迅速混匀，立即吸入进行自氧化率(△A/min)的测定。3.实验参数波长340nm延迟时间40s测定时间15s温度25℃4次测定次数进样时间4s冲洗时间4s4.血红蛋白(Hb)测定按氰化高铁血红蛋白法。【计算】SOD活性单位的定义为：以每分钟抑制邻苯三酚自氧化率50%所需要的酶量为1个活性单位。因此，每ml反应液中所含酶的活性按下述公式计算。抑制率 (%)=AL×100AAB红细胞SOD活性(U/m)=抑制率××50%*0.01*0.05=抑制率×V×3600或U/mlSOD活性（UIg·Hb）=x1000Hb (g /ml)式中，△AB：空白管每分钟吸光度的变化值；△Au：测定管每分钟吸光度的变化值；VSOD粗提液体积(ml)；0.9：反应液总体积(ml)；0.01：加入SOD的量(ml)；0.05：血液标本用量(ml)。【参考范围】测定健康人79名(男45名，女34名，年龄18～63岁)其参考范围为3945.5±1269.2U/g-Hb。男：4016.2±1430.5U/gHb；女：3851.9±1009.5U/gHb。【临床意义】SOD是人体防御自由基损伤的主要酶类，可清除体内产生的自由基，使自由基的产生与清除达到平衡。随年龄增长或在疾病情况下，平衡被破坏，自由基在体内堆积，导致生物膜、蛋白质、核酸等的结构与功能受损，引起组织器官功能障碍。大量临床资料表明 SOD 活性异常与人类生理病理及各种疾病(包括心、肺、肝、胃、肾、血液系统等的疾病)以及衰老的发生、发展有密切的联系。体内 SOD含量升高见于急性心肌梗死、粒细胞性白血病、骨髓瘤、淋巴瘤、霍奇金病6
16 迅速混匀，立即吸入进行自氧化率(△A/min)的测定。 3．实验参数 波长 340nm 延迟时间 40s 测定时间 15s 温度 25℃ 测定次数 4 次 进样时间 4s 冲洗时间 4s 4．血红蛋白(Hb)测定 按氰化高铁血红蛋白法。 【计算】 SOD 活性单位的定义为：以每分钟抑制邻苯三酚自氧化率 50%所需要的酶量 为 1 个活性单位。因此，每 ml 反应液中所含酶的活性按下述公式计算。 100 ΔA ΔA ΔA % B B U − 抑制率（ ）= 0.05 V 0.01 0.9 50 / = ％ 抑制率 红细胞SOD活性（U ml） =抑制率×V×3600 或 1000 / / / = （ ） 活性（ ） Hb g ml U ml SOD U g Hb 式中，△AB：空白管每分钟吸光度的变化值；△AU：测定管每分钟吸光度的变化值；V： SOD 粗提液体积(ml)；0.9：反应液总体积(ml)；0.01：加入 SOD 的量(ml)；0.05：血液标本 用量(ml)。 【参考范围】 测定健康人 79 名(男 45 名，女 34 名，年龄 18～63 岁)其参考范围为 3 945.5 ±1 269.2 U/g·Hb。男：4 016.2±1 430.5 U/g·Hb；女：3 851.9±1 009.5 U/g·Hb。 【临床意义】 SOD 是人体防御自由基损伤的主要酶类，可清除体内产生的自由基，使 自由基的产生与清除达到平衡。随年龄增长或在疾病情况下，平衡被破坏，自由基在体内堆 积，导致生物膜、蛋白质、核酸等的结构与功能受损，引起组织器官功能障碍。大量临床资 料表明 SOD 活性异常与人类生理病理及各种疾病(包括心、肺、肝、胃、肾、血液系统等的 疾病)以及衰老的发生、发展有密切的联系。 体内 SOD 含量升高见于急性心肌梗死、粒细胞性白血病、骨髓瘤、淋巴瘤、霍奇金病
以及高血压、精神分裂症等。SOD水平降低见于贫血、非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)、蛛网膜下腔出血、吸烟以及其他疾病时【注意事项】1.所用器材必须清洁干燥2．反应温度、pH值和邻苯三酚的浓度都会影响实验的结果，故应严格控制。3.SOD对邻苯三酚自氧化速率的抑制率在5min内呈线性。4．自氧化率线性速率以△A/min=0.06为标准，因此空白管(B)的△A/min必须控制在0.06～0.07之间，否则可适当增减邻苯三酚的用量来达到上述要求。5．红细胞提取液和溶血液应密闭或加塞，于4℃可保存10d。6．由于目前测定 SOD多利用它抑制某种氧化还原反应的能力来间接反映SOD的活性，并存在反应条件和方法的差异，因此参考范围也各不相同，建议各室建立自已的参考范围。【评价】邻苯三酚自氧化抑制法所需样本量少(仅50uI)、快速、操作简单、灵敏度高、重复性好。第二节转移酶类测定转移酶类(transferases)能催化双底物分子之间的基团的转移，将供体分子基团或辅酶转移给受体分子的反应。这一类酶不仅在物质代谢中起重要作用；而且在机体发生病理改变时，血清中某些转移酶的活性发生相应的变化，可为疾病的诊断和病情判断提供重要信息。目前，丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、-谷氨酰基转移酶和肌酸激酶等已在临床诊断中得到广泛的应用。实验99赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶【原理】L-丙氨酸+α-酮戊二酸—AT→α-丙酮酸+L-谷氨酸α-丙酮酸 +2, 4二硝基苯胖一碳性条件下→2. 4-二硝基苯腺（红棕色，入=505nm）
17 以及高血压、精神分裂症等。 SOD 水平降低见于贫血、非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)、蛛网膜下腔出血、吸烟以及 其他疾病时。 【注意事项】 1．所用器材必须清洁干燥。 2．反应温度、pH 值和邻苯三酚的浓度都会影响实验的结果，故应严格控制。 3．SOD 对邻苯三酚自氧化速率的抑制率在 5min 内呈线性。 4．自氧化率线性速率以△A/min=0.06 为标准，因此空白管(B)的△A/min 必须控制在 0.06～0.07 之间，否则可适当增减邻苯三酚的用量来达到上述要求。 5．红细胞提取液和溶血液应密闭或加塞，于 4℃可保存 10d。 6．由于目前测定 SOD 多利用它抑制某种氧化还原反应的能力来间接反映 SOD 的活性， 并存在反应条件和方法的差异，因此参考范围也各不相同，建议各室建立自己的参考范围。 【评价】 邻苯三酚自氧化抑制法所需样本量少(仅 50μl)、快速、操作简单、灵敏度高、 重复性好。 第二节 转移酶类测定 转移酶类(transferases)能催化双底物分子之间的基团的转移，将供体分子基团或辅酶转移 给受体分子的反应。这一类酶不仅在物质代谢中起重要作用；而且在机体发生病理改变时， 血清中某些转移酶的活性发生相应的变化，可为疾病的诊断和病情判断提供重要信息。目前， 丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰基转移酶和肌酸激酶等已在临床诊断中得到广泛 的应用。 实验 99 赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶 【原理】 L-丙氨酸 + α-酮戊二酸 ⎯ALT⎯→ α-丙酮酸 + L-谷氨酸 α-丙酮酸 + 2，4-二硝基苯肼 ⎯碱性条件下 ⎯⎯⎯→ 2，4-二硝基苯腙 (红棕色，λ=505nm)