8 V—消耗 EDTA 标准溶液的体积，mL。 四、实验步骤 1．样品处理 精确称量 3～5g 固体样品或 5～10g 液体样品，用干法灰化后，加盐酸(1+4) 5m1，置水浴上蒸干，再加人盐酸(1+4) 5mL 溶解并移入 25mL 容量瓶中，用少量 热去离子水多次洗涤容器，洗液并入容量瓶中，冷却后用去离子水定容。 2．测定 准确移取样液 5mL（视 Ca 含量而定），注人 l00mL 锥形瓶中，加水 15mL， 用 2mo1/L NaOH 溶液调至中性，加入 1%KCN 溶液 1 滴，0.05mol/L 柠檬酸钠溶液 2 mL，2mol/LNaOH 溶液 2 mL，钙指示剂 5 滴，用 EDTA 溶液滴定至溶液由酒红 色变为纯蓝色为终点。记录 EDTA 溶液用量 V。以蒸馏水代替样品做空白试验。 五、结果计算 100 m V (V - V )T V mg /100g 1 0 2 钙（ ）= 式中：T—每毫升 EDTA 标准溶液相当于钙的毫克数，mg/mL； V—滴定样液消耗 EDTA 标准溶液的体积，mL； V0—滴定空白消耗 EDTA 标准溶液的体积，mL； V1—测定时取样液体积，mL ； V2—样液定容总体积，mL。 m—样品质量，g。 六、说明及注意事项 1．样品处理也可采用湿法消化：准确称取样品 2～5g，加人浓硫酸 5～8mL， 浓硝酸 5～8mL，加热消化至试液澄清透明，冷却后定容至 100mL。吸取样液 10 mL 按上述方法操作。 2．用盐酸溶解碳酸钙时，要用表面皿盖好烧杯后再加盐酸，以防喷溅。 3．氰化钾是剧毒物质，必须在碱性条件下使用，以防止在酸性条件下生成 HCN 逸出。测定完的废液要加氢氧化钠和硫酸亚铁处理，使生成亚铁氰化钠后才 能倒掉。 4．加入指示剂后应立即滴定，放置过久会导致终点不明显
8 V—消耗 EDTA 标准溶液的体积，mL。 四、实验步骤 1．样品处理 精确称量 3～5g 固体样品或 5～10g 液体样品，用干法灰化后，加盐酸(1+4) 5m1，置水浴上蒸干，再加人盐酸(1+4) 5mL 溶解并移入 25mL 容量瓶中，用少量 热去离子水多次洗涤容器，洗液并入容量瓶中，冷却后用去离子水定容。 2．测定 准确移取样液 5mL（视 Ca 含量而定），注人 l00mL 锥形瓶中，加水 15mL， 用 2mo1/L NaOH 溶液调至中性，加入 1%KCN 溶液 1 滴，0.05mol/L 柠檬酸钠溶液 2 mL，2mol/LNaOH 溶液 2 mL，钙指示剂 5 滴，用 EDTA 溶液滴定至溶液由酒红 色变为纯蓝色为终点。记录 EDTA 溶液用量 V。以蒸馏水代替样品做空白试验。 五、结果计算 100 m V (V - V )T V mg /100g 1 0 2 钙（ ）= 式中：T—每毫升 EDTA 标准溶液相当于钙的毫克数，mg/mL； V—滴定样液消耗 EDTA 标准溶液的体积，mL； V0—滴定空白消耗 EDTA 标准溶液的体积，mL； V1—测定时取样液体积，mL ； V2—样液定容总体积，mL。 m—样品质量，g。 六、说明及注意事项 1．样品处理也可采用湿法消化：准确称取样品 2～5g，加人浓硫酸 5～8mL， 浓硝酸 5～8mL，加热消化至试液澄清透明，冷却后定容至 100mL。吸取样液 10 mL 按上述方法操作。 2．用盐酸溶解碳酸钙时，要用表面皿盖好烧杯后再加盐酸，以防喷溅。 3．氰化钾是剧毒物质，必须在碱性条件下使用，以防止在酸性条件下生成 HCN 逸出。测定完的废液要加氢氧化钠和硫酸亚铁处理，使生成亚铁氰化钠后才 能倒掉。 4．加入指示剂后应立即滴定，放置过久会导致终点不明显
9 实验五 钙的测定 （高锰酸钾滴定法） 一、实验目的 1.了解钙测定的意义和原理。 2.掌握高锰酸钾滴定法测定钙的方法。 二、实验原理 样品灰化后，用盐酸溶解，加草酸铵溶液生成草酸钙沉淀。沉淀经洗涤后， 溶解于稀硫酸中，游离出的草酸用高锰酸钾标准溶液滴定，C2O4 2-被氧化为 CO2， Mn7+还原为 Mn 2+。生成的草酸和硫酸钙摩尔数相等，从而计算出钙的含量，当溶 液中存在 C2O4 2-时，加人高锰酸钾，发生氧化还原反应，红色立即消失，C2O4 2-完 全被氧化后，高锰酸钾的颜色不再消失，呈现微红色，即为滴定终点，可以精确 测定钙含量。 三、试剂 1．1：4 盐酸溶液 2．1：4 醋酸溶液 3．1：4 NH40H 溶液 4．0.1％甲基红指示剂 5．4％（NH4）2C2Ｏ4 溶液 6．2 mol/L H2SO4 溶液 7．2％ NH40H 溶液 8 ．0.02 mol/L 高锰酸钾标准溶液 四、实验步骤 1.样品处理：含钙量低的样品用干法灰化，含钙高的样品用湿法消化。 A.干法灰化：精确称量 3～5g 固体样品或 5～log 液体样品，干法灰化后加人 1： 4 盐酸 5 mL 置水浴锅上蒸干，再加人 1：4 盐酸 5 mL 溶解并移人 25 mL 容量瓶中， 用热去离子水反复洗涤灰化容器，洗液并人容量瓶中，冷却后用去离子水定容。 B.湿法消化：称取样品 2～5g 于凯氏烧瓶中，加 10 mL 浓硫酸，置电炉上低温 加热至黑色黏稠状，继续升温，滴加高氯酸 2 mL，若溶液不透明，再加 1 一 2 mL 高氯酸，至溶液澄清透明后再加热 20 min，冷却后移入 50 mL 容量瓶定容。 2.测定 准确吸取样液 5 mL（含钙 1～10 mg）移入 15 mL 离心管中，加入甲基红 1 滴， 4%草酸铵 2 mL，1：4 醋酸 0.5 mL，摇匀，用 1：4 氢氧化铵调至微蓝色，再用醋 酸调至微红色。静置 2h，使沉淀完全析出，离心 15 min 去上清液，并用滤纸吸干 管内溶液，向离心管加少量 2%NH40H，用手指弹动离心管，使沉淀松动，再加人 10 mL2% NH40H，离心 20min 去上清液，向沉淀中加人 2 mL 2 mol/L 的硫酸，摇
9 实验五 钙的测定 （高锰酸钾滴定法） 一、实验目的 1.了解钙测定的意义和原理。 2.掌握高锰酸钾滴定法测定钙的方法。 二、实验原理 样品灰化后，用盐酸溶解，加草酸铵溶液生成草酸钙沉淀。沉淀经洗涤后， 溶解于稀硫酸中，游离出的草酸用高锰酸钾标准溶液滴定，C2O4 2-被氧化为 CO2， Mn7+还原为 Mn 2+。生成的草酸和硫酸钙摩尔数相等，从而计算出钙的含量，当溶 液中存在 C2O4 2-时，加人高锰酸钾，发生氧化还原反应，红色立即消失，C2O4 2-完 全被氧化后，高锰酸钾的颜色不再消失，呈现微红色，即为滴定终点，可以精确 测定钙含量。 三、试剂 1．1：4 盐酸溶液 2．1：4 醋酸溶液 3．1：4 NH40H 溶液 4．0.1％甲基红指示剂 5．4％（NH4）2C2Ｏ4 溶液 6．2 mol/L H2SO4 溶液 7．2％ NH40H 溶液 8 ．0.02 mol/L 高锰酸钾标准溶液 四、实验步骤 1.样品处理：含钙量低的样品用干法灰化，含钙高的样品用湿法消化。 A.干法灰化：精确称量 3～5g 固体样品或 5～log 液体样品，干法灰化后加人 1： 4 盐酸 5 mL 置水浴锅上蒸干，再加人 1：4 盐酸 5 mL 溶解并移人 25 mL 容量瓶中， 用热去离子水反复洗涤灰化容器，洗液并人容量瓶中，冷却后用去离子水定容。 B.湿法消化：称取样品 2～5g 于凯氏烧瓶中，加 10 mL 浓硫酸，置电炉上低温 加热至黑色黏稠状，继续升温，滴加高氯酸 2 mL，若溶液不透明，再加 1 一 2 mL 高氯酸，至溶液澄清透明后再加热 20 min，冷却后移入 50 mL 容量瓶定容。 2.测定 准确吸取样液 5 mL（含钙 1～10 mg）移入 15 mL 离心管中，加入甲基红 1 滴， 4%草酸铵 2 mL，1：4 醋酸 0.5 mL，摇匀，用 1：4 氢氧化铵调至微蓝色，再用醋 酸调至微红色。静置 2h，使沉淀完全析出，离心 15 min 去上清液，并用滤纸吸干 管内溶液，向离心管加少量 2%NH40H，用手指弹动离心管，使沉淀松动，再加人 10 mL2% NH40H，离心 20min 去上清液，向沉淀中加人 2 mL 2 mol/L 的硫酸，摇
10 匀，于 70～80℃水浴中加热，将沉淀全部溶解，用 0.02 mol/L 高锰酸钾滴定至微 黄色 30s 不褪色为终点，记录高锰酸钾标准溶液消耗量。 五、结果计算 100 2m V 5c V V 40.08 mg /100g 1 2 钙（ ）= 式中：C—高锰酸钾溶液浓度，mol/L； V—高锰酸钾溶液耗用体积，mL； Vl —用于测定的样液体积，mL； V2—样液定容总体积，mL； m—样品质量，g； 40.08—钙的摩尔质量，g /mol 。 六、说明 1．草酸铵应在溶液酸性时加入，然后再加入氢氧化铵，若先加氢氧化铵再加 草酸铵，样液中的钙会与样品中的磷酸结合成磷酸钙沉淀，使结果不准确。 2．滴定过程要不断摇动，并保持在 70～80℃温度下进行
10 匀，于 70～80℃水浴中加热，将沉淀全部溶解，用 0.02 mol/L 高锰酸钾滴定至微 黄色 30s 不褪色为终点，记录高锰酸钾标准溶液消耗量。 五、结果计算 100 2m V 5c V V 40.08 mg /100g 1 2 钙（ ）= 式中：C—高锰酸钾溶液浓度，mol/L； V—高锰酸钾溶液耗用体积，mL； Vl —用于测定的样液体积，mL； V2—样液定容总体积，mL； m—样品质量，g； 40.08—钙的摩尔质量，g /mol 。 六、说明 1．草酸铵应在溶液酸性时加入，然后再加入氢氧化铵，若先加氢氧化铵再加 草酸铵，样液中的钙会与样品中的磷酸结合成磷酸钙沉淀，使结果不准确。 2．滴定过程要不断摇动，并保持在 70～80℃温度下进行
11 实验六 铁的测定 （邻二氮菲比色法） 一、实验目的 1．了解邻二氮菲比色法测定铁的原理。 2．掌握邻二氮菲比色法测定铁的方法。 二、实验原理 在 pH 值 2～9 的溶液中，邻二氮菲（又称邻菲罗琳，菲绕琳）能与二价铁离 子生成稳定的橙红色络合物，在波长λ=510nm 处有最大吸收，其吸光度与铁含量 成正比，可用比色法测定。在显色前，可用盐酸羟胺把 Fe3+还原为 Fe2+后再作反应。 三、仪器与试剂 1.仪器：分光光度计 2.试剂 ①10%盐酸羟胺溶液，用前配制 ②浓硫酸 ③1mol/L 盐酸溶液 ④10%乙酸钠溶液 ⑤2%高锰酸钾溶液 ⑥0.12%邻二氮菲水溶液（新鲜配制）：称取 0.12 g 邻二氮菲于烧杯中，加 60 mL 水加热至 80℃溶解，冷却后移入 100mL 容量瓶定容。 ⑦铁标准贮备液：准确称取 0.4979 g 硫酸亚铁溶于 100mL 水中，加入 5mL 浓 硫酸微热，溶解后随即逐滴加入 2%高锰酸钾溶液，至最后一滴红色不褪色为止， 用水定容至 1000mL ，此溶液每毫升含 Fe3+100μg。 ⑧铁标准使用液：使用前将标准工作液准确稀释 10 倍，此溶液每毫升含 Fe3+10 μg。 四、实验步骤 1．样品处理 称取均匀样品 10. 0g，干法灰化后，加 2mL(1+1)盐酸于水浴上蒸干，再加入 5mL 蒸馏水，加热煮沸，冷却，移入 100mL 容量瓶用水定容，摇匀。 2．标准曲线绘制 准确吸取上述铁标准使用液 0.0, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0mL，分别置于 50mL 容量 瓶中，加入 1mol/L 盐酸 1mL，10%盐酸羟胺 1mL，0.12%邻二氮菲 1mL，10%乙 酸钠 5mL，然后用水稀释至刻度摇匀。10min 后，用 l cm 比色皿，以不加铁标的 试剂空白作参比，在 510nm 波长处测定各溶液的吸光度，以含铁量为横坐标，吸
11 实验六 铁的测定 （邻二氮菲比色法） 一、实验目的 1．了解邻二氮菲比色法测定铁的原理。 2．掌握邻二氮菲比色法测定铁的方法。 二、实验原理 在 pH 值 2～9 的溶液中，邻二氮菲（又称邻菲罗琳，菲绕琳）能与二价铁离 子生成稳定的橙红色络合物，在波长λ=510nm 处有最大吸收，其吸光度与铁含量 成正比，可用比色法测定。在显色前，可用盐酸羟胺把 Fe3+还原为 Fe2+后再作反应。 三、仪器与试剂 1.仪器：分光光度计 2.试剂 ①10%盐酸羟胺溶液，用前配制 ②浓硫酸 ③1mol/L 盐酸溶液 ④10%乙酸钠溶液 ⑤2%高锰酸钾溶液 ⑥0.12%邻二氮菲水溶液（新鲜配制）：称取 0.12 g 邻二氮菲于烧杯中，加 60 mL 水加热至 80℃溶解，冷却后移入 100mL 容量瓶定容。 ⑦铁标准贮备液：准确称取 0.4979 g 硫酸亚铁溶于 100mL 水中，加入 5mL 浓 硫酸微热，溶解后随即逐滴加入 2%高锰酸钾溶液，至最后一滴红色不褪色为止， 用水定容至 1000mL ，此溶液每毫升含 Fe3+100μg。 ⑧铁标准使用液：使用前将标准工作液准确稀释 10 倍，此溶液每毫升含 Fe3+10 μg。 四、实验步骤 1．样品处理 称取均匀样品 10. 0g，干法灰化后，加 2mL(1+1)盐酸于水浴上蒸干，再加入 5mL 蒸馏水，加热煮沸，冷却，移入 100mL 容量瓶用水定容，摇匀。 2．标准曲线绘制 准确吸取上述铁标准使用液 0.0, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0mL，分别置于 50mL 容量 瓶中，加入 1mol/L 盐酸 1mL，10%盐酸羟胺 1mL，0.12%邻二氮菲 1mL，10%乙 酸钠 5mL，然后用水稀释至刻度摇匀。10min 后，用 l cm 比色皿，以不加铁标的 试剂空白作参比，在 510nm 波长处测定各溶液的吸光度，以含铁量为横坐标，吸
12 光度值为纵坐标，绘制标准曲线。 3．样品测定 准确吸取样液 5～10mL（视铁含量的高低）于 50mL 容量瓶中，按标准曲线 的制作步骤，加人各种试剂，测定吸光度，在标准曲线上查出相对应的铁含量（μ g）。 五、结果计算 100( g/100g) m V C V 1 2 铁含量＝ 式中 C—从标准曲线上查得测定用样液相应的铁含量，μg; V1—测定用样液体积，mL; V2—样液总体积，mL； m—样品质量，g。 六、说明及注意事项 1．Cu2+、Ni2+、Co2+、Zn2+、Hg2+、Cd2+、Mn2+等离子也能与邻二氮菲生成稳 定的络合物，少量时不影响测定，量大时可用 EDTA 掩蔽或预先分离。 2．加入试剂的顺序不能任意改变，否则会因为 Fe3+水解等原因造成较大误差。 3．微量元素分析的样品制备过程中要注意防止各种污染，所用各种设备必须 是不锈钢制品。所用容器必须使用玻璃或聚乙烯制品。 4．加入 10%乙酸钠的目的是调节溶液 pH 值至 3～5，使二价铁更能与邻二氮 菲定量地络合，发色较为完全
12 光度值为纵坐标，绘制标准曲线。 3．样品测定 准确吸取样液 5～10mL（视铁含量的高低）于 50mL 容量瓶中，按标准曲线 的制作步骤，加人各种试剂，测定吸光度，在标准曲线上查出相对应的铁含量（μ g）。 五、结果计算 100( g/100g) m V C V 1 2 铁含量＝ 式中 C—从标准曲线上查得测定用样液相应的铁含量，μg; V1—测定用样液体积，mL; V2—样液总体积，mL； m—样品质量，g。 六、说明及注意事项 1．Cu2+、Ni2+、Co2+、Zn2+、Hg2+、Cd2+、Mn2+等离子也能与邻二氮菲生成稳 定的络合物，少量时不影响测定，量大时可用 EDTA 掩蔽或预先分离。 2．加入试剂的顺序不能任意改变，否则会因为 Fe3+水解等原因造成较大误差。 3．微量元素分析的样品制备过程中要注意防止各种污染，所用各种设备必须 是不锈钢制品。所用容器必须使用玻璃或聚乙烯制品。 4．加入 10%乙酸钠的目的是调节溶液 pH 值至 3～5，使二价铁更能与邻二氮 菲定量地络合，发色较为完全