2、聚合酶链式反应(PCR) PCR技术在基因诊断中已得到广泛应用。在应用中，PCR 常与其它技术如分子杂交、限制酶酶谱分析、单链构象多 态性检测、限制性片段长度多态性分析、DNA序列测定等 联合应用。 3、单链构象多态性检测 单链构象多态性(single strand conformation pol ymorph i sm,SSCP)检测是一种基于单链DNA构象差别来 检测点突变的方法
PCR技术在基因诊断中已得到广泛应用。在应用中，PCR 常与其它技术如分子杂交、限制酶酶谱分析、单链构象多 态性检测、限制性片段长度多态性分析、DNA序列测定等 联合应用。 2、聚合酶链式反应(PCR) 3、单链构象多态性检测 单链构象多态性(single strand conformation polymorphism，SSCP)检测是一种基于单链DNA构象差别来 检测点突变的方法
原理：DNA经变性形成单链后，在中性条件下单链DNA 会因其分子内碱基之间的相互作用，形成一定的立体 构象。相同长度的单链DNA,如果碱基序列不同，形 成的构象就不同，这样就形成了单链构象多态性。长 度相同而构象不同的单链DNA在非变性聚丙烯酰胺凝 胶电泳(PAGE)中表现出不同的迁移率。SSCP常与PCR 联合应用，称为PCR-SSCP技术
原理：DNA经变性形成单链后，在中性条件下单链DNA 会因其分子内碱基之间的相互作用，形成一定的立体 构象。相同长度的单链DNA，如果碱基序列不同，形 成的构象就不同，这样就形成了单链构象多态性。长 度相同而构象不同的单链DNA在非变性聚丙烯酰胺凝 胶电泳(PAGE)中表现出不同的迁移率。SSCP常与PCR 联合应用，称为PCR-SSCP技术
4、限制酶酶谱分析 基因突变可能导致基因上某一限制酶识别位点的丢 失或其相对位置发生改变，以此酶消化待测DNA和野 生型对照DA,通过比较二者的酶切片段的长度、数 量上的差异就可判断待测DNA的突变情况
基因突变可能导致基因上某一限制酶识别位点的丢 失或其相对位置发生改变，以此酶消化待测DNA和野 生型对照DNA，通过比较二者的酶切片段的长度、数 量上的差异就可判断待测DNA的突变情况。 4、限制酶酶谱分析
5、DNA序列测定 DNA序列测定是进行基因突变检测的最直接、最准确的方法。 不仅可确定突变的部位，而且可确定突变的性质。由于PC技术 的应用，使DNA测序技术从过去的分子克隆后测序进入扩增产物 直接测序的新阶段。 现在发展了一种双链DNA循环测序法(dsDNA cycle sequencing),其特点是直接以PCR产物为模板，在测序体系中 以Taq DNA聚合酶替代测序酶，而引物的5'端带有标记，通过 多次变性、退火、延伸的循环来完成测序反应，因此具有快速、 简便、灵敏、重复性好等优点
DNA序列测定是进行基因突变检测的最直接、最准确的方法。 不仅可确定突变的部位，而且可确定突变的性质。由于PCR技术 的应用，使DNA测序技术从过去的分子克隆后测序进入扩增产物 直接测序的新阶段。 现在发展了一种双链DNA循环测序法(dsDNA cycle sequencing)，其特点是直接以PCR产物为模板，在测序体系中 以Taq DNA聚合酶替代测序酶，而引物的5＇端带有标记，通过 多次变性、退火、延伸的循环来完成测序反应，因此具有快速、 简便、灵敏、重复性好等优点。 5、DNA序列测定
6、DNA芯片技术 DNA芯片技术是近年来兴起的基因分析与检测的新技术， 以其快速、敏感、高效、平行化、自动化等特点，将发 展成为新一代基因诊断技术。应用DNA芯片；不仅可以检 测基因的结构及其突变、多态性，而且可以对基因的表 达情况进行分析，因此在基因诊断中的应用前景非常广 阔
DNA芯片技术是近年来兴起的基因分析与检测的新技术， 以其快速、敏感、高效、平行化、自动化等特点，将发 展成为新一代基因诊断技术。应用DNA芯片；不仅可以检 测基因的结构及其突变、多态性，而且可以对基因的表 达情况进行分析，因此在基因诊断中的应用前景非常广 阔。 6、DNA芯片技术