C、外膜蛋白(outer membrane protein):是嵌合在LPS和磷脂层外膜上的蛋白。有 20余种,但多数功能尚不清楚。 1)孔蛋白(porins):是由三个相同分子量(36000)蛋白亚基组成的一种二聚体跨 膜蛋白,中问有一直径约1m的孔道,通过孔的开、闭,可对进入外膜层的物质进行选择。 非特异性孔蛋白:可通过分子量小于800900的任何亲水性分子 特异性孔蛋白:只容许一种或少数几种相关物质通过,如V:和核甘酸等, 2)脂蛋白(1 ipoprotein):是一种通过共价键使外膜层牢固地连接在肽聚糖内壁层上 的蛋白,分子量约为7200 D、周质空问(periplasmic space,periplasm)):又称壁膜问隙。在G细菌中,一般 指其外膜与细胞膜之间的狭窄空问(宽约1215m),呈胶状。在周质空问中,存在多 种周质蛋白(periplasmic proteins).如水解酶类、合成酶类、结合蛋白、受体蛋白. 周质空问是进出细胞的物质的重要中转站和反应场所。 节兰氏染色的机制: 细菌对节兰氏染色的不同反应是由于它们细胞壁的成分结构不同而造成的。初染、复 染后,细胞膜上染上不溶于水的结晶紫、碘的大分子复合物,故经前两步处理后二者颤色 一致。关键在第二步脱色,由于G菌的细胞壁厚而致密,肽聚糖含量高,且呈网状结构, 故脱色时,肽聚糖网孔脱水,明显收缩乃至关闭,再由于其类脂质含量低,在壁上溶出缝 隙少,阻止大分子不易洗脱,仍呈紫色:而G茵壁薄,肽聚糖含量低,交联度低,故遇 到乙醇后,网孔不易收缩,类脂质含量高,遇乙醇溶解形成拉大缝隙,大分子参漏,再染 呈红色 细胞壁缺陷细胞: 1)原生质体(protoplast):指在人为条件下,用溶菌酶处理或在含青霉素的培养基 中培养而抑制新生细胞壁合成而形成的仅由一层细胞膜包裹的,圆球形、渗透压变化敏感 的细胞,一般由G细菌形成。 溶菌酶破坏细胞壁作用机制: 使B-1,4糖甙链被破坏,破坏肽聚糖一级链结构,细胞壁被破坏,菌体低渗性裂解, 起到杀菌作用。人体泪液、唾液中均含此酶 吉霉素破坏细跑壁作用机制: 作用于细胞壁合成时,抑制细胞壁肽聚糖二级结构形成中甘氨酸转肽酶活性,从而导 致细菌不能合成完整的细胞壁,起到抑菊作用。 特点:对环境条件变化敏感.低参诱压、振荡、离心其至通气等都易弓引杞其破翠:有 的原生质体具有鞭毛,但不能运动,也不被相应噬南体所感染:在适宜条件(如高渗培养 基)可生长繁殖、形成菌落、形成芽孢、及恢复成有细胞壁的正常结构。比正常有细胞壁 的细菌更易导入外源遗传物质,是研究遗传规律和进行原生质体育种的良好实验材料 2)球状体(sphaeroplast):又称原生质球:采用上述同样方法,针对G一细菌处理 后而获得的残留部分细胞壁(外壁层)的球形体。与原生质体相比,它对外界环境具有
定的抗性,可在普通培养基上生长。 3)L型细菌(L,-form of bacteria):指细茵在某些环境条件下(实验室或宿主体内) 通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型。因英国李斯德(Lister)顸防研 究所首先发现而得名(1935年,念珠状链杆菌St"ento功haci11 us moni1 iformis):在大 肠杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、链球菌、分枝杆茵和霍乱弧菌等20多种细菌中均有发现, 被认为可能与针对细胞壁的抗菌治疗有关。 特点:没有完整而坚韧的细胞壁,细胞呈多形态:有些能通过细菌滤器,故又称“滤 过型细菌”:对渗透敏感,在固体培养基上形成“油煎蛋”似小菌落(直径0.1m左右)。 对渗透压敏感,容易破裂,在普通培养基上不能生长。 2、细胞质膜 位于细胞壁内侧,紧包细胞质外,是由磷脂和蛋白质组成的柔软、富有弹性的半透性 博膜。厚约7一8m,由磷脂(占20%~一30%)和蛋白质(占50%一70%)组成。占细菌干重 的10一30%。细菌细胞膜是细菌生存的重要结构之一,其生活所需营养物直接依赖于细 胞膜。 细胞膜的化学组成与结构模型 细胞膜是以两层磷脂分子整齐排列的分子层为骨架,每个磷脂分子是由一个不溶于水 的“头部”(亲水部分)和两个磷脂酸链“尾部“(疏水部分)组成。在磷脂双分子层中, 亲水端朝向膜内外两表面,疏水端朝向膜中央。在双分子层中有许多蛋白质称膜蛋白,或 结合于表血,或镶嵌于层中,或贯穿其中。膜蛋白不是单一种类,各种蛋白执行不同生理 功能 液态靠嵌德型(f1 uid mosaic mode1)(1972年,辛格(L.S.singer)和尼利科尔 (G.L.Nicolson)提出):①膜的主体是脂质双分子层:②脂质双分子层具有流动性:③ 整合蛋白因其表面呈疏水性,故可“溶”于脂质双分子层的疏水性内层中:④周边蛋白表 面含有亲水基团,可通时静电弓引力与脂质双分子层表面的极性头相连:⑤脂质分子问或脂 质与蛋白质分子间无共价结合:⑥脂质双分子层犹如一“海洋”,周边蛋白可在其上作“漂 浮”运动,而整合蛋白则似“冰山”状沉浸在其中作横向移动。 3、细胞质 细跑质是膜内容胶状物质,是细菌新陈代谢的重要场所,是合成蛋白和复制核酸的场 所,也是进行同化和异化作用的场所。此外,细胞质内还含有一些「分重要的颗粒物质, 其中最突出的就是质粒(plasmid)。 质粒又称CCCDNA(circular covalenty closed DNA),质粒上携带着某些染色体上 所没有的基因,赋予细南某些对其生存并非不可少的特殊功能。分子量比染色体小,因而 基因数日少,大约100一200个,携带特定遗传信息而控制细菌的某些性状。很多细菌都 发现有质粒,例如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、白喉杆菌等。 4、核质体 细菌的核具有原核生物特征,DNA缠结成团,无组蛋白包绕,无核膜和核仁,与细胞