钙，活性碳 吸附剂一般在低pH低离子强度条件下，对酶有较强的吸附作用。 而在改变pH和增加离子强度的条件下，酶可被解吸而洗脱下来。因此可 以用洗脱剂（具有一定pH和离子强度）洗脱下来。 过程：吸附，洗涤，洗脱 层析分离
ReservoirSolutionProtein(mobilesamplephase)Solidporousmatrix(stationaryphase)Porous9supportProteinsEffuentA(a)B(b)
solvent continuouslyappliedtothetopofcolumnfromalargesampleappliedreservoirofsolvent受到吸附力和解吸力的作用solidmatrix0O0porousplug洗脱testtube吸附较弱而吸附较强而解液本time解吸力强的吸力弱的组分身组分
洗脱 液本 身 吸附较弱而 解吸力强的 组分 吸附较强而解 吸力弱的组分 受到吸附力和解 吸力的作用
●吸附层析原理：被洗脱组分浓度层析时，欲分离的混合溶液自柱顶加入，当样品液全部进入吸附层析柱之后，再加入洗脱剂解吸洗脱。在洗脱时，层析柱内不断发生解吸、吸附、再解吸、再吸附的过程。即被吸附在吸附剂上的物质在洗脱剂的作用下解吸而随溶液向下移动，又遇到新的吸附剂，被重新吸附，后面流洗脱液体积下的洗脱剂再把它解吸而向下移动，然后再被将被吸附的物质从层析柱中洗脱出来下层的吸附剂吸附。如此反复进行。吸附力弱，分部收集后，分别进行定性、定量而且解吸力强的物质移动距离就大，最终在吸检测。那么以洗脱液体积对被洗脱组附柱内信恒各自的区带。分浓度作图，可以得到洗脱曲线
洗脱液体积 被 洗 脱 组 分 浓 度 吸附层析原理： 层析时，欲分离的混合溶液自柱顶加入，当 样品液全部进入吸附层析柱之后，再加入洗脱 剂解吸洗脱。 在洗脱时，层析柱内不断发生解吸、吸附、 再解吸、再吸附的过程。即被吸附在吸附剂上 的物质在洗脱剂的作用下解吸而随溶液向下移 动，又遇到新的吸附剂，被重新吸附，后面流 下的洗脱剂再把它解吸而向下移动，然后再被 下层的吸附剂吸附。如此反复进行。吸附力弱 而且解吸力强的物质移动距离就大，最终在吸 附柱内信恒各自的区带。 将被吸附的物质从层析柱中洗脱出来 ，分部收集后，分别进行定性、定量 检测。那么以洗脱液体积对被洗脱组 分浓度作图，可以得到洗脱曲线
层析分离?各种层析方法及其原理：02）离子交换层析（重要：P101页）定义：利用离子交换剂上的可解离基团（活性基团）对各种离子的亲和力不同而达到分离目的的一种层析分离方法。·离子交换剂是含有若干活性基团的不溶性高分子物质，即在不溶性母体上引入若干可解离基团（活性基团）而制成
各种层析方法及其原理： 2）离子交换层析（重要；P101页） 定义：利用离子交换剂上的可解离基团（活性基团）对各种离子的亲和 力不同而达到分离目的的一种层析分离方法。 离子交换剂是含有若干活性基团的不溶性高分子物质，即在不溶性母体 上引入若干可解离基团（活性基团）而制成。 层析分离