生物大分子波谐学原理 吴季辉 7.4三共振谱 三共振实验的命名方式： 在间接维或采样维标记的自旋用HN,N,HA,CA,CO,HB,CB等表示，分别代表 1HN,15N,H,13C,13CO,H,13C,不会引起误解时还可进一步简化：信号传递过程中经过并起 重要作用，但没有频率标记的自旋用类似符号，但放在括号内以示区别。 例： 一个三共振实验利用下列相千传递： H→15N(G）→C0→C(2）→C0→5N→'H(4) 按照上述可以称为(HN)N(CO)CA(CO)N)NH实验，这个实验属于”out and back'”类型， 有相当一部分三共振实验属于此类型，由于事实上这类实验激发与检测均是H核，因此可 以将回传部分略去而不会导致误解，即省略成(HNN(CO)CA,由于同N相连的H只能是 HN,所以可以简化成(H),而最后检测的正是这个H,故实际上用的名称为HN(CO)CA 当然这个名称也可用于描述下列相千传递： 1Hw→15N→13CO13C“(t)）→CO→5N(t2)→1Hw(t) 实际上这两个实验提供的信息一样，同一个实验可以有不同的实现方案。 'Ja≈91Hz'Jc≈7-11也2Jc4-9H五Jxo15,1Jo≈55Hz 'Jcm≈l40Hz((aliphatic,)'Jcg≈160H((aromatic,).'Jco≈35
7.4 三共振谱 生物大分子波谱学原理 吴季辉
生物大分子波谱学原理 吴季辉 1J-and 2J-couplings in proteins 13 35H 13 13 35 Hz 35 Hz. 13 55H13 515N -1H13 55H13 7Hz 140Hz -92H <IH H
1J- and 2J-couplings in proteins 生物大分子波谱学原理 吴季辉
生物大分子波谐学原理 吴季辉 7.3三共振谱 H-C-H H-C一H H-C-H HNCA HCACO HN(CO)CA HCA(CO)N HNCO CBCANH d- HN(CA)CO CBCA(CO)NH H(CA)NH HBHA(CBCACO)NH 0@ 0-C-0 H-C-H ①0-@ H-C-H HBHA(CBCAINH C(CONH-TOCSY HO由
7.3 三共振谱 生物大分子波谱学原理 吴季辉
生物大分子波谱学原理 吴季辉 Relative sensitivity of triple resonance experiments Experiment Assignment Comment Relative S/N[%] HNCO H①，N①，Ci-1) 20 kD.above use 'H labeling 100 HNCA H①，Ni,Co,Cci-I) 20 kD,above use'H labeling 50/15 HN(COCA H(i),N(i),Co(i-1) 20 kD,above use 'Hlabeling 71 HN(CA)CO Hi.Ni,C(① 20 kD,above use 'H labeling 13/4 CBCA(CONH H①，N0,Cci-I,CBi-I) <20 kD,above use 'H labeling 13/9oB HBHACONH H(i),N(i),Hodi-1),Hg(i-1) 20 kD.above use'H labeling 13/90β CBCANH. H(i),N(D),Co(1),CB(i), <15 kD,above use 'H labeling 41.70βi) HNCACB Cofi-1),CB(i-1) 1.3/0.5 ov/B(i-1) (H)CC(CONH- H0,N①，Caliph(.i-l) <15-20 kD,above use 'H labeling TOCSY HCCXCONH- H①，N0.,Haph(i-l) <15-20 kD,above use 'H labeling TOCSY HCCH-TOCSY Haliph.Caliph. 25 kD,-sensitive,but tedious to analyze, combine with HCCONH type experiments
Relative sensitivity of triple resonance experiments 生物大分子波谱学原理 吴季辉