微型胶囊法
16 微型胶囊法
半透膜包埋法，固定化的酶不会从小球中漏 出来。这样对于大分子的底物的进入和大分子产 物的扩散出去都是不利的。 所以半透膜包埋法和凝胶包埋法一样，也不 适用于那些底物或产物分子很大的酶类的固定化
半透膜包埋法，固定化的酶不会从小球中漏 出来。这样对于大分子的底物的进入和大分子产 物的扩散出去都是不利的。 所以半透膜包埋法和凝胶包埋法一样，也不 适用于那些底物或产物分子很大的酶类的固定化
酶 3、结合法 载体 选择适宜的载体，通过载体的共价键或离子键与 酶结合在一起的固定化方法。 ()离子键结合法 载体：DEAE-纤维素、TEAE-纤维素、DEAE-葡聚糖凝 胶等离子交换剂（电荷基团DEAE:二乙氨基乙基 ,TEAE:三乙氨基乙基) 18
18 选择适宜的载体,通过载体的共价键或离子键与 酶结合在一起的固定化方法。 酶 载体 (1)离子键结合法 载体:DEAE-纤维素、TEAE-纤维素、DEAE-葡聚糖凝 胶等离子交换剂 (电荷基团 DEAE:二乙氨基乙基 ,TEAE:三乙 氨基乙基) 3、结合法
操作： 将DEAE葡聚糖凝胶装进离子交换柱，用NaOH处 理，使之成为-0H型，再用H7.0的磷酸缓冲液 平衡。另将氨基酰化酶溶于pH7.0的磷酸缓冲液。 在37℃条件下，让酶慢慢流过离子交换柱，就 可制备成固定化氨基酰化酶。用于拆分乙酰-DL- 氨基酸，生产L-氨基酸
操作： 将DEAE葡聚糖凝胶装进离子交换柱，用NaOH处 理，使之成为-OH型，再用pH 7.0的磷酸缓冲液 平衡。另将氨基酰化酶溶于pH 7.0的磷酸缓冲液。 在37℃条件下，让酶慢慢流过离子交换柱，就 可制备成固定化氨基酰化酶。用于拆分乙酰-DL- 氨基酸，生产L-氨基酸。
(2)共价键结合法 载体：纤维素、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶、甲壳质等： 方法：要使载体与酶形成共价键，必须首先使载体活化， 即借助于某种方法，在载体上引进一活泼基团。然后此 活泼基团再与酶分子上的某一基团反应，形成共价键。 酶分子中可以形成共价键的基团主要有氨基、羧 基、巯基、羟基、酚基和咪唑基等。 优点：结合很牢固，酶可连续使用较长时间 缺点：操作复杂，共价结合可能影响酶的空间构象而影 响酶的催化活性 20
20 载体: 纤维素、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶、甲壳质等; 方法: 要使载体与酶形成共价键，必须首先使载体活化， 即借助于某种方法，在载体上引进一活泼基团。然后此 活泼基团再与酶分子上的某一基团反应，形成共价键。 酶分子中可以形成共价键的基团主要有氨基、羧 基、巯基、羟基、酚基和咪唑基等。 优点: 结合很牢固，酶可连续使用较长时间 缺点: 操作复杂，共价结合可能影响酶的空间构象而影 响酶的催化活性 (2)共价键结合法