沉降速度法Ⅲ dt dIn x 2. 303 d log x 0x 0 dt dt d log是1ogx对t作图所得直线的斜率,因此测得 dt 在t 1912,3 时间相应的x1,x2,x3,…,作图求出斜 率,代入上式即可求出沉降系数s,沉降系数的单 位是秒。 g so dt2.303
沉降速度法Ⅲ dt d x dt d x dt x dx x dt dx s 2 2 2 2 ln 2.303 log = = = = 是logx对t作图所得直线的斜率，因此测得 在t1 , t 2 , t 3 , …时间相应的x1 , x2 , x3 , …，作图求出斜 率，代入上式即可求出沉降系数 s，沉降系数的单 位是秒。 dt d log x 2.303 log 2 s dt d x =
沉降速度法Ⅳ 蛋白质、核酸、核糖体和病毒等的沉降系数 介于1×10-13到200×10-13秒之间。为了使用方 便,以10-13秒为一个沉降系数的单位,称为斯维 得贝格单位( Svedberg unit),或称沉降系数单 位,用S(大写)表示。如人血红蛋白的s为 446×10-13秒,即446S
沉降速度法Ⅳ 蛋白质、核酸、核糖体和病毒等的沉降系数 介于1×10－13到200×10－13秒之间。为了使用方 便，以10－13秒为一个沉降系数的单位，称为斯维 得贝格单位（Svedberg unit），或称沉降系数单 位，用 S （大写）表示。如人血红蛋白的s为 4.46×10－13秒，即4.46S
沉降速度法V 由于测定时温度和溶剂性质对s值都有影响, 需要校正成标准条件下的s值,这样才便于比较。 标准条件是20℃,溶剂是水。标准条件下的s值记 为S20m。校正公式如下: 1,b(0p-20, S20.w Stb 120(0p-pb) 由于蛋白质浓度增加,分子间可能彼此干扰, 使得s值减小。为排除因蛋白质浓度造成的测定误 差,可测出一系列在不同浓度蛋白质溶液中的s值, 然后外推至浓度为0时的s20m
沉降速度法Ⅴ − − = ( ) ( ) 20, , , 20, 20, , w p t b t b p w s w st b 由于测定时温度和溶剂性质对s值都有影响， 需要校正成标准条件下的s值，这样才便于比较。 标准条件是20℃，溶剂是水。标准条件下的s值记 为 。校正公式如下： 由于蛋白质浓度增加，分子间可能彼此干扰， 使得s值减小。为排除因蛋白质浓度造成的测定误 差，可测出一系列在不同浓度蛋白质溶液中的s值， 然后外推至浓度为0时的 s20 ,w 。 s20,w
沉降速度法Ⅵ 蛋白质分子颗粒的质量mp=,爱因斯 坦一萨德兰德方程:f RT 。式中M是蛋白质 ND 的分子量,N为阿伏加德罗常数,f为摩擦系数, R为气体常数,T为绝对温度,D为扩散系数。 将上述两式代入s== (1-vp) 得 Mr ND RTs (1-vp) N RT D(-vp) 此式称为 Svedberg方程,代入各种数据可 计算出蛋白质的分子量
蛋白质分子颗粒的质量 ，爱因斯 坦－萨德兰德方程： 。式中Mr是蛋白质 的分子量，N为阿伏加德罗常数，f为摩擦系数， R为气体常数，T为绝对温度，D为扩散系数。 将上述两式代入 得 沉降速度法Ⅵ N M m r p = ND RT f = f m v s p (1− ) = (1 v) RT ND N M s r = − D(1 v) RT s M r − = 此式称为Svedberg方程，代入各种数据可 计算出蛋白质的分子量
氨基酸残基的偏微分比容 氨基酸偏微分比容氨基酸偏微分比容 Gly 0.64 ys 0.61 Ala 0.74 Trp 0.74 Ser 0.63 0.71 Thr 0.70 His 0.67 Val 0.86 g 0.70 Leu、Ile 0.90 LS 0.82 Pro 0.76 Asp 0.60 Met 0.75 Glu 0.66 Phe 0.77 GIn 0.67
氨基酸残基的偏微分比容 氨基酸 偏微分比容 氨基酸 偏微分比容 Gly 0.64 Cys 0.61 Ala 0.74 Trp 0.74 Ser 0.63 Tyr 0.71 Thr 0.70 His 0.67 Val 0.86 Arg 0.70 Leu、Ile 0.90 Lys 0.82 Pro 0.76 Asp 0.60 Met 0.75 Glu 0.66 Phe 0.77 Gln 0.67