《食品微生物学实验》教学大纲 一、课程基本信息 课程编码：092118B 课程名称：食品微生物学实验 英文名称：Experiment of Microbiology 课程类别：专业基础课 总学时：30 总学分：1 适用专业：食品科学与工程 二、实验课程的性质、目标与任务 食品微生物学实验是为专业基础课《微生物学》配套的同步实验课程，为必修课程，是为食品 科学专业的人才小培养目标开展的。其目的是为了使学生加深理解微生物基础理论，掌程微生物学实 验的基本技能，通过实验教学，培养学生观察、思考、分析和解决问题的综合能力，以及实事求是， 严肃认真的科学研究态度，提高学生的综合素质，熟悉并掌捏微生物学研究方法，能用微生物学方 法解决一些专业实际问题。为学生今后的学习及工作实我打下宽厚的基础。 (1)微生物学实验主要任务是使学生掌程研究与应用微生物的主要方法与技术，包括经典的、 常规的、以及现代的方法与技术，使学生具有适应于从事相关学科的基础理论研究与实际生产应用 的微生物学实验技能。 (2)与微生物学基础理论课紧常结合，使学生将理性知识与感性认识有机地结合，将书本知识 用于实验，在实验中深地理解基础理论，提高学生的综合能力与创新意识。 (3)提高学生分析问题和解决问题的能力。根据本学科的特点，逐步使学生认识微生物的基本 特性，比较它们与其它生物的相似和不同之处，知道何研究微生物以及对研究中所出现的问题点 样分析，并加以解决。 三、实验课程教学基本要求 1、要求学生熟悉微生物实验的基本原理，包括普通光学显微镜的工作原理，革兰氏染色法原理， 微生物的分离，培养基的配制原理，高压蒸汽灭菌原理等。 2、要求学生掌握显微技术、染色技术、消毒与灭菌技术、接种技术、培养技术等，并运用这些 技术从事微生物学研究、解决有关微生物专业的实际问题，为进一步学习有关专业课程与微生物学 相关研究与生产基础莫定良好基础。 3、要求学生及时规范地写出实验报告：有绘图要求的实验，必须在课堂内成显微镜下绘图
力求其实、准确：无绘图要求的实验，对实验结果要认其观察、记录、整理：实验报告写作要规范， 要有简要的分析讨论。 四、实验教学内容及要求 实验一显微镜的使用和真菌形态的观察 【实验类型】 验证性实验 【目的与要求】 熟悉普通光学显微镜各部分的结构和性能。观察真菌的基本形态。绘出所观察到的真菌形态， 并注明物镜放大倍数和总放大倍数。完成实验报告，根据你的实验体会，淡谈！何根据所观察微生 物的大小选并不同的物镜进行有效观察。 【内容提要】 光学显微镜山机械装置和光学系统两大部分组成。油镜通常标有O或H字样，有时也有用 刻一图红线或黑线为标记的。用不同放大倍数的目镜可使被检物体放大1000-2000倍。实验步骤： 1、调节光源 2、低倍镜观察 3、高倍镜观察 【所需主要仪器设备】 显微镜、真菌切片 实验二革兰氏染色法 【实验类型】 验证性实验 【目的与要求】 了解革兰氏染色的原理：掌握革兰氏染色的方法。报片所观察到的两种细菌革兰氏染色的结果， 完成实验报告。 【内容提要】 根据革兰氏染色反应的结果，可将所有细菌分为两类：呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细南，用G 表示；呈红色的称为革兰氏阴性细菌，用G表示。实验步骤：
1、涂片 2、固定 3、染色 4、干燥 5、镜检 【所需主要仪器设备】 显微镜、载玻片、盖玻片、草兰氏染液、酒精灯、滤纸、接种环等 实验三酵母菌的形态观察及大小测定 【实验类型】 验证性实验 【目的与要求】 学习在显微镜下测量微生物的大小方法、原理，对微生物的大小有直观的认识：掌捏酵母笛的 一般形念特征及其与细菌的区别：学会制作临时水浸装片。绘出所观察到的酵母菌的形念特征，记 录下所测的酵母菌的大小。 【内容提要】 酵母是一类单细胞真菌，一般呈圆形、椭圆形和圆柱形，无性繁殖以芽飧为主，也有少数是裂 馆，有些酵母能产子囊孢子，有的酵母能产假菌丝。酵母菌的菌落与细菌类似，但大都较大、厚、 多呈白色、少数红色。酵母菌的结构较完善，有壁、膜、质、核等结构。酵母菌的细胞形态、繁殖 方式和培养特征都可作为菌种鉴定的依据。 微生物细胞大小测量工具为目镜测微尺和镜台测微尺。通过镜台测微尺可以标定目镜测微尺， 消除山于显微镜不同所造成的误差，进而用目镜测微尺来测量微生物的大小。实验步骤： 1、制作水浸装片 2、观察酵母笛 3.目镜测微尺的校币 4,测量酵母细胞大小 【所需主要仪器设备】 显微镜、载玻片、盖玻片、目镜测微尺、镜台测微尺、酵母菌悬液等。 实验四酵母菌的死活鉴定及微生物直接计数
【实验类型】 验证性实验 【目的与要求】 了解血球计数板构造、计数原理与使用方法：学习区别死活酵母的方法：检测菌悬液浓度、酵 母菌死亡率 【内容提要】 微生物的计测方法很多，主要有直接计数法、间接计数法、细胞或原生质体总量计测。直接计 数法就是直接计数样品中的菌体数量，包括死活个体数量的总和。常用涂片计数法和血球计数板计 数法。 使用血球计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物的数量，再换算成每mL菌液（或每g 样品中微生物细胞的数量。 美蓝是一种弱氧化剂，氧化型呈蓝色，还原后变为无色。活酵母山于新陈代谢个断进行，细胞 内有较强的还原能力，可以将关蓝还原，而死的酵母则不行，因此可以将酵母的死活加以区分。实 验进行中要注意染色时间。实验步翼： 1、酵母菌死活鉴定：稀释、加关兰、制片、显微镜观察。 2、血球计数板计数：稀释、血球计数板加样品、显微镜计数。 【所需主要仪器设备】 显微镜、载玻片、盖玻片、血球计数板、关兰、酵母菌悬液等 实验五培养基的制备与灭菌 【实验类型】 验证性实验 【目的与要求】 明确培养基的配制原理：通过对基础培养基的配制，掌挥配制培养基的一般方法和步骤：了解 微生物实验的各种灭菌方法了解高压蒸汽灭菌的基本原理及应用范困，学习高压蒸汽灭菌的燥作方 法。 【内容提要】 牛肉膏蛋白陈培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基， 山于这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供作微生物生长繁殖
之用。基础培养基含有牛肉音，蛋白陈和NaCL。 高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的 水沸腾而产生蒸汽。从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭 菌的目的。实验步骤： 1、称量 2、溶化 3、调PH 4、过滤 5、分装 6、加棉塞 7、包扎 8、灭南 9、搁肾斜面 10、无菌检查 【所需主要仪器设备】 蛋白陈、牛肉膏、琼脂、PH试纸、电磁炉、高压灭菌锅、干燥箱、NaC、试管、脱脂棉、报纸、 三角瓶、棉线等。 实验六食品微生物学综合实验 【实验类型】 综合，设计性实验 【目的与要求】 食品微生物学综合实验是食品科学与工程专业重要的实践环节。通过食品微生物学综合实验课 程的学习，使学生深刻理解微生物学实验的技术与理论，熟练运用已经学习的多种技术，并通过学 生查阅资料学习新的实验技术，学会充分利用本实验室已有的实验设备和条件，将自己的思想、想 法付诸于实践。食品微生物学综合实验使技术性、综合性、探索创新性的实验融合在一起，培养学 生的创新思维和独立分析问题、解决问题的能力。 【内容提要】 微生物在自然界不是单一纯粹地存在，欲获得所需菌种，必须进行分离、接种、培养。 分离方法很多，主要有平板划线分离、平板倾注法、选样培养基法、单细胞挑选法，接种方法 5