吸附法的优点 操作简便,条件温和,吸附刘可再生反复 使用。 缺点: 酶和载体的吸附力比较弱,容易在不适宜 的pH、高盐浓度、高底物浓度或高温条件 下解吸脱落
吸附法的优点: 操作简便，条件温和，吸附刘可再生反复 使用。 缺点: 酶和载体的吸附力比较弱，容易在不适宜 的pH、高盐浓度、高底物浓度或高温条件 下解吸脱落
提高吸附容量和酶与载体间的吸附力有以下 几种途径 第一控制好吸附咐与操作条件、这包括选择大 吸附容量的载体;合理地控制酶量与载体量 适当地升高酶蛋白浓度;将载体进行一定的分 散处理;处理好吸附容量与流体力学间的关系 同时在整个吸附与使用过程中使用适宜的pH 温度和底物浓度以及较低的离子强度
提高吸附容量和酶与载体间的吸附力有以下 几种途径： 第一,控制好吸附与操作条件，这包括选择大 吸附容量的载体；合理地控制酶量与载体量， 适当地升高酶蛋白浓度；将载体进行一定的分 散处理；处理好吸附容量与流体力学间的关系； 同时在整个吸附与使用过程中使用适宜的pH、 温度和底物浓度以及较低的离子强度
第二是开发新的载体。例,使用N 烃基琼脂糖衍生物,它们能强力地吸附等 电点处于酸性区的酶/如黄嘌岭氧化酶 脲酶等,结合牢固程度甚至可经受 1 MNaCIN洗脱,因为这种吸附是借助静电 力和疏水键等多种力协同发挥作用。又如 近年来广泛使用的亲和吸附剂等
第二,是开发新的载体。例如，使用N— 烃基琼脂糖衍生物，它们能强力地吸附等 电点处于酸性区的酶，如黄嘌呤氧化酶、 脲酶等，结合牢固程度甚至可经受 1MNaClN洗脱, 因为这种吸附是借助静电 力和疏水键等多种力协同发挥作用。又如 近年来广泛使用的亲和吸附剂等
第是根据载体性质对酶进行适当的化学修 饰』例如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶等可先和丙 烯酸与顺丁烯二酸酐的水溶性共聚物进行共价 偶联;淀粉葡萄糖苷酶可先将它和乙烯与顺丁 烯二酸酐的水溶性共聚物进行共价偶联。这样 修饰后得到的酶的多聚阴离子衍生物,再用 DEAE_纤维素或DEAE—葡聚糖吸附,结合力 可大大增强,不仅吸附容量显著升高,而且相 当稳定,使用寿命也延长。如其中的淀粉葡萄 糖苷酶连续使用3个星期活性都没有明显改变
第三, 是根据载体性质对酶进行适当的化学修 饰。例如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶等可先和丙 烯酸与顺丁烯二酸酐的水溶性共聚物进行共价 偶联；淀粉葡萄糖苷酶可先将它和乙烯与顺丁 烯二酸酐的水溶性共聚物进行共价偶联。这样 修饰后得到的酶的多聚阴离子衍生物，再用 DEAE—纤维素或DEAE—葡聚糖吸附，结合力 可大大增强，不仅吸附容量显著升高，而且相 当稳定，使用寿命也延长。如其中的淀粉葡萄 糖苷酶连续使用3个星期活性都没有明显改变
共价偶联法 这是借助共价键将酶的活性非必需侧链 基团和载体的功能基闭进行偶联以制备固 定化酶的方法 特点:由于这样得到的固定化酶结合牢固、 稳定性好、利于连续使用,因此它是目前 应用和报导的最多的一类方法。不过,共 价偶联反应一般比较激烈应加以注意
2. 共价偶联法 这是借助共价键将酶的活性非必需侧链 基团和载体的功能基闭进行偶联以制备固 定化酶的方法。 特点: 由于这样得到的固定化酶结合牢固、 稳定性好、利于连续使用，因此它是目前 应用和报导的最多的一类方法。不过，共 价偶联反应一般比较激烈应加以注意