第十三章专题讲在一 外源基因的表面展示 The Surface display of foreign gene 马永平 重庆医科大学基础医学院分子生物学教研室
马永平 重庆医科大学基础医学院分子生物学教研室 外源基因的表面展示 The Surface display of foreign gene 第十三章 专题讲座一
、 什么是表面展示枝术? (What's surface display technic?) 表面展示技术(surface display technic)是一种将外源肽或蛋白质与噬 菌体、细菌或杆状病毒表面特定蛋白质 融合表达并展示在其表面的技术,主要 用于构建蛋白质或多肽文库,并从中筛 选出感兴趣的蛋白质、多肽或抗体等, 它在抗体制备、蛋白质相互作用研究、 活菌疫苗和生物催化剂研究方面有广泛 的应用前景
一、什么是表面展示技术? (What’s surface display technic?) 表面展示技术(surface display technic)是一种将外源肽或蛋白质与噬 菌体、细菌或杆状病毒表面特定蛋白质 融合表达并展示在其表面的技术,主要 用于构建蛋白质或多肽文库,并从中筛 选出感兴趣的蛋白质、多肽或抗体等, 它在抗体制备、蛋白质相互作用研究、 活菌疫苗和生物催化剂研究方面有广泛 的应用前景
二、操作程厉 (procedure) 随机核苷酸片段令 淋巴细胞-→总mRNA→cDNA→构建 重组噬菌体→感染大肠杆菌→筛选 (亲和吸附-→洗脱→扩增→继续3一4 轮)
二、操作程序(procedure) 随机核苷酸片段 淋巴细胞→总mRNA →cDNA →构建 重组噬菌体→感染大肠杆菌→筛选 (亲和吸附→洗脱→扩增→ 继续3-4 轮)
三、表面展示康镜分美 (surface display system taxonomy) 噬菌体表面展示系统 >细菌表面展示系统 >真核表面展示系统
三、表面展示系统分类 (surface display system taxonomy) ➢噬菌体表面展示系统 ➢细菌表面展示系统 ➢真核表面展示系统
(一)噬菌体表面展示系统 (phage surface display system) 噬菌体表面展示(phage display)是将外源 蛋白通过与噬菌体外壳蛋白融合表达在噬菌体颗 粒表面的一种技术 特点:1.在噬菌体表面可随机表达特定长度的外 源肽段. 2.可用亲和吸附技术筛选和富集含有与特 异靶分子结合的噬菌体克隆 3.外源肽可以保持相对独立的空间结构和 生物活性
(一)噬菌体表面展示系统 (phage surface display system) 噬菌体表面展示(phage display)是将外源 蛋白通过与噬菌体外壳蛋白融合表达在噬菌体颗 粒表面的一种技术. 特点:1.在噬菌体表面可随机表达特定长度的外 源肽段. 2.可用亲和吸附技术筛选和富集含有与特 异靶分子结合的噬菌体克隆. 3.外源肽可以保持相对独立的空间结构和 生物活性.