“水壳”模型( water-she‖mode)) 蛋白质向非极性溶剂中反胶团的纳米级水池中的溶 解,有图2-17所示的四种可能。 ①大分子蛋白质被 封闭在“水池”中 蛋臼 ②蛋白质中的亲脂部 蛋白质 H0 分直接与非极性溶 H, O 剂的碳氢化合物相 (3) (1) 接触 ③蛋白质被吸附在微 胶团的“内壁”上 莲白质 ④蛋白质被几个微胶 liNN 团所溶解 图2-17蛋白质向反胶团溶解的可能模型 2005-3-28
2005-3-28 11 “水壳”模型（water-shell mode）） ▪ 蛋白质向非极性溶剂中反胶团的纳米级水池中的溶 解，有图2-17所示的四种可能。 ①大分子蛋白质被 封闭在“水池”中 ②蛋白质中的亲脂部 分直接与非极性溶 剂的碳氢化合物相 接触 ③蛋白质被吸附在微 胶团的“内壁”上 ④蛋白质被几个微胶 团所溶解， 图2-17 蛋白质向反胶团溶解的可能模型
酶、蛋白质萃取特性 分离场(胶团)-分离目标物质(蛋白质))间的相 互作用及其影响因素等见表24 表2-4决定分配系数K的分离场-分离物质间相互作用 相互作用 分离场 分离物质 静电性相互作用pH、盐的种类和离子强度p、表面电荷 液状离子交换体浓度、胶 团内双重电荷层 立体性相互作用胶团尺度、含水率W、表分子量 面活性剂浓度 疏水性相互作用溶剂、胶团亲水疏水基 亲水疏水残基 含水率 特异性相互作用亲和配体 构象 2005-3-28 12
2005-3-28 12 ▪ 酶、蛋白质萃取特性 ▪ 分离场（胶团）-分离目标物质（蛋白质））间的相 互作用及其影响因素等见表2-4。 表2-4 决定分配系数K的分离场-分离物质间相互作用 相互作用 分离场 分离物质 静电性相互作用 pH、盐的种类和离子强度 pI、表面电荷 液状离子交换体浓度、胶 团内双重电荷层 立体性相互作用 胶团尺度、含水率W、表 分子量 面活性剂浓度 疏水性相互作用 溶剂、胶团亲水疏水基、 亲水疏水残基 含水率 特异性相互作用 亲和配体 构象
下面以研究得较多的AOT/异辛烷体系为对 象,以立体性、静电性、疏水性相互作用的 分离特性及效果作以下的归纳。 酶、蛋白质等生物大分子的空间尺度与反胶 团的大小相接近。因而包括立体性相互作用 在内,表5-11所有的相互作用关系虽都很 重要,但在多数场合下,是它们之间的复合 作用占主导地位。有些蛋白质其构象很小的 变化就可能对这些相互作用的结果产生很大 的影响。 2005-3-28
2005-3-28 13 ▪ 下面以研究得较多的AOT／异辛烷体系为对 象，以立体性、静电性、疏水性相互作用的 分离特性及效果作以下的归纳。 ▪ 酶、蛋白质等生物大分子的空间尺度与反胶 团的大小相接近。因而包括立体性相互作用 在内，表5-11中所有的相互作用关系虽都很 重要，但在多数场合下，是它们之间的复合 作用占主导地位。有些蛋白质其构象很小的 变化就可能对这些相互作用的结果产生很大 的影响
1静电性相互作用 以细胞色素C、溶菌酶、核糖核酸酶a为例,考察它 们从主体水相向反胶团内微水相中的萃取或反方向 的反萃取时静电性相互作用以及pH对这种作用的影 响 ①对于M<20000分子蛋白质,pH>p时,蛋白质 不能溶入胶团内,但在等电点附近,急速变为可溶。 当pH<p时,即在蛋白质带正电荷的pH范围内,它 们几乎完全溶入胶团内 2005-3-28 14
2005-3-28 14 1.静电性相互作用 ▪ 以细胞色素C、溶菌酶、核糖核酸酶a为例，考察它 们从主体水相向反胶团内微水相中的萃取或反方向 的反萃取时静电性相互作用以及pH对这种作用的影 响。 ①对于Mr＜20000小分子蛋白质，pH＞pI时，蛋白质 不能溶入胶团内，但在等电点附近，急速变为可溶。 当pH＜pI时，即在蛋白质带正电荷的pH范围内，它 们几乎完全溶入胶团内
100 80 60 料一 40 20 2 4 6 8 10 △核糖核酸酶a O细胞色素C 口溶菌酶 pl7.8,Mr13683pl10.6,M12384pl11.1,Mr14300 图2-18pH对蛋白质萃取率的影响 2005-3-28 15
2005 - 3 -28 15 图2-18 pH对蛋白质萃取率的影响