第十一章 基因诊断与基因治疗 刘智敏 基础医学院生物化学与分子生物学教研室
第十一章 基因诊断与基因治疗 基础医学院生物化学与分子生物学教研室 刘智敏
第一节基因诊断 一、基因诊断的概念 基因诊断(gene diagnosis.)是以DNA和RNA为诊断材料， 通过检查基因的存在、缺陷或表达异常，对人体状态和 疾病作出诊断的方法和过程。其基本原理是检测DNA或 RNA的结构变化与否，量的多少及表达功能是否正常， 以确定被检查者是否存在基因水平的异常变化，以此作 为疾病确诊的依据
第一节 基因诊断 基因诊断(gene diagnosis)是以DNA和RNA为诊断材料， 通过检查基因的存在、缺陷或表达异常，对人体状态和 疾病作出诊断的方法和过程。其基本原理是检测DNA或 RNA的结构变化与否，量的多少及表达功能是否正常， 以确定被检查者是否存在基因水平的异常变化，以此作 为疾病确诊的依据。 一、基因诊断的概念
临床意义：在于不仅能对疾病作出早期、确切诊断，而 且也能确定个体对疾病的易感性及疾病的分期分型、疗 效监测、预后判断等。近年来，随着基因诊断技术的发 展和应用，基因诊断的原理和方法不仅适用于遗传性疾 病，而且已广泛应用于感染性疾病和肿瘤的诊断以及法 医学等领域
临床意义: 在于不仅能对疾病作出早期、确切诊断，而 且也能确定个体对疾病的易感性及疾病的分期分型、疗 效监测、预后判断等。近年来，随着基因诊断技术的发 展和应用，基因诊断的原理和方法不仅适用于遗传性疾 病，而且已广泛应用于感染性疾病和肿瘤的诊断以及法 医学等领域
二、基因诊断的技术方法 (一)基因诊断中常用的分子生物学技术 1、核酸分子杂交关于核酸分子杂交的基本原理和基 本类型前面已讲。在这些方法中： (1)Southern!印迹法 是最经典的基因分析方法，不 但能检出特异的DNA片段，而且能进行定位和测定分子量， 可用于基因的酶切图谱分析、基因突变分析等。 (2)Northern印迹法 可用于组织细胞中总RNA或 mRNA的定性和定量分析
1、核酸分子杂交 关于核酸分子杂交的基本原理和基 本类型前面已讲。在这些方法中： （1）Southern印迹法 是最经典的基因分析方法，不 但能检出特异的DNA片段，而且能进行定位和测定分子量， 可用于基因的酶切图谱分析、基因突变分析等。 （2）Northern印迹法 可用于组织细胞中总RNA或 mRNA的定性和定量分析。 二、基因诊断的技术方法 （一）基因诊断中常用的分子生物学技术
(3)斑点杂交 可用于基因组中特定基因及其表达的定性 及定量分析。优点：方法简单、快速、灵敏、样品用量少； 缺点：是不能鉴定所测基因的分子量，特异性不高，有一 定比例的假阳性。 (4)原位杂交可查明染色体中特定基因的位置，用于 染色体疾病的诊断。原位杂交的结果是显示有关核酸序列 的空间位置状况，因此可检出含核酸序列的具体细胞，细 胞具体定位、数目及类型，可检出基因和基因产物的亚细 胞定位
（3）斑点杂交 可用于基因组中特定基因及其表达的定性 及定量分析。优点：方法简单、快速、灵敏、样品用量少； 缺点：是不能鉴定所测基因的分子量，特异性不高，有一 定比例的假阳性。 （4）原位杂交 可查明染色体中特定基因的位置，用于 染色体疾病的诊断。原位杂交的结果是显示有关核酸序列 的空间位置状况，因此可检出含核酸序列的具体细胞，细 胞具体定位、数目及类型，可检出基因和基因产物的亚细 胞定位