带电状态判定 pl-pH<0 带负电 pl-pH>0 带正电 pl-pH=0 .不带电 ■等电点计算 ①侧链为非极性基团或虽为极性基团但不解离的氨 基酸：pl=2(pK+pK2) ②酸性氨基酸(GIu、Asp及Cys:pl=(pK+pKR) ③碱性氨基酸（赖、精、组）：pl=y2(pK2+pKR)
刘新文，蛋白质化学 等电点计算 ①侧链为非极性基团或虽为极性基团但不解离的氨 基酸：pI=½(pK1+pK2 ) ②酸性氨基酸(Glu、Asp)及Cys：pI=½(pK1+pKR ) ③碱性氨基酸(赖、精、组)：pI=½(pK2+pKR ) 带电状态判定 pI-pH<0 .带负电 pI-pH>0 .带正电 pI-pH＝0 .不带电
色氨酸 3、紫外吸收： ■Trp、Tyr和 度 Phe在280nm波 长附近具有最大 吸收峰，其中 Trp的最大吸收 路氨酸 最接近280nm 苯丙氨酸 0240250260270280290300310 波长(nm)
刘新文，蛋白质化学 3、紫外吸收： Trp、Tyr和 Phe在280nm波 长附近具有最大 吸收峰，其中 Trp的最大吸收 最接近280nm
4、显色反应： ■茚三酮反应 0 R OH HN一C-C0OH + →RCHO+NH+CO2+ H OH OH 氨基酸 苗三酮水合物 还原茚三酮 OH 还原茚三酮 茚三酮 蓝紫色化合物
刘新文，蛋白质化学 4、显色反应： 茚三酮反应
4、显色反应： ■茚三酮反应 氨基酸与茚三酮水合物共热，可生成 蓝紫色化合物，其最大吸收峰在570nm 处。由于此吸收峰值与氨基酸的含量存在 正比关系，因此可作为氨基酸定量分析方 法。例外：Pro黄色；Asn棕色 ■其他反应：荧光胺反应、侧链特异基团反应
刘新文，蛋白质化学 4、显色反应： 茚三酮反应 其他反应：荧光胺反应、侧链特异基团反应 例外：Pro黄色；Asn棕色
5、成肽反应： NH2-CH-C NH-CH-C H OH d H:H OH 甘氨酸 甘氨酸 -HOH Mweng7ne OH 甘氨酰甘氨酸 肽键 中/回
刘新文，蛋白质化学 5、成肽反应：