(1)光源：分光光度计上常用的光源有两种：钨丝灯或氢灯，在可见光区，近紫外光 区和近红外光区常用钨丝灯作为光源在紫外光区多使用氢弧灯。 (2)单色器：把混合光波分解为单一波长光的装置。在分光光度计中多用作为色散元 件。光波通过棱镜时，不同波长的光折射率不同，因而能将不同波长的光分开，玻璃对紫外 线的吸收力强，故玻璃棱镜多用于可见光分光光度计：石英棱镜可在整个紫外光区传播光， 故在紫外光分光光度计中广为应用。在石英或玻璃表面上刻划许多平行线（每英寸约刻 15,000~30,000条)，由于刻线处不透光通过光的干涉和衍射使较长的光波偏折角度大，较短 的光波偏折角度小，因而形成光谱。光源照到棱镜或光栅以前，先要经过一个入射狭缝，再通 过平行光镜使成为平行光束投到棱镜上。透过棱镜的光再经另一聚光镜，在此聚光镜的焦面 内可得一清楚的光谱图。如在焦线处放一出射狭缝，转动棱镜使光谱移动，就可以从出射狭 缝射出所需要的单色光。整个装置称为“单色器”。 (3)吸收池：吸收池又称比色杯、比色皿、比色池。一般由玻璃、石英或熔凝石英制 成，用来盛被测的溶液。在低于350m的紫外光区工作时，必须采用石英池或熔凝石英池。 吸收池（比色皿）必须与光束方向垂直。此外，每套比色皿的质料，厚度应完全相同，以免 产生误差。比色皿上的指纹、油污或壁上的沉积物都会显著地影响其透光性，因此在使用前 务必彻底清洗。 (4)光电转换装置：常用光电池、光电管和光电倍增管三种。 光电池：装在一个特制的匣子里面由3层物质组成的圆形或长方形薄片。第一层是一种 导电性良好的金属，这是光电池的负极，中间极薄的一层是半导体硒，第3层是铁，这是光 电池的正极。当光电池受光照射以后，半导体硒的表面逸出电子，这些电子只向负极方向移 动，而不向正极移动，因此在上下两金属片间产生一个电位差，线路连通时即产生电流 光电管：光电管是由封装在真空透明封套里的一个半圆柱型阴极和一个丝阳极组成阴 极的凹画上有一层光电发射材料，此种物质经光照射可发射电子。当在两极间加有电位时， 发射出来的电子就流向丝阳极而产生光电流对于相同的辐射强度，它所产生的电流约为光 电池所产生电流的14。由于光电管具有很高的电阻，所以产生的电流容易放大。 光电倍增管：它比普通的光电管优越，它可将第一次发射出的电子数目放大到数百万倍。 当电子打在兼性阳极上时，能引起更多的电子自表面射出。这些射出的电子又被第二个兼性 阳极所吸引，同样再产生更多的电子。此过程重复9次后，每个光子可形成10的一10个电 子，这些电子最后被收集在阳极上。所得到的倍增电流可进一步加以放大和测量。 (5)测量装置：一般常用的紫外光和可见光分光光度计有3种测量装置，即电流表
（1）光 源：分光光度计上常用的光源有两种：钨丝灯或氢灯，在可见光区，近紫外光 区和近红外光区常用钨丝灯作为光源;在紫外光区多使用氢弧灯。 （2）单色器：把混合光波分解为单—波长光的装置。在分光光度计中多用作为色散元 件。光波通过棱镜时，不同波长的光折射率不同，因而能将不同波长的光分开，玻璃对紫外 线的吸收力强，故玻璃棱镜多用于可见光分光光度计；石英棱镜可在整个紫外光区传播光, 故在紫外光分光光度计中广为应用。在石英或玻璃表面上刻划许多平行线（每英寸约刻 15,000～30,000 条），由于刻线处不透光,通过光的干涉和衍射使较长的光波偏折角度大,较短 的光波偏折角度小,因而形成光谱。光源照到棱镜或光栅以前,先要经过一个入射狭缝，再通 过平行光镜使成为平行光束投到棱镜上。透过棱镜的光再经另一聚光镜，在此聚光镜的焦面 内可得一清楚的光谱图。如在焦线处放—出射狭缝,转动棱镜使光谱移动，就可以从出射狭 缝射出所需要的单色光。整个装置称为“单色器”。 （3）吸收池：吸收池又称比色杯、比色皿、比色池。一般由玻璃、石英或熔凝石英制 成，用来盛被测的溶液。在低于 350 nm 的紫外光区工作时,必须采用石英池或熔凝石英池。 吸收池（比色皿）必须与光束方向垂直。此外，每套比色皿的质料，厚度应完全相同，以免 产生误差。比色皿上的指纹、油污或壁上的沉积物都会显著地影响其透光性,因此在使用前 务必彻底清洗。 （4）光电转换装置：常用光电池、光电管和光电倍增管三种。 光电池：装在一个特制的匣子里面由 3 层物质组成的圆形或长方形薄片。第一层是一种 导电性良好的金属，这是光电池的负极，中间极薄的一层是半导体硒，第 3 层是铁，这是光 电池的正极。当光电池受光照射以后,半导体硒的表面逸出电子，这些电子只向负极方向移 动，而不向正极移动，因此在上下两金属片间产生一个电位差，线路连通时即产生电流 光电管：光电管是由封装在真空透明封套里的一个半圆柱型阴极和一个丝阳极组成.阴 极的凹画上有一层光电发射材料，此种物质经光照射可发射电子。当在两极间加有电位时， 发射出来的电子就流向丝阳极而产生光电流.对于相同的辐射强度，它所产生的电流约为光 电池所产生电流的 1/4。由于光电管具有很高的电阻，所以产生的电流容易放大。 光电倍增管：它比普通的光电管优越，它可将第一次发射出的电子数目放大到数百万倍。 当电子打在兼性阳极上时，能引起更多的电子自表面射出。这些射出的电子又被第二个兼性 阳极所吸引，同样再产生更多的电子。此过程重复 9 次后，每个光子可形成 106～107 个电 子，这些电子最后被收集在阳极上。所得到的倍增电流可进一步加以放大和测量。 （5）测量装置：—般常用的紫外光和可见光分光光度计有 3 种测量装置，即电流表
记录器和数字示值读数单元。现代的仪器常附有自动记录器，可自动描出吸收曲线。 2.常用分光光度计的使用 (1)721型分光光度计：721型分光光度计的基本构造见下图1一1： 光电管暗盒部件 光源灯 微安表 单色光器 比色口 稳定电压装置 图1一1721分光光度计的基本构造 仪器的外观如下见图1一2： 图1-2721型分光光度计 1.电源开关2.比色皿座架拉杆3.光亮细调旋钮4.“0”电位器旋钮5.波长调节器旋 钮6.光亮粗调旋钮7.波长刻度窗8.比色皿暗箱盖9.读数表 1)预热仪器：为使测定稳定，将电源开关打开(1)，使仪器预热20~30min,为了防 止光电管疲劳，不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开(8)，使光 路切断。 2)选定波长：根据实验要求，转动波长调节器旋钮(5)，使指针指示所需要的单色光 波长(7)。 3)调节“0”点：轻轻旋动调“0”电位器旋钮(4)，使读数表头指针恰好位于透光度 为“0”处（此时，比色皿暗箱盖是打开的，光路被切断，光电管不受光照）(9)。 4)调节T=100%:将盛蒸馏水（或空白溶液或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的 第一格内，有色溶液放在其它格内，把比色皿暗箱盖子轻轻盖上(8)，转动光量调节器旋钮
记录器和数字示值读数单元。现代的仪器常附有自动记录器，可自动描出吸收曲线。 2．常用分光光度计的使用 （1）721 型分光光度计：721 型分光光度计的基本构造见下图 1－1： 图 1－1 721 分光光度计的基本构造 仪器的外观如下见图 1－2： 图 1－2 721 型分光光度计 1．电源开关 2．比色皿座架拉杆 3．光亮细调旋钮 4．“0”电位器旋钮 5．波长调节器旋 钮 6．光亮粗调旋钮 7．波长刻度窗 8．比色皿暗箱盖 9．读数表 1）预热仪器：为使测定稳定，将电源开关打开（1），使仪器预热 20～30min，为了防 止光电管疲劳，不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开（8），使光 路切断。 2）选定波长：根据实验要求，转动波长调节器旋钮（5），使指针指示所需要的单色光 波长（7）。 3）调节“0”点：轻轻旋动调“0”电位器旋钮（4），使读数表头指针恰好位于透光度 为“0”处（此时，比色皿暗箱盖是打开的，光路被切断，光电管不受光照）（9）。 4）调节 T=100％：将盛蒸馏水（或空白溶液或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的 第一格内，有色溶液放在其它格内，把比色皿暗箱盖子轻轻盖上（8），转动光量调节器旋钮
(“6”为粗调旋钮，“3”为细调旋钮)使透光度T=100%,即表头指针恰好指在T=100%处 (9). 5》测定：轻轻拉动比色皿座架拉杆(2)，使有色溶液进入光路，此时表头指针所示为 该有色溶液的吸光度A(9)。读数后，打开比色皿暗箱盖 6)关机：实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架及暗箱用软纸擦 净。 注意事项： 1)为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，以延长光 电管使用寿命。 2)比色皿的使用方法： A,拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污， B.清洗比色皿时，一般先用水冲洗，再用蒸馏水洗净。如比色皿被有机物沾污，可用 盐酸乙醇混合洗涤液(1：2)浸泡片刻，再用水冲洗。不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液 洗比色皿，以免损坏。也不能用毛刷清洗比色皿，以免损伤它的透光面。每次做完实验时， 应立即洗净比色皿。 C.比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干，以保护透光面。 D.测定有色溶液吸光度时，一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次，以免改变有色溶液 的浓度。另外，在测定一系列溶液的吸光度时，通常都按由稀到浓的顺序测定，以减小测量 误差。 E.在实际分析工作中，通常根据溶液浓度的不同，选用液栢厚度不同的比色皿，使溶 液的吸光度控制在0.2一0.7。 (2)722型光栅分光光度计：722型光栅分光光度计的基本构造见下图1一3： 比色槽 单 图1一3722光栅分光光度计的基本构造
（“6”为粗调旋钮，“3”为细调旋钮）使透光度 T=100％，即表头指针恰好指在 T=100％处 （9）。 5）测定：轻轻拉动比色皿座架拉杆（2），使有色溶液进入光路，此时表头指针所示为 该有色溶液的吸光度 A（9）。读数后，打开比色皿暗箱盖。 6）关机：实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架及暗箱用软纸擦 净。 注意事项： 1）为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，以延长光 电管使用寿命。 2）比色皿的使用方法： A．拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。 B．清洗比色皿时，一般先用水冲洗，再用蒸馏水洗净。如比色皿被有机物沾污，可用 盐酸-乙醇混合洗涤液（1∶2）浸泡片刻，再用水冲洗。不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液 洗比色皿，以免损坏。也不能用毛刷清洗比色皿，以免损伤它的透光面。每次做完实验时， 应立即洗净比色皿。 C．比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干，以保护透光面。 D．测定有色溶液吸光度时，一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次，以免改变有色溶液 的浓度。另外，在测定一系列溶液的吸光度时，通常都按由稀到浓的顺序测定，以减小测量 误差。 E．在实际分析工作中，通常根据溶液浓度的不同，选用液槽厚度不同的比色皿，使溶 液的吸光度控制在 0.2～0.7。 （2）722 型光栅分光光度计：722 型光栅分光光度计的基本构造见下图 1－3： 图 1－3 722 光栅分光光度计的基本构造
仪器外形如下图1一4： 6 4 2 图1一4722光栅分光光度计外形图 1.电源开关2.波长旋钮3.波长刻度窗4，比色皿暗箱盖5.试样架拉手 6.100%T旋钮7.0%T旋钮8.灵敏度调节旋钮9.数字显示窗10.吸光度调零旋 钮11.TAC选择开关12.浓度旋钮 1)在接通电源前，应对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固，接地线通地要良 好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源。 2)将灵敏度调节旋钮调至“1”档(8)。调波长调节器(2)至所需波长。 3)开启电源开关(1)，指示灯亮，将T/C选择开关(1)置于“T",调节透光度“100%” 旋钮(6)，使数字显示“100.0”左右，预热20分钟。 4)打开比色皿暗箱盖(4)（光门自动关闭），调节0旋钮，使数字显示为0.00”(9)，盖 上比色皿暗箱盖(4)，将参比溶液置于光路，使光电管受光，调节透光度“100%“旋钮(6)， 使数字显示为100.0”。 5)如果显示不到“100”，则可适当增加灵敏度调节旋钮档数(8)，但应尽可能使用低档 数，这样仪器将有更高的稳定性。当改变灵敏度后必须按④重新校正0”和“100”。 6)按④连续几次调整00.0”和100"后，将TAWC选择开关(11)置于A,调节吸光度 调零旋钮(10)，使数字显示0.00”。然后将待测溶液推入光路，显示值即为待测样品的吸 光度值A。 7)浓度C的测量。选择开关由“A“旋至℃”，将标准溶液推入光路，调节浓度旋钮。 使得数字显示值为已知标准溶液浓度数值。将待测样品溶液推入光路，即可读出待测样品的 浓度值。 8)如果大幅度改变测试波长时，在调整00.0和100后稍等片刻（因光能量变化急剧
仪器外形如下图 1－4： 图 1－4 722 光栅分光光度计外形图 1．电源开关 2．波长旋钮 3．波长刻度窗 4．比色皿暗箱盖 5. 试样架拉手 6．100%T 旋钮 7．0%T 旋钮 8．灵敏度调节旋钮 9．数字显示窗 10．吸光度调零旋 钮 11．T/A/C 选择开关 12．浓度旋钮 1）在接通电源前，应对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固，接地线通地要良 好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源。 2）将灵敏度调节旋钮调至“1”档（8）。调波长调节器（2）至所需波长。 3）开启电源开关（1），指示灯亮，将 T/A/C 选择开关（11）置于“T”，调节透光度“100％” 旋钮（6），使数字显示“100.0”左右，预热 20 分钟。 4）打开比色皿暗箱盖（4）（光门自动关闭），调节“0”旋钮，使数字显示为“0.00”（9），盖 上比色皿暗箱盖（4），将参比溶液置于光路，使光电管受光，调节透光度“100％”旋钮（6）， 使数字显示为“100.0”。 5）如果显示不到“100”，则可适当增加灵敏度调节旋钮档数（8），但应尽可能使用低档 数，这样仪器将有更高的稳定性。当改变灵敏度后必须按④重新校正“0”和“100”。 6）按④连续几次调整“00.0”和“100”后，将 T/A/C 选择开关（11）置于 A，调节吸光度 调零旋钮（10），使数字显示“0.00”。然后将待测溶液推入光路，显示值即为待测样品的吸 光度值 A。 7）浓度 C 的测量。选择开关由“A”旋至“C”，将标准溶液推入光路，调节浓度旋钮。 使得数字显示值为已知标准溶液浓度数值。将待测样品溶液推入光路，即可读出待测样品的 浓度值。 8）如果大幅度改变测试波长时，在调整“00.0”和“100”后稍等片刻（因光能量变化急剧
光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间)，当稳定后，重新调整00.0”和“100”即可 工作。 注意事项 1)使用前，使用者应该首先了解本仪器的结构和原理，以及各个旋钮之功能， 2)仪器接地要良好，否则显示数字不稳定。 3)仪器左侧下角有一只干燥剂筒，应保持其干燥，发现干燥剂变色应立即更新或烘干 后再用。 4)当仪器停止工作时，切断电源，电源开关同时切断，并罩好仪器。 (3)7200型分光光度计：UNIC0m7200型可见光分光光度计的外形见图1-5： 图1-5UNIC07200型可见光分光光度计 1.波长选择旋钮2.波长刻度窗3.比色皿暗箱盖 4.试样架拉手5.数字显示窗6.<MODE>键 1)仪器基本操作 A.连接仪器电源线，确保仪器供电电源有良好的接地性能。 B.接通电源，使仪器预热20分钟（不包括仪器自检时间）（电源开关位于仪器背面）。 C.用<MODE>键设置测试方式(6)：透射比(T),吸光度(A),己知标准样品浓度 值方式(C)和己知标准样品斜率(F)方式。 D.用波长选择旋钮(1)设置您所需的分析波长(2)。 E.将您的参比样品溶液和被测样品溶液分别倒入比色皿中，打开样品室盖(3)，将盛 有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中，盖上样品室盖。一般情况下，参比样品放在第一个槽 位中。比色皿透光部分表面不能有指印、溶液痕迹，被测溶液中不应有气泡，悬浮物，否则 将影响样品测试的精度。 F.将%T校具（黑体）置入光路中，在T方式下按%T键，此时显示器显示000.0 (5)。 G.将参比样品推（拉）入光路中，按0AW100%T”键调0AW100%T,此时显示器显示的
光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间），当稳定后，重新调整“00.0”和“100”即可 工作。 注意事项 1）使用前，使用者应该首先了解本仪器的结构和原理，以及各个旋钮之功能。 2）仪器接地要良好，否则显示数字不稳定。 3）仪器左侧下角有一只干燥剂筒，应保持其干燥，发现干燥剂变色应立即更新或烘干 后再用。 4）当仪器停止工作时，切断电源，电源开关同时切断，并罩好仪器。 （3）7200 型分光光度计：UNICO®7200 型可见光分光光度计的外形见图 1－5： 图 1－5 UNICO®7200 型可见光分光光度计 1．波长选择旋钮 2．波长刻度窗 3．比色皿暗箱盖 4．试样架拉手 5．数字显示窗 6． <MODE>键 1）仪器基本操作 A．连接仪器电源线，确保仪器供电电源有良好的接地性能。 B．接通电源，使仪器预热 20 分钟（不包括仪器自检时间）（电源开关位于仪器背面）。 C．用<MODE>键设置测试方式（6）：透射比（T），吸光度（A），已知标准样品浓度 值方式（C）和已知标准样品斜率（F）方式。 D．用波长选择旋钮（1）设置您所需的分析波长（2）。 E．将您的参比样品溶液和被测样品溶液分别倒入比色皿中，打开样品室盖（3），将盛 有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中，盖上样品室盖。一般情况下，参比样品放在第一个槽 位中。比色皿透光部分表面不能有指印、溶液痕迹，被测溶液中不应有气泡，悬浮物，否则 将影响样品测试的精度。 F．将%T 校具（黑体）置入光路中，在 T 方式下按“％T”键，此时显示器显示“000.0” （5）。 G．将参比样品推（拉）入光路中，按“0A/100%T”键调 0A/100%T，此时显示器显示的