二、糖（醇）类代谢试验 2.3乙酰甲基甲醇试验(V-P试验) 2.3.1原理 某些细菌能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸 经脱羧、缩合生成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环 境下，被空气中的氧氧化为双乙酰，在o-萘酚和 肌酸的催化作用下，双乙酰与蛋白胨中的胍基生 成红色化合物，称V-P（+)反应。 常用于肠杆菌科细菌的检验
某些细菌能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸 经脱羧、缩合生成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环 境下，被空气中的氧氧化为双乙酰，在a-萘酚和 肌酸的催化作用下，双乙酰与蛋白胨中的胍基生 成红色化合物，称V-P（+）反应。 常用于肠杆菌科细菌的检验。 二、糖（醇）类代谢试验 2.3 乙酰甲基甲醇试验（V-P试验） 2.3.1 原理
OH 010 2CH3-C—C00H >CH3CH—CCH3 →CH3C一C-CH 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 二乙酰 NH, N-C-CH3 O-C-CH, +C=NH→HN=C +2H20 0=C-CH3 NH2 N=C一CH 二乙酰 胍 红色化合物
二、糖（醇）类代谢试验 2.3乙酰甲基甲醇实验（V-P试验) 2.3.2试验方法 (1)奥梅拉(O'Meara)法 (2)贝立脱(Barritt)法
（1）奥梅拉（O’Meara）法 （2）贝立脱（Barritt）法 二、糖（醇）类代谢试验 2.3 乙酰甲基甲醇实验（V-P试验） 2.3.2 试验方法
二、糖（醇）类代谢试验 2.3乙酰甲基甲醇实验(V-P试验) 2.3.2.1奥梅拉法 将试验菌接种于磷酸盐葡萄糖蛋白胨水培养基，于 36±1℃培养48h,每1mL培养液加奥梅拉试剂0.1mL, 摇动试管1~2min,静置于37℃恒温箱4h,或在 48~50℃水浴放置2h后判定结果
二、糖（醇）类代谢试验 2.3 乙酰甲基甲醇实验（V-P试验） 2.3.2.1 奥梅拉法 将试验菌接种于磷酸盐葡萄糖蛋白胨水培养基，于 36±1℃培养48h，每1mL培养液加奥梅拉试剂0.1 mL， 摇动试管1~2min，静置于37℃恒温箱4h ，或在 48~50℃水浴放置2h后判定结果
二、糖（醇）类代谢试验 2.3乙酰甲基甲醇实验（V-P试验) 2.3.2.2贝立脱法 将试验菌接种于磷酸盐葡萄糖蛋白胨水培养基， 于36±1℃培养2天，每2mL培养液先加入6%0-萘酚 纯酒精溶液1mL,再加40%氢氧化钾溶液0.4mL,摇 动2~5min,阳性菌常立即呈现红色，若无红色出现， 静置于室温或36±1℃培养4h,如显现红色为阳性， 呈黄色或有类似铜色者，可判定为阴性
二、糖（醇）类代谢试验 2.3 乙酰甲基甲醇实验（V-P试验） 2.3.2.2 贝立脱法 将试验菌接种于磷酸盐葡萄糖蛋白胨水培养基， 于36±1℃培养2天，每2mL培养液先加入6% a-萘酚 纯酒精溶液1mL，再加40%氢氧化钾溶液0.4mL，摇 动2~5min，阳性菌常立即呈现红色，若无红色出现， 静置于室温或36±1℃培养 4h ，如显现红色为阳性， 呈黄色或有类似铜色者，可判定为阴性