沉降分析法测定蛋白质 的分子量 用沉降分析法测定蛋白质分子的相对分子量 需要超速离心机,超速离心机的转速可以达到每 分钟6万~8万转,这样高的转速使得被离心的分 子受到的离心力达到40万~70万g
沉降分析法测定蛋白质 的分子量 用沉降分析法测定蛋白质分子的相对分子量 需要超速离心机，超速离心机的转速可以达到每 分钟6万～8万转，这样高的转速使得被离心的分 子受到的离心力达到40万～70万g
超速离心机工作原理 转头腔 马达 Q光源 液面沉降界面 滤光片 溶液 空气 沉降样品 柔性驱动轴准直 转头c 透镜 溶剂 分析池 沉降方向 配衡池 热敏温度计 驱动马达 聚光透镜 真空 Schlieren光阑 冷冻 真空 冷冻 照相机透镜心 沉降界面 制备型超速离心机 圆柱形透镜 dn/dx 底板 分析型超速离心机
超速离心机工作原理 制备型超速离心机 分析型超速离心机
被离心分子的受力情况分析 轴 空气弯液面溶液 底 F 多 x=0 x
被离心分子的受力情况分析
沉降速度法工 在离心场中蛋白质分子颗粒发生沉降时,它将受 到三种力的作用: F(离心力=mn2O2x Fb(浮力=Vnpo2x mvps x F(摩擦力=fv=f dt 离心力减去浮力为分子颗粒受到的净离心力: c-Fb=mpofx-mpvpox=max(-vp)
沉降速度法Ⅰ 在离心场中蛋白质分子颗粒发生沉降时，它将受 到三种力的作用： F m x c p 2 (离心力) = F V x m v x b p p 2 2 (浮力) = = dt dx Ff (摩擦力) = f v = f 离心力减去浮力为分子颗粒受到的净离心力： (1 ) 2 2 2 Fc − Fb = mp x − mp v x = mp x − v
沉降速度法Ⅱ 当分子颗粒以恒定速度移动时,净离心力 与摩擦力大小相等,方向相反: Fc-Fb=F Bp pox(l-vp)=f 整理得m(1-) f 等号左边为单位离心场的沉降速度,右边为定 值,可见单位离心场的沉降速度是一个定值。将此 定值称为沉降系数( sedimentation coefficient) 用s(小写)表示
沉降速度法Ⅱ Fc − Fb = Ff dt dx m x v f p (1− ) = 2 f m v x dt dx p (1 ) 2 − = 当分子颗粒以恒定速度移动时，净离心力 与摩擦力大小相等，方向相反： 即 整理得 等号左边为单位离心场的沉降速度，右边为定 值，可见单位离心场的沉降速度是一个定值。将此 定值称为沉降系数（sedimentation coefficient）， 用 s（小写）表示