R--CONH,(酰胺)+HO-N--O-→R-COOH+N,+H,O含有游离氨基的α-氨基酸和伯胺或酰胺一样能与HNO反应，放出N，，氨基被羟基取代而氨基酸就转变成相对应的醇酸：R--CH--COOH+HO--N--O?R-CH-COOH+N,+H.Q100%NHOH上面各反应中放出的N2，一半来自氨基，一半来自HNOa，因此实际上测得的N的数量是氨基氮的一倍（换言之即氨基氮量是测得N量的半数）。凡斯来克氏根据上述反应原理来测定α-氨基酸，多肽及蛋白质类中游离氨基中氮的含量（非α氨基酸与HNO反应不能达到完全）。实施方法（提要）将一定量的试样用过量的HNO。试剂处理（在特别设计的装置中进行)，生成的氮中因混有NO(3HNO.一→HNO+H,O+NO)，应先通过KMnO4-KOH溶液洗涤，然后将剩余的Na用定氮管测定其容积。计算出N，的正确重量的半数即代表氨基氮。计算公式P=测定时的气压(m.m.)t一测定时的温度(℃)p=在t时的水蒸汽压力（m.m.)Vg-Na的容积(c. c.)1c.c.Na(tC,Pm.m.)换算至标准状况下的容积P-p2731×760273(27310.0.1+0.003663t)76015
F=1c. c. N,在tC, Pm. m. 的重量(mg)*.1PN,×1, 000tp1760(1+0.003663t)22,414P-p128.0134 ×1000-1X76022,414(1+0.003663t)P-p1.249817mg760（1+0.003663t）参考文献@ D. D. Van slyke, J. Biol. Chem. 9, 185(1910); J. B. Niederl and V. Niederl, Mico-ronethods of Quantitative Organic Analysis, 273(1946); Oficial methods of AnalysisofAsociation of Oficial Agricultural Chemists 363(1950);生物化学下128(昭和 28);Donald,J.Oram,Organio Chemistry 611(1959);Olarence AustinMorrow, Biochem. Laboratory Methods for Students of the Biological Sciences (1935)124.[6]卫门（Weermann，R.A.）醛糖降级法；参阅尔（Wohl,A.）醛糖降级法[60][7]尤利克（Urech，F.）羟睛合成法［8］无而带（Ultee，AJ.）羟腈合成法①将等当量的酮及KON（或NaON)混合物用醋酸（或HOI，H,SO等）处理，则生成的HON与酮的羰基起加成反应，生成羟睛（Oyanohydrin)(尤利克法)NaON+Ht+HON+Na+1ROHRO---.O+HONR'ON如欲求出更正确的结果，F应为1P.-P1xX0.96727×0.0012931×1000760（1+0.003675t)P-p1250.78即760（1+0.003675t）氮上式中0.96727比重10.0012931=1c.c.干燥空气在地球纬度450的海面上，0℃C，760mm时的重量（g）·16
如将醛、酮类与无水HON在微量NaON(KCN）或碱性催化剂(KOH)存在下，低温(0)时作用，则得相同的产物（尤而蒂法）。反应历程酸的存在下形成正碳离子，容易和弱亲核试剂HON进行亲核反应:OHOHIHON-0+H++H+ON碱的存在，促使活性的亲核试剂ON-的形成：HON+OH-H20+ON.OH0H,O-0+ON-+OHONON例实H,SO4HOOH,ON（氰基甲醇）1.HCHO+KONH,0将130gKON溶于250ml水中，加入170ml37%甲醛水溶液。在上述混合液中加入57ml浓HaSO04及173ml水，用乙醚充分萃取得87~91g（收率76~80%)。OHNacN+H,SO2. (OH3)20--0(CH)20(2-氰基丙醇[2])10~200,77%ONONHON3. CH.CHOCH3-CH-OHpH7~7.5(1-氰基-乙醇）10~15℃HON4. Φ-OHO-CH--CNdpOH(α-羟基苯乙腈)NO.CH.COOHHON5. 0-C(OH,CO0H);HOCH,COOH(丙酮二酸)(3-羟基-3-氰基-戊二羧酸[1，5])-17
CH,O16.OH,CNOHONC-0OH,O1HOOH,O1(2-羟基-2-氰基-1，3-氯丙烷)(1,3-二氯丙酮)OH,CO0C,HOH,C00,HNO.HCN7.OCH.C000,HHOCHCO0O,Hs(3-羟基-8-氰基-戊二酸二乙酯）(丙酮二酸二乙酯)羟在有机合成中的应用(一)羟基酸的合成：羟腈类经水解得羟基酸。例如；1.dl乳酸或其酯的制备法③（参阅第3实例）2H.0(dl乳酸)*CH.OHCOOH-NHgOHCH,OHONOH.CHCOOOH，(dl乳酸乙酯）C,HOH+H,SO4OH-NHHSO4OH2.dl-苯-2-羟基乙酸的制备法：（参阅第4实例）浓HCIΦ--CH--COOH+NH.O1-CH-ON100°℃,70%OHOH3.柠檬酸[3-羟基-3-羧基-戊二酸(1，5)]的制备法;(1）丙酮出发：（参阅实例5)OH,O12KCNCla0-0(CH3).CO-2KCI（特殊条件下）CH,O1.18
CH,ONCH,COOHH,0HCN0-0C-0(水解)(羟睛合成)OH,ONOH,COOHCH,COOHCH,COOHNCHOH,0OC(水解)HOHO0CCH.COOHOH,O00H(2）甘油出发：（参阅实例6)③CH,OHOH,O1CH,C1OH,O1HO2HC1[O]HCNOHOHOHOH0-0福(置换）(氧化)（羟睛合成）NOCH,OHCH,O1CH,O1OH,O1OH,C1OH,CNOHHOH,02KCNH0O柠檬酸(水解）(水解)COOHHOOOH,O1OH,CN(3）β-丁酮酸乙酯出发：（参阅实例7)CH:CH,O1KCN00+ Cl20--0（氯代）CH,C0002HsCH,CO0C,HsOH.ONCH,COOC,H,C,H.OH+H,SO4HCNO00-0水解-酯化（羟睛合成）CH.COOC.Hs0H,0000,HsCH,C00C,H,.OHH.0柠檬酸(水解)ONOH,0000.Hs.19