根据化学组成测定最低分子量 若蛋白质中含有n个被测原子,则分子量 等于最低分子量×n 若某蛋白质中某种氨基酸的含量特别低, 通过测定这种氨基酸的含量,也可用此法计 算出蛋白质的分子量
根据化学组成测定最低分子量 若蛋白质中含有n个被测原子，则分子量 等于最低分子量×n. 若某蛋白质中某种氨基酸的含量特别低， 通过测定这种氨基酸的含量，也可用此法计 算出蛋白质的分子量
渗 透 渗透压h 定 的 溶剂 蛋白质 溶液 半透膜
渗透压测定的示意图
Van't hot公式 在理想溶液中,溶液的渗透压与溶质浓度的 关系可用Van’ t Hoff公式表示: z÷团AY 8 RT =8 RT CRT Mr v VMr M 式中π是渗透压(N/m2,即Pa),V是溶液 的体积(m3),m是溶液中溶质的摩尔数,g是溶 质的质量(g),C是溶质的浓度(g/m3),T是 绝对温度(K),R是气体常数 (8314J/(Kmo),Mr为溶质的分子量或摩尔 质量(g/mol)
Van’t Hoff 公式 在理想溶液中，溶液的渗透压与溶质浓度的 关系可用Van’t Hoff公式表示： V RT M g V nRT r = = r Mr cRT M RT V g = = 式中π是渗透压（N/m2 ，即Pa），V是溶液 的体积（m3），n是溶液中溶质的摩尔数，g是溶 质的质量（g），C是溶质的浓度（g /m3），T是 绝 对 温 度 （ K ） ， R 是 气 体 常 数 （8.314J/(K·mol)），Mr为溶质的分子量或摩尔 质量（g /mol）
渗透压法测定蛋白质 的分子量 蛋白质溶液与理想溶液有较大的偏差。在 溶质浓度不大时,它们的关系可用下式表示: 丌=R1/c 丌RT +Kc t rTRc M RT RT M 元 RTRc C 当c趋向于0时,RTKc趋向于0,但π/c不趋向于0, 而是趋向于一定值
渗透压法测定蛋白质 的分子量 蛋白质溶液与理想溶液有较大的偏差。在 溶质浓度不大时，它们的关系可用下式表示： = + 2 Kc M c RT r RTKc M RT c r = + c RT M c r 0 lim → = RTKc c RT Mr − = 当c 趋向于0时，RTKc 趋向于0，但π/c 不趋向于0， 而是趋向于一定值
渗透压法测定蛋白质 的分子量 测定几个不同浓度下的渗透压,以π/c对c作 图,并外推至c为0时的π/c,再代入上式求得Mr。 为了避免溶液中其它无机离子的影响,在溶 解度许可的范围内,尽量采用等电点或接近于等 电点的缓冲液作膜内外的溶剂,并增加缓冲液中 无机盐的浓度
渗透压法测定蛋白质 的分子量 测定几个不同浓度下的渗透压，以π/c对c作 图，并外推至c为0时的π/c，再代入上式求得Mr。 为了避免溶液中其它无机离子的影响，在溶 解度许可的范围内，尽量采用等电点或接近于等 电点的缓冲液作膜内外的溶剂，并增加缓冲液中 无机盐的浓度