②蛋白质相对分子质量增大到一定程度,即使将pH向酸 性一侧偏离pl,萃取率也会降低(即立体性相互作用 效果增大) ③相对分子质量更大的BSA,全pH范围内几乎都不能萃 取(即静电相互作用效果无限小,可忽略不计)。此 时,AOT浓度如较通常条件(50~100mmoL)增加 到200~500mmo机L,逐渐变为可萃取。 ④降低pH,正电荷量增加,似乎有利于萃取率的提高。 事实上,缓慢减小pH,萃取率从某一pH开始,急速 减小。这被认为是蛋白质的pH变性所造成的。蛋白质 和微量的AOT在静电、疏水性等的相互作用下,在水 相中生成了复合体而变性 2005-3-28 16
2005-3-28 16 ②蛋白质相对分子质量增大到一定程度，即使将pH向酸 性一侧偏离pI，萃取率也会降低（即立体性相互作用 效果增大）。 ③相对分子质量更大的BSA，全pH范围内几乎都不能萃 取（即静电相互作用效果无限小，可忽略不计）。此 时，AOT浓度如较通常条件（50～100mmol/L）增加 到200～500mmol/L，逐渐变为可萃取。 ④降低pH，正电荷量增加，似乎有利于萃取率的提高。 事实上，缓慢减小pH，萃取率从某一pH开始，急速 减小。这被认为是蛋白质的pH变性所造成的。蛋白质 和微量的AOT在静电、疏水性等的相互作用下，在水 相中生成了复合体而变性
⑤添加KC等无机盐,萃取率下降(图219) 100 80 颦\ 繁40 20 0.2 0.4 0.6 0.8 10 KCl(mol/L3) 20038图2-19盐浓度对蛋白质溶解率的影响 17
2005-3-28 17 ⑤添加KCl等无机盐，萃取率下降（图2-19）。 图2-19 盐浓度对蛋白质溶解率的影响
■而且,它对有机相具有脱水作用(W城小,见下 图),使立体性相互(排斥)作用增大。 30 AOT(mmol/L)=(○)50 (△)100,(口)200,(◇)30 20 10 0.5 1.0 Nac|(m。 2005-3-28 图2-20盐浓度对反胶团含水率的影响 18
2005-3-28 18 ▪ 而且，它对有机相具有脱水作用（W减小，见下 图），使立体性相互（排斥）作用增大。 图2-20 盐浓度对反胶团含水率的影响 AOT（mmol／L）＝（○）50 （△）100，（□）200，（◇）300
2立体性相互作用 随着蛋白质分子量的增大,蛋白质分子和胶团间的立 体性相互作用增加,萃取率有下降趋势。用动态光散 射法测定,发现反胶团粒径存在一粒径分布,胶团的 粒径分布(分离场)随盐浓度和AOT浓度的增加而 发生显著的变化。与蛋白质溶入与否没有关系。 分离场不受蛋白质种类的影响,可通过控制反胶团粒 径,高效分离纯化蛋白质 随着蛋白质分子量的增加,分配系数K迅速下降, 相对分子质量20000左右的蛋白质的高效分离是可能 的 萃取溶入胶团的蛋白质的种类和相对分子质量不同, 分离场的特性(胶团平均直径和含水率)几乎不变。 2005-3-28 19
2005-3-28 19 2.立体性相互作用 ▪ 随着蛋白质分子量的增大，蛋白质分子和胶团间的立 体性相互作用增加，萃取率有下降趋势。用动态光散 射法测定，发现反胶团粒径存在一粒径分布，胶团的 粒径分布（分离场）随盐浓度和AOT浓度的增加而 发生显著的变化。与蛋白质溶入与否没有关系。 ▪ 分离场不受蛋白质种类的影响，可通过控制反胶团粒 径，高效分离纯化蛋白质。 ▪ 随着蛋白质分子量的增加，分配系数KpI迅速下降， 相对分子质量20000左右的蛋白质的高效分离是可能 的。 ▪ 萃取溶入胶团的蛋白质的种类和相对分子质量不同， 分离场的特性（胶团平均直径和含水率）几乎不变