第六章酶分析 在生产实践和基础理论研究中往往离不开生化分 析,而酶分析是其中一个重要方面。酶分析包括两 种类型:一种是以酶为分析对象的分析,这就是通 常所说的酶活力测定”;一种是以酶为分析工具 或分析试剂的分析,一般可称为“酶法分析”。前 者的目的在于检知样品中某种酶的含量或活性,后 者则主要用于测定与生物学有关的样品中酶以外其 它物质的含量。二者检测的对象虽有所不同,但原 理和方法都是以酶能专一而高效地催化化学反应为 基础通过酶反应速度的测定而检测相应物质的含
第六章 酶分析 在生产实践和基础理论研究中往往离不开生化分 析,而酶分析是其中一个重要方面。酶分析包括两 种类型:一种是以酶为分析对象的分析,这就是通 常所说的‘酶活力测定”;一种是以酶为分析工具 或分析试剂的分析,一般可称为“酶法分析”。前 者的目的在于检知样品中某种酶的含量或活性,后 者则主要用于测定与生物学有关的样品中酶以外其 它物质的含量。二者检测的对象虽有所不同,但原 理和方法都是以酶能专一而高效地催化化学反应为 基础,通过酶反应速度的测定而检测相应物质的含 量
61酶活力测定 酶的含量和活性水平可通过特定系统的酶(促)反 应速度而加以测定 在进行这种测定时可采用两种方式 是测定完成一定量反应所需耍的时间; 二是测定单位时间内的酶促反应量。 前者常称为终点法,后者称为动力学法
6.1酶活力测定 酶的含量和活性水平可通过特定系统的酶(促)反 应速度而加以测定。 在进行这种测定时可采用两种方式: 一是测定完成一定量反应所需耍的时间; 二是测定单位时间内的酶促反应量。 前者常称为终点法,后者称为动力学法
终点法 这是在特定条件下,将样品中耍检测的酶作用 一定量的底物,然后根据反应进行到某、程度(即 达到某一指标所需要的时间长短来估计酶活力的 种方法。例如,工业生产α一淀粉酶时就是采 用这种方法
一 终点法 这是在特定条件下,将样品中耍检测的酶作用 一定量的底物,然后根据反应进行到某一程度(即 达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶活力的 一种方法。例如,工业生产α—淀粉酶时就是采 用这种方法
二动力学法 1原理 这种测定法的原理是,在一定的条件下酶反 应速度和酶浓度成正比,因此测定酶反应速度就 可求得酶浓度
二 动力学法 1.原理 这种测定法的原理是,在一定的条件下,酶反 应速度和酶浓度成正比,因此测定酶反应速度就 可求得酶浓度
2.反应条件 选择反应条件的基本要求是,所有待测定的酶 分子都应该能够正常地发挥它的作用。这就是说, 反应系统中除了待测定的酶浓度时影响反应速度 的唯一因素外,其它因素都应处于最适于酶发挥 催化作用的水平 确定反应条件时应考虑以下因素 (1)底物;(2)Ph;(3)温度; (4)辅助因子;(5)样品
2. 反应条件 选择反应条件的基本要求是,所有待测定的酶 分子都应该能够正常地发挥它的作用。这就是说, 反应系统中除了待测定的酶浓度时影响反应速度 的唯一因素外,其它因素都应处于最适于酶发挥 催化作用的水平。 确定反应条件时应考虑以下因素: (1)底物;(2)Ph;(3)温度; (4)辅助因子;(5)样品