第二节陈的提取 1、盐溶液提取 ·盐溶现象：一般在低盐浓度的情况下，酶蛋白的溶解 度随盐浓度的升高而增加的现象。 ·盐析现象：一般在一定盐浓度的情况下，酶蛋白的溶 解度随盐浓度的升高而降低，并从溶液中析出的现象。 ●盐浓度一般控制在0.02-0.5M ·酵母醇脱氢酶-0.5mol/磷酸氢二钠； 枯草杆菌碱性磷酸酶0.1molL氯化镁 Salting-in: 度 lonic strength 分子在其等冠特，客品五相吸引·系合成沉源：加入 子破些吸引力·使分子，神入水中
1、盐溶液提取 • 盐溶现象：一般在低盐浓度的情况下，酶蛋白的溶解 度随盐浓度的升高而增加的现象。 • 盐析现象：一般在一定盐浓度的情况下，酶蛋白的溶 解度随盐浓度的升高而降低，并从溶液中析出的现象。 • 盐浓度一般控制在0.02-0.5M • 酵母醇脱氢酶-0.5mol/L磷酸氢二钠; 枯草杆菌碱性磷酸酶-0.1mol/L氯化镁 第二节 酶的提取
第二节酶的提取 。2.酸溶液提取(2-6) 用0.12M硫酸溶液从胰脏中提取胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶。 。3.碱溶液提取 大肠杆菌的L一天冬酰胺酶的提取：将湿菌体悬浮在pH11 ~12.5的碱溶液中，振荡20min。 。4.有机溶剂提取 与脂质结合比较牢固或分子中含非极性基团较多的酶。丁 醇用于提取琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、胆碱酯酶等
2. 酸溶液提取（2-6） 用0.12M硫酸溶液从胰脏中提取胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶。 ３．碱溶液提取 大肠杆菌的Ｌ－天冬酰胺酶的提取：将湿菌体悬浮在pH11 ～12.5的碱溶液中，振荡20min。 ４．有机溶剂提取 与脂质结合比较牢固或分子中含非极性基团较多的酶。丁 醇用于提取琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、胆碱酯酶等。 第二节 酶的提取
第二节陈的提取 提取方法 使用的溶剂或溶液 提取对象 盐溶液提取 0.02~0.5mo1/L的盐 低浓度盐溶液中溶解度较大的 溶液 酶 酸溶液提取 PH2~6的水溶液 稀酸溶液中溶解度大，且稳定 性较好的酶 碱溶液提取 PH8~12的水溶液 稀碱溶液中溶解度大且稳定性 较好的酶 有机溶剂提 可与水混溶的有机溶 那些与脂质结合牢固或含有较 取 多非极性基团的酶
第二节 酶的提取 提取方法 使用的溶剂或溶液 提取对象 盐溶液提取 0.02～0.5mol/L的盐 溶液 低浓度盐溶液中溶解度较大的 酶 酸溶液提取 PH2～6的水溶液 稀酸溶液中溶解度大，且稳定 性较好的酶 碱溶液提取 PH8～12的水溶液 稀碱溶液中溶解度大且稳定性 较好的酶 有机溶剂提 取 可与水混溶的有机溶 剂 那些与脂质结合牢固或含有较 多非极性基团的酶
第三节酶的分离纯化 目的：浓缩；去杂质 1. 离心分离 2、沉淀分离 3、过滤与膜分离 4、萃取分离 5、层析分离 6、电泳分离
第三节 酶的分离纯化 1、离心分离 2、沉淀分离 3、过滤与膜分离 4、萃取分离 Go Go Go Go Go 5、层析分离 Go 6、电泳分离 目的：浓缩；去杂质
第三节酶的分离化化（沉淀分离 沉淀分离方法 。定义：通过添加某些试剂或者改变某些环境条件，使 溶液中某种溶质的溶解度降低，生成固体凝聚物的现象 ，达到与其他溶质分离。 ●优点：成本低，设备简单，收率高 。缺点：分辨率低
第三节 酶的分离纯化（沉淀分离） 定义：通过添加某些试剂或者改变某些环境条件，使 溶液中某种溶质的溶解度降低，生成固体凝聚物的现象 ，达到与其他溶质分离。 优点：成本低，设备简单，收率高 缺点：分辨率低。 沉淀分离方法