上游充通大警 1.The Exploration of Genes Relies on Key Tools SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY 实现不同来源DA片段的重组 EcoRI DNA fragments join at sticky ends Sticky end B日8 Booc Sticky end Recombinant DNA
实现不同来源 DNA 片段的重组 1. The Exploration of Genes Relies on Key Tools
上游充通大学 1.The Exploration of Genes Relies on Key Tools SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY 3)聚合酶 DNA聚合酶，以DNA为复制模板，从将DNA由5'端点开始复制 到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成 > Taq酶：扩增效率最高的耐热DNA聚合酶，能很好的扩增6kb 以下的DNA片段。扩增碱基出错率为105左右。 > Pu酶：目前保真度最高的耐热DNA聚合酶，碱基出错率为106， 但扩增效率低于Taq酶，一般能很好的扩增2kb以下的片段。 Polymerase
3）聚合酶 DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板，从将DNA由5'端点开始复制 到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成 Taq酶：扩增效率最高的耐热DNA聚合酶，能很好的扩增6kb 以下的DNA 片段。扩增碱基出错率为10-5左右。 Pfu酶：目前保真度最高的耐热DNA聚合酶，碱基出错率为10-6 ， 但扩增效率低于Taq酶，一般能很好的扩增2kb以下的片段。 1. The Exploration of Genes Relies on Key Tools
上游充通大学 1.The Exploration of Genes Relies on Key Tools SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY (二)核酸电泳 琼脂糖凝胶电泳 >核酸的大小分离 >染料显色 >核酸纯化
（二）核酸电泳 核酸的大小分离 染料显色 核酸纯化 琼脂糖凝胶电泳 1. The Exploration of Genes Relies on Key Tools
上游究更大学 1.The Exploration of Genes Relies on Key Tools SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY 琼脂糖凝胶电泳中核酸分子量的测定 bp bp p 1200 12000 -2000 -5000 8000 3000 88 二 -1000 2000 4000 2000 1500 3000 1000 2500 2000 1500 50 1000 -1 60 500 250 二
琼脂糖凝胶电泳中核酸分子量的测定 1. The Exploration of Genes Relies on Key Tools
上游究更大学 SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY 1.The Exploration of Genes Relies on Key Tools 限制性内切酶凝胶电泳图谱 SV40特征性图谱 Figure 5.2 Gel-electrophoresis pattern of a restriction digest. This gel shows the fragments produced by cleaving SV40 DNA with each of three restriction enzymes.These fragments were made fluorescent by staining the gel with ethidium bromide
1. The Exploration of Genes Relies on Key Tools Figure 5.2 Gel-electrophoresis pattern of a restriction digest. This gel shows the fragments produced by cleaving SV40 DNA with each of three restriction enzymes. These fragments were made fluorescent by staining the gel with ethidium bromide. 限制性内切酶凝胶电泳图谱 SV40 特征性图谱