二酶的固定化方法 酶的固定化方法很多,但对任何酶都 适用的方法是没有的。酶的固定化方法 通常按照用于结合的化学反应的类型进 行分类,大体可概括为四种类型 1吸附法;2共价偶联法;3交联法;4 包埋法
二.酶的固定化方法 酶的固定化方法很多，但对任何酶都 适用的方法是没有的。酶的固定化方法 通常按照用于结合的化学反应的类型进 行分类，大体可概括为四种类型： 1.吸附法； 2.共价偶联法；3.交联法; 4. 包埋法
1.吸附法 包括物理吸附和离子交换吸附法
1. 吸附法 包括物理吸附和离子交换吸附法
1)物理吸附法 这是通过氢键、疏水键和电子亲和力等物理作 用力将酶固定于不溶性载体的方法 常用的载体有高岭土、士、硅胶、磷酸钙胶、氧 化铝及微孔玻璃等无机吸附剂,和纤维素、胶原以 及火棉胶等有机吸附剂
(1)物理吸附法 这是通过氢键、疏水键和π-电子亲和力等物理作 用力将酶固定于不溶性载体的方法. 常用的载体有高岭土、皂土、硅胶、磷酸钙胶、氧 化铝及微孔玻璃等无机吸附剂，和纤维素、胶原以 及火棉胶等有机吸附剂
特点无机吸附剂的吸附量般很低常小于毫 克蛋白/克吸附剂少数情况可达17毫克蛋自/克 吸附剂有机吸附剂的吸附容量通常高一些例如, 火棉胶对木瓜蛋白酶、碱性磷酸酯酶以及葡萄 糖—6-磷酸脱氢酶的吸附容量可达70毫克蛋白 厘米膜胶原膜对b-β-果糖呋喃糖苷酶、溶 菌酶、脲酶以及青霉素酰胺酶等的吸附容量可达 50毫克蛋白/克胶原膜无机吸附剂的另一缺点是 常易使某些酶发生吸附变性而有机吸附剂一般 不会产生这种情况,故更受人们注意
特点:无机吸附剂的吸附量一般很低,常小于1毫 克蛋白/克吸附剂,少数情况可达17毫克蛋白/克 吸附剂.有机吸附剂的吸附容量通常高一些,例如, 火棉胶对木瓜蛋白酶、碱性磷酸酯酶以及葡萄 糖—6—磷酸脱氢酶的吸附容量可达70毫克蛋白 /厘米2膜;胶原膜对b—β—果糖呋喃糖苷酶、溶 菌酶、脲酶以及青霉素酰胺酶等的吸附容量可达 50毫克蛋白/克胶原膜.无机吸附剂的另一缺点是 常易使某些酶发生吸附变性,而有机吸附剂一般 不会产生这种情况，故更受人们注意
2)离子交换吸附法 这是指在适宜的pH和离子强度条件下,利用酶 的侧链解离基团和离子交换剂的相互作用而达到 酶的固定化的方法 常用的交换剂有CM纤维素、DEAE/纤维素 DEAE一葡聚糖凝胶等;其它还有冬种合成的离 仔交换树脂等。离子交换剂的吸附容量一般大于 物理吸附剂,通常为50-150毫克蛋白/克载体 第一批商品固定化酶就是将氨基酸酰化酶吸附于 DEAE_纤维素和吸附于DEAE—葡聚糖作成的。 此外,DEAE—纤维素吸附的α—淀粉酶、蔗糖酶 也已作成商品固定化酶
(2)离子交换吸附法 这是指在适宜的pH和离子强度条件下，利用酶 的侧链解离基团和离子交换剂的相互作用而达到 酶的固定化的方法。 常用的交换剂有: CM—纤维素、DEAE／纤维素、 DEAE—葡聚糖凝胶等；其它还有各种合成的离 子交换树脂等。离子交换剂的吸附容量一般大于 物理吸附剂，通常为50—150毫克蛋白／克载体。 第一批商品固定化酶就是将氨基酸酰化酶吸附于 DEAE—纤维素和吸附于DEAE—葡聚糖作成的。 此外，DEAE—纤维素吸附的α—淀粉酶、蔗糖酶 也已作成商品固定化酶