外体积V.和内体积V外水体积(Vo)内水体积(Vi)
外体积V0和内体积Vi
I当分子的K0时，V。=V。即该分子被完全排阻于凝胶颗粒之外，全部分布于流动相里，固定相里分布为0;I当分子的K=1时，V。=V。+V，即该分子完全不被排阻，该组分可以自由地扩散进入到凝胶颗粒内部的所有微孔，洗脱是最后流出。当0<K<1时，Ve=V。+KV.即表明分子受到部分排阻
l当分子的Ka ＝0时，Ve ＝Vo即该分子被完全排阻于 凝胶颗粒之外，全部分布于流动相里，固定相里分 布为0; l当分子的Ka ＝1时，Ve ＝Vo + Vi 即该分子完全不 被排阻，该组分可以自由地扩散进入到凝胶颗粒内 部的所有微孔，洗脱是最后流出。 l当0 < Ka <1时， Ve = Vo + KaVi 即表明分子受 到部分排阻
层析分离4）亲和层析利用生物分子对之间所具有的专一而又可逆的亲和力使生物分子分离纯化的技术。。配基：在亲和层析中，作为固定相的生物分子对的一方称为配基。母体（载体或担体）：固定配基的固体介质，一般采用琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶和纤维素等作为母体。·连接臂：在小分子配基和母体之间充当连接桥的化合物，用以解决小分子化合物作为配基时所存在空间位阻现象。亲和体系：酶和底物、竞争性抑制剂、辅酶、抗体
4）亲和层析 利用生物分子对之间所具有的专一而又可逆的亲和力使生物分子分离纯 化的技术。 配基：在亲和层析中，作为固定相的生物分子对的一方称为配基。 母体（载体或担体）：固定配基的固体介质，一般采用琼脂糖凝胶、葡 聚糖凝胶和纤维素等作为母体。 连接臂：在小分子配基和母体之间充当连接桥的化合物，用以解决小分 子化合物作为配基时 所存在空间位阻现象。 亲和体系：酶和底物、竞争性抑制剂、辅酶、抗体 层析分离
层析分离配基蛋白质1固体载c.好C体1.配基固相3.解吸附2.亲和吸附化
+ C C C 配基 蛋白质 1.配基固相 化 2.亲和吸附 固 体 载 体 3.解吸附 层析分离
层析分离作用機理：(2)(1)(3)DOB连接臂WashingElutionSamplea.親和基團配叠连接臂的作用固相擅体
层析分离