生物大分子波谱学原理 吴季辉 TOCSY C实验及处理 ·同相谱与COSY等反相谱不同，间接维的点数不必 很大，一般512点足够。 混合时间的选择与要求的传递距离有关，传递距离 越长，需要的时间越长，一般短的可取20-30ms, 长的可取100ms左右。要注意：混合脉冲所用的功 率不能太大，尤其混合时间较长的。否则可能损坏 放大器及探头，另外混合脉冲产生的热量将使样品 发热，使得TOCSY的峰位同其他谱相比发生位移。 ·由于TOCSY是同相谱，一般用相移60一90度的正 弦窗函数
TOCSY 生物大分子波谱学原理 吴季辉 C 实验及处理 •同相谱与COSY等反相谱不同，间接维的点数不必 很大，一般512点足够。 •混合时间的选择与要求的传递距离有关，传递距离 越长，需要的时间越长，一般短的可取20-30ms， 长的可取100ms左右。要注意：混合脉冲所用的功 率不能太大，尤其混合时间较长的。否则可能损坏 放大器及探头，另外混合脉冲产生的热量将使样品 发热，使得TOCSY的峰位同其他谱相比发生位移。 •由于TOCSY是同相谱，一般用相移60－90度的正 弦窗函数
生物大分子波谱学原理 吴季辉 0.6 TOCSY 0.2 0.0 0.6 0.4 ( 0.2 0.0 0 50 100 150 200 250 tm(ms) FIGURE 6.44 Variation of cross-peak intensity as a function of isotropic mixing time for an isoleucine spin system.(a)Cross-peak intensity for transfer from the H spin with the HN spin removed and(b)cross-peak intensity for magnetization transfer from the HN spin.The curves for the destination spins are ( H,(---)H8,(-...-)Hy,(-.-)Hy2,and (----)H5.The transfer functions were calculated using the following coupling constants:HN=10.0 Hz,and J=12 Hz.Vicinal couplings to methyl groups were 6.7 Hz,all geminal couplings were-15 Hz,and all other vicinal couplings were 7 Hz.The effect of relaxation during the mixing was not considered
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生物大分子波谱学原理 吴季辉 TOCSY D 应用 TOCSY可提供整个自旋体系的连接，而且信号强， 对于谱峰证认很有用。 8 Y回 Y回 6 p Y马 B"⑤ B"@ BO …B③ @ 回 8 @ @ 8 分 o O龙@eo K48 K29 K48 K29 K48 K29 8.0 7.9 8. 7.9 8.0 7.9 F2(ppm) FIGURE 6.45 Sections of H2O TOCSY spectra acquired with mixing times of 48 (left),83(center),and 102 ms (right).The cross-peaks observed to the amide protons of Lys29 and Lys48 are assigned at the different mixing times.Cross- peaks to the spin-system termini are observed only at the longer mixing times
TOCSY 生物大分子波谱学原理 吴季辉 D 应用 TOCSY可提供整个自旋体系的连接，而且信号强， 对于谱峰证认很有用
生物大分子波谱学原理 吴季辉 TOCSY-wagergate (0)-SINE.100(30,di,iso,100) (0) (0) (0)-SINE.100(30,di,iso,10d p19p11p110p110p110p110p110p110p110p110p110p110ph11 70dBOdB 9dB 9dB 9dB 9dB 9dB 9dB 9dB 9dB 9dB 9dB9dB9dB 9dB:44dB 44dB 预饱和， 低功率选择性90脉冲（对准水峰）
TOCSY-wagergate 生物大分子波谱学原理 吴季辉 预饱和， 低功率选择性90脉冲（对准水峰）
生物大分子波谐学原理 吴季辉 TOCSY-doublewagergate (0)-SINE.100(30,di,iso,100) (0)SINE.50(13,di,iso,50) (0-STNE.50(1,di,iso,50) (0)-SINE.50(15i,ig,50), (0) on) % 09(0) (0 (0) (0) (09-5INE.50(24,di,iso,50) (0) (0)-SIE.100(30di,iso,100) 白11 p19p11p110p110p110p110p110p110p110:p11p11:p113 0dB 60dB odB 9dB9dB9dB 9dB 9dB9dB9dB9dB 9dB:44dB:44dB 1恢复前梯度脉冲清除残留磁化，两个WATERGATE以改善基线
TOCSY-doublewagergate 生物大分子波谱学原理 吴季辉 d1恢复前梯度脉冲清除残留磁化，两个WATERGATE以改善基线