米氏常数的意义 ①Km是酶的特征性常数,其单位是浓度单位。在 定的反应条件下,对于一定的底物,Km是定值。 ②Km可以判断酶的天然底物。有些酶可以作用于几 个底物,其中Km最小的底物是天然底物。 ③当k<<k时,Km=Ks,可以作为判断酶与底物 亲和力的指标,Km越小,酶与底物的亲和力越大 ④根据Km值,可以计算出在某一底物浓度下,反应 速率是最大反应速率的百分之多少 ⑤根据细胞内酶反应正反两方面的底物浓度,以及 两方面的Km值,可以推测细胞内代谢的方向
米氏常数的意义 ① Km是酶的特征性常数，其单位是浓度单位。在一 定的反应条件下，对于一定的底物，Km是定值。 ② Km可以判断酶的天然底物。有些酶可以作用于几 个底物，其中Km最小的底物是天然底物。 ③ 当k3 << k2时，Km = Ks，可以作为判断酶与底物 亲和力的指标，Km越小，酶与底物的亲和力越大。 ④ 根据Km值，可以计算出在某一底物浓度下，反应 速率是最大反应速率的百分之多少。 ⑤ 根据细胞内酶反应正反两方面的底物浓度，以及 两方面的Km值，可以推测细胞内代谢的方向
米氏方程S与w/Vm的关系 [S] Km+ST Vm Km+S 当S]=10Km时,v=0.91Vm 当S=01Km时,v=0.091Vm 反之,可以计算出要达到一定的最大反 应速率的分数,需要加多少底物 (见P360表92)
米氏方程[S]与 v / Vm 的关系 [ ] [ ] K S S V v m m + = [ ] [ ] K S V S v m m + = 当[S]=10Km时，v=0.91Vm 当[S]=0.1Km时，v=0.091Vm 反之，可以计算出要达到一定的最大反 应速率的分数，需要加多少底物。 （见P360表9-2）
Vm和k3的意义 在一定的反应条件下,Vm与酶浓度成正比。 当[S|>>Km时,v=Vm=kE,此时对底物来说 是零级反应,对酶来说是一级反应,k3是一级反 应速率常数,k是表示当酶被底物饱和时每秒钟 每个酶分子转换底物的分子数(又称为转换数), 这时的k又可以写成kat,keat越大,说明酶的 催化效率越高
Vm和k3的意义 在一定的反应条件下，Vm与酶浓度成正比。 当[S]>>Km时，v = Vm = k3[E]，此时对底物来说 是零级反应，对酶来说是一级反应，k3是一级反 应速率常数，k3是表示当酶被底物饱和时每秒钟 每个酶分子转换底物的分子数（又称为转换数）， 这时的k3又可以写成 kcat，kcat 越大，说明酶的 催化效率越高
kcat/Km的意义 Kcat/Km表示酶的催化效率,Kca/km越大, 催化效率越高。=Ak3,其最大值极限是 Km k2+k3 k,而k是酶与底物结合的速率常数,此常数受 到底物在溶液中扩散速度的影响
kcat /Km的意义 Kcat/Km表示酶的催化效率，Kcat/Km越大， 催化效率越高。 ，其最大值极限是 k1，而k1是酶与底物结合的速率常数，此常数受 到底物在溶液中扩散速度的影响。 2 3 3 1 3 k k k k K k m + =
作图法求Km和Vm值 ( Lineweaver-Buk双倒数作图法) 将米氏方程两边取倒数得 1Km11 ISI V 在一系列S下测出相应的反应速率v,以 对作图,可得出Km和Vm值
作图法求Km和Vm值 （Lineweaver-Burk双倒数作图法） 将米氏方程两边取倒数得 在一系列[S]下测出相应的反应速率v，以 对 作图，可得出Km和Vm值。 m m m V S V K v 1 [ ] 1 1 = + [ ] 1 v S 1