◼ 4、DNA与蛋白质之间的结合强度应该是较弱 的,否则难以分离DNA与蛋白质,在用变性剂 去蛋白质时,往往要重复多次主能把蛋白除尽。 多年来的实践证明,除了犊牛胸腺外,水产品 中,淡水鱼,鱼等精巢均是较理想的原料,其 次为蓝圆、大黄鱼和马面鱼精巢。 ◼ 根据上面四个原则,很自然地提出了对原料新 鲜度的要求,因为新鲜的才不会被解聚。而要 想达到DNA含量高的要求,则必须在适当的生 长时期采集,并且要设法抑制Dnase的解聚活 力
◼ 4、DNA与蛋白质之间的结合强度应该是较弱 的,否则难以分离DNA与蛋白质,在用变性剂 去蛋白质时,往往要重复多次主能把蛋白除尽。 多年来的实践证明,除了犊牛胸腺外,水产品 中,淡水鱼,鱼等精巢均是较理想的原料,其 次为蓝圆、大黄鱼和马面鱼精巢。 ◼ 根据上面四个原则,很自然地提出了对原料新 鲜度的要求,因为新鲜的才不会被解聚。而要 想达到DNA含量高的要求,则必须在适当的生 长时期采集,并且要设法抑制Dnase的解聚活 力
(三)、DNA-Na提取工艺 制取DNA-Na的具体方法很多,但各种方法最根 本的均可归结为下面几步: ◼ 第一步:借机械或化学的历代法把组织的细胞 破坏,并从中分离出纯净的DNA-蛋白质。 ◼ 第二步:以DNA-蛋白质为原烂漫,把它分成 DNA与蛋白质两部分。 ◼ 第三步:把DNA部分由离心分出(离心液), 并对其重复纯化,去除蛋白质等杂质。 ◼ 第四步:将DNA钠盐干燥
(三)、DNA-Na提取工艺 制取DNA-Na的具体方法很多,但各种方法最根 本的均可归结为下面几步: ◼ 第一步:借机械或化学的历代法把组织的细胞 破坏,并从中分离出纯净的DNA-蛋白质。 ◼ 第二步:以DNA-蛋白质为原烂漫,把它分成 DNA与蛋白质两部分。 ◼ 第三步:把DNA部分由离心分出(离心液), 并对其重复纯化,去除蛋白质等杂质。 ◼ 第四步:将DNA钠盐干燥
◼ 酚与CHCL3 -5%SDS复合法,是浙江水产 学院在吸取国外各种方法长处的基础上, 经筛选改进而提出的适合工业化生产的 制备工艺,它具有产率高,质量稳定, 操作方便,周期短,成本较低诸优点
◼ 酚与CHCL3 -5%SDS复合法,是浙江水产 学院在吸取国外各种方法长处的基础上, 经筛选改进而提出的适合工业化生产的 制备工艺,它具有产率高,质量稳定, 操作方便,周期短,成本较低诸优点
工艺流程 原料 → 匀浆 → 搅拌→ 酚法变性 → 静置 → 离心或过滤 → 用5%SDS与CHCL3作 第二次变性 → 离心或过滤 → 析出 DNANa纤维 → 洗涤 →真空干燥 → 产品 检验→ 成品及其包装
工艺流程 原料 → 匀浆 → 搅拌→ 酚法变性 → 静置 → 离心或过滤 → 用5%SDS与CHCL3作 第二次变性 → 离心或过滤 → 析出 DNANa纤维 → 洗涤 →真空干燥 → 产品 检验→ 成品及其包装
操作要点: 1、原料处理 对新鱼或冻藏鱼精除去污物 和结缔组织。 2、匀浆 以原料与高盐溶液(2MnaCL- 0.015M柠檬酸三钠溶液)比为1:3加入高 盐液,以12000r/min×1′45″匀浆。 3、第一次变性 以原料与酚饱和溶液比为1: 0.8后加速离心(3200r/min×30′)
操作要点: 1、原料处理 对新鱼或冻藏鱼精除去污物 和结缔组织。 2、匀浆 以原料与高盐溶液(2MnaCL- 0.015M柠檬酸三钠溶液)比为1:3加入高 盐液,以12000r/min×1′45″匀浆。 3、第一次变性 以原料与酚饱和溶液比为1: 0.8后加速离心(3200r/min×30′)