4)浓缩 将乙醚提取液经过无水硫酸钠(约5g)滤入 与球形蒸发瓶内,用约10mL乙醚冲洗分液漏斗及 无水硫酸钠3次,入蒸发瓶内,并将其接至旋转 蒸发器上,于55°C水浴中减压蒸馏并回收乙醚, 待瓶中剩下约2mL乙醚时,取下蒸发瓶,立即用 氮气吹掉乙醚。加入2.00mL乙醇,充分混合,溶 解提取物。将乙醇液移入一小塑料离心管中,离 心5min(5000rpm)。上清液供色谱分析
4)浓缩 将乙醚提取液经过无水硫酸钠(约5g)滤入 与球形蒸发瓶内,用约10mL乙醚冲洗分液漏斗及 无水硫酸钠3次,入蒸发瓶内,并将其接至旋转 蒸发器上,于55°C水浴中减压蒸馏并回收乙醚, 待瓶中剩下约2mL乙醚时,取下蒸发瓶,立即用 氮气吹掉乙醚。加入2.00mL乙醇,充分混合,溶 解提取物。将乙醇液移入一小塑料离心管中,离 心5min(5000rpm)。上清液供色谱分析
标准曲线的制备 将维生素A和维生素E标准品配置成标准溶液(约 1mg/mL),制备标准曲线前用紫外分光光度法标定其 准确浓度。标准浓度的标定方法 取维生素A和维生素 E标准液若干微升,分别稀释至10.00mL乙醇中,并分 别按给定波长测定各维生素的吸光值。用比吸光系数 计算该维生素的浓度
标准曲线的制备 将维生素A和维生素E标准品配置成标准溶液(约 1mg/mL),制备标准曲线前用紫外分光光度法标定其 准确浓度。标准浓度的标定方法 取维生素A和维生素 E标准液若干微升,分别稀释至10.00mL乙醇中,并分 别按给定波长测定各维生素的吸光值。用比吸光系数 计算该维生素的浓度
测定条件 标准物 比吸光系数 E1%cm 波长λ,nm 视 黄 醇 1835 325 α—生育酚 71 294 γ—生育酚 92.8 298 δ—生育酚 91.2 298
测定条件 标准物 比吸光系数 E1%cm 波长λ,nm 视 黄 醇 1835 325 α—生育酚 71 294 γ—生育酚 92.8 298 δ—生育酚 91.2 298
标准浓度计算: X1 = A/E×1/100×10.00/(S×10-3) 式中:X1——维生素A浓度,g/mL; A ——维生素A的平均紫外吸收值; S ——加入标准的量,μL; E ——维生素A 1%比吸光值; 10.00/(S×10-3)——标准液稀释倍数
标准浓度计算: X1 = A/E×1/100×10.00/(S×10-3) 式中:X1——维生素A浓度,g/mL; A ——维生素A的平均紫外吸收值; S ——加入标准的量,μL; E ——维生素A 1%比吸光值; 10.00/(S×10-3)——标准液稀释倍数
2)绘制标准曲线 标准和内标物进行色谱分析,以维生素A峰 面积与内标物峰面积之比为纵坐标,维生素A 浓度为横坐标绘制标准曲线
2)绘制标准曲线 标准和内标物进行色谱分析,以维生素A峰 面积与内标物峰面积之比为纵坐标,维生素A 浓度为横坐标绘制标准曲线