1基本实验 1.1中药显微鉴定基本技术 内容提要 本实验包括显微测量、显微制片的基本技术、显微化学反应和显微特征描述的基本方法。 通过实验掌握显微测量、显微制片、显微化学反应的一般方法与技术，掌握常见显微特 征描述的一般方法。 原理 (1)显微测量使用标定的目镜测微尺，测定显微目的物的大小（以μm为计量单位）。 目镜测微尺是放在目镜内的直径为2cm的圆形玻片，其上有100等分格的刻度尺，每一小 格表示的实际长度随不同的显微镜、不同放大倍数的物镜而不同。镜台测微尺是在载玻片上 封固有精细刻度的标尺，标尺的长度是1mm,分为100等分小格（每小格的长度为10um), 用于目镜量尺的标定。使用标定的目镜测微尺，才能测量显微镜下目的物的大小 (2)显微制片根据鉴定工作的需要，采用徒手制片和机械制片等手段，制备各种显 微制片供显微特征的观察和描述。根据制作方法和保存的需要，分为半永久制片、永久制片 和临时制片3大类。根据观察的目的和对供试品采取的制片方法也不同，分切片标本片、解 离组织标本片、表面标本片、粉末标本片和磨片等：其中横切片多用于观察组织的排列特征： 纵切片多用于观察茎、木类中药的某些细胞组织，如射线的特征：解离组织片用于观察某些 细胞的形状，如纤维、石细胞等：表面片多用于观察叶、花、全草、果实和种子等的表面特 征，一般取某一部分制片：粉末片多用于观察组织碎片、细胞、内含物或某些中药颗粒的特 征：磨片用于坚硬药材，如骨类、贝壳类及矿石类显微特征的观察。 (3)显微化学反应显微化学反应是指在药材的临时切片（新鲜的材料效果尤佳）或粉 末片上滴加某种化学试剂，观察细胞壁、细胞内含物以及所含化学成分的反应。 (4)显微描绘器 1
1 1 基本实验 1.1 中药显微鉴定基本技术 内容提要 本实验包括显微测量、显微制片的基本技术、显微化学反应和显微特征描述的基本方法。 通过实验掌握显微测量、显微制片、显微化学反应的一般方法与技术，掌握常见显微特 征描述的一般方法。 原理 （1）显微测量 使用标定的目镜测微尺，测定显微目的物的大小（以 μm 为计量单位）。 目镜测微尺是放在目镜内的直径为 2cm 的圆形玻片，其上有 100 等分格的刻度尺，每一小 格表示的实际长度随不同的显微镜、不同放大倍数的物镜而不同。镜台测微尺是在载玻片上 封固有精细刻度的标尺，标尺的长度是 1mm，分为 100 等分小格（每小格的长度为 10μm）， 用于目镜量尺的标定。使用标定的目镜测微尺，才能测量显微镜下目的物的大小 （2）显微制片 根据鉴定工作的需要，采用徒手制片和机械制片等手段，制备各种显 微制片供显微特征的观察和描述。根据制作方法和保存的需要，分为半永久制片、永久制片 和临时制片 3 大类。根据观察的目的和对供试品采取的制片方法也不同，分切片标本片、解 离组织标本片、表面标本片、粉末标本片和磨片等；其中横切片多用于观察组织的排列特征； 纵切片多用于观察茎、木类中药的某些细胞组织，如射线的特征；解离组织片用于观察某些 细胞的形状，如纤维、石细胞等；表面片多用于观察叶、花、全草、果实和种子等的表面特 征，一般取某一部分制片；粉末片多用于观察组织碎片、细胞、内含物或某些中药颗粒的特 征；磨片用于坚硬药材，如骨类、贝壳类及矿石类显微特征的观察。 （3）显微化学反应 显微化学反应是指在药材的临时切片(新鲜的材料效果尤佳)或粉 末片上滴加某种化学试剂，观察细胞壁、细胞内含物以及所含化学成分的反应。 （4）显微描绘器
(5)显微特征的描述显微特征的描述是在观察显微特征的基础上，对显微特征进行 的形态描述。描述的内容主要有组织排列、细胞形状、细胞的大小和数量、颜色等。粉末显 微特征的描述应遵循先多数后少数、先特殊后一般、先感观后测试的原则进行。 2
2 （5）显微特征的描述 显微特征的描述是在观察显微特征的基础上，对显微特征进行 的形态描述。描述的内容主要有组织排列、细胞形状、细胞的大小和数量、颜色等。粉末显 微特征的描述应遵循先多数后少数、先特殊后一般、先感观后测试的原则进行
仪器、材料与试剂 (1)仪器与材料 1)仪器生物显微镜，目镜测微尺，镜台测微尺，显微描绘器，镊子，解剖针，载玻片， 盖玻片，酒精灯，剃须刀片，粉碎机，绘图板，铅笔等。 2)材料粉末：艾叶，巴戟天，半夏，穿心莲，黄芪，木香，肉桂，石韦，洋金花。绵 马贯众叶柄永久制片 (2)试剂-萘酚浓硫酸试液，碘试液，间苯三酚试液，水合氯醛试剂，苏丹Ⅲ试液， 稀甘油试剂，盐酸，硝酸，碘化秘钾试剂，氯化锌碘试液，硫酸，钉红试液，硝酸汞试液， 乙醚，石油醚，90%乙醇，70%乙醇，-萘酚乙醇溶液，稀盐酸，稀醋酸等。 操作步骤 (1)显微测量 1)显微目镜测微尺的标化取下显微镜的目镜，将目镜测微尺的刻度面向上放入目境 内的视场光阑上，再旋上上透镜。 将镜台测微尺盖片面朝上放在再载物台上，用低倍镜观察，调节焦距看清楚镜台测微尺 的刻度。 移动镜台测微尺，同时转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺平行靠近，并将两尺的“0” 点刻度线或某刻度线对齐，然后从左向右察看两尺刻度线另一重合线，记录重合线间目镜测 微尺和镜台测微尺的格数（参见附录显微测量）。用下列公式计算目镜测微尺每小格的实际 长度。 镜台测微尺的格数×10μm 目镜测微尺每小格的实际长度= 目镜测微尺的格数 2)物体的测量移去镜台测微尺，换上标本片（选取显微特征描述用粉末制片），用目 镜测微尺测量显微镜下细胞或内含物所占小格数并乘以目镜测微尺每小格代表的实际长度， 即为被测物体的实际长度。 (2)显微制片 1)徒手切片 取材、固定与切片：取较细小的牛膝和麦冬药材，用水浸软，选择 适当部位，切割成长2~3cm的小段，用拇
3 仪器、材料与试剂 (1)仪器与材料 1)仪器 生物显微镜，目镜测微尺，镜台测微尺，显微描绘器，镊子，解剖针，载玻片， 盖玻片，酒精灯，剃须刀片，粉碎机，绘图板，铅笔等。 2)材料 粉末：艾叶，巴戟天，半夏，穿心莲，黄芪，木香，肉桂，石韦，洋金花。绵 马贯众叶柄永久制片 （2）试剂 α-萘酚浓硫酸试液，碘试液，间苯三酚试液，水合氯醛试剂，苏丹Ⅲ试液， 稀甘油试剂，盐酸，硝酸，碘化铋钾试剂，氯化锌碘试液，硫酸，钌红试液，硝酸汞试液， 乙醚，石油醚，90%乙醇，70%乙醇，α-萘酚乙醇溶液，稀盐酸，稀醋酸等。 操作步骤 （1）显微测量 1）显微目镜测微尺的标化 取下显微镜的目镜，将目镜测微尺的刻度面向上放入目境 内的视场光阑上，再旋上上透镜。 将镜台测微尺盖片面朝上放在再载物台上，用低倍镜观察，调节焦距看清楚镜台测微尺 的刻度。 移动镜台测微尺，同时转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺平行靠近，并将两尺的“0” 点刻度线或某刻度线对齐，然后从左向右察看两尺刻度线另一重合线，记录重合线间目镜测 微尺和镜台测微尺的格数（参见附录显微测量）。用下列公式计算目镜测微尺每小格的实际 长度。 镜台测微尺的格数×10μm 目镜测微尺每小格的实际长度= 目镜测微尺的格数 2）物体的测量 移去镜台测微尺，换上标本片（选取显微特征描述用粉末制片），用目 镜测微尺测量显微镜下细胞或内含物所占小格数并乘以目镜测微尺每小格代表的实际长度， 即为被测物体的实际长度。 （2）显微制片 1）徒手切片 取材、固定与切片：取较细小的牛膝和麦冬药材，用水浸软，选择 适当部位，切割成长 2~3cm 的小段，用拇
解离组织制片及滑走切片、冷冻切片、石蜡切片等机械制片略，参见附录。 (3)显微化学反应 选择显微特征描述使用的标本片，滴加规定显微化学试剂，在显微镜下观察细胞壁或细 胞内含物的颜色变化。 1)细胞壁性质的鉴定木栓化或角质化细胞壁： 4
4 解离组织制片及滑走切片、冷冻切片、石蜡切片等机械制片略，参见附录。 （3）显微化学反应 选择显微特征描述使用的标本片，滴加规定显微化学试剂，在显微镜下观察细胞壁或细 胞内含物的颜色变化。 1）细胞壁性质的鉴定 木栓化或角质化细胞壁：
2)细胞内含物的鉴定淀粉粒： 3)组织或细胞内化学成分的鉴定略。参见1.2中药的化学定性鉴别。 (4)描绘器的使用及绘图方法 1)取下显微镜的接目镜，按说明书装上描绘器（或描绘目镜）。 2)装上显微标本片，调节物像清晰度。 3)调整绘图板的角度与描绘器的角度相一致，用显微描绘器上的滤光片调节光线强度
5 2）细胞内含物的鉴定 淀粉粒： 3）组织或细胞内化学成分的鉴定 略。参见 1.2 中药的化学定性鉴别。 (4)描绘器的使用及绘图方法 1）取下显微镜的接目镜，按说明书装上描绘器（或描绘目镜）。 2）装上显微标本片，调节物像清晰度。 3）调整绘图板的角度与描绘器的角度相一致，用显微描绘器上的滤光片调节光线强度