西北农林科技大学 emistne 生物，司 动物科技学院生物化学课程组 第四节蛋白质的理化性质 及其分高苑化 返回到章
生物 化学 动物科技学院生物化学课程组 西北农林科技大学 第四节 蛋白质的理化性质 及其分离纯化 返回到章
生物 第四节蛋白质的理化性质 化学 及其分高纯化 返回到章 理化性质 酸碱性质 蛋白质的酸碱性质和等电点 分子量 蛋白质具有两性解离的性质。 3 胶体性质 蛋白质的等电点是指使蛋白质所带电荷 紫外吸收 为零时溶液的pH。 变性作用 将盐浓度为零时的等电点，称为等离子 (6 化学反应 点。它是蛋白质的特征参数。 2分离纯化 等电点的测定采用等电聚焦电泳。 3分浙鉴定 等电点时蛋白质的溶解度最小
生物 化学 第四节 蛋白质的理化性质 及其分离纯化 蛋白质的酸碱性质和等电点 蛋白质具有两性解离的性质。 蛋白质的等电点是指使蛋白质所带电荷 为零时溶液的pH。 将盐浓度为零时的等电点，称为等离子 点。它是蛋白质的特征参数。 等电点的测定采用等电聚焦电泳。 等电点时蛋白质的溶解度最小。 分离纯化 分析鉴定 理化性质 酸碱性质 分子量 胶体性质 紫外吸收 变性作用 化学反应 (1) (2) (3) 1 (4) (5) (6) 返回到章
芝物 第四节蛋白质的理化性质 化学 及其分高轮化 理化性质 酸碱性质 MG 分子量 97,400 胶体性质 66,200 紫外吸收 45,000 变性作用 化学反应 2分离纯化 31,000 3分析鉴定 21,500 3
生物 化学 第四节 蛋白质的理化性质 及其分离纯化 蛋白质的分子量 化学组成法 SDS-PAGE法 凝胶过滤法 渗透压法 沉降系数法和沉降平衡法 c c R T Mr 0 lim → = 分离纯化 分析鉴定 理化性质 酸碱性质 分子量 胶体性质 紫外吸收 变性作用 化学反应 (1) (2) (3) 1 (4) (5) (6)
生物 第四节蛋白质的理化性质 及其分庸轮化 选择性沉淀蛋白质的方法 理化性 ①盐析法：大量的中性盐[(NH4)2SO4、Na2SO4 NaC],使蛋白质脱去水化层而聚集沉淀。 酸碱性 ②有机溶剂沉淀法：破坏水化膜，降低介电常数， 分子 PEG、丙酮、乙醇等 胶体性 4 紫外吸 ③重金属盐沉淀：pH>p时带负电荷，与重金属 离子(Hg2+、Pb2+、Cu2+等)结成不溶性沉淀 变性作 ④生物碱试剂和某些酸类沉淀法：pH小于等电时， 化学反 蛋白质带正电荷，易与生物碱试剂和酸类的负离 2分离纯以 子生成不溶性沉淀。生物碱试剂：单宁酸、苦味 3分析鉴 酸、钨酸。酸类：三氯乙酸、磺基水杨酸。 ⑤加热变性沉淀。 ⑥等电点沉淀法
生物 化学 分离纯化 分析鉴定 理化性质 酸碱性质 分子量 胶体性质 紫外吸收 变性作用 化学反应 第四节 蛋白质的理化性质 及其分离纯化 蛋白质的胶体性质与蛋白质沉淀 蛋白质分子直径在1-100nm之间，在水溶液 中具有胶体溶液的通性（布朗运动，丁达耳现象， 不能通过半透膜） 稳定蛋白质胶体溶液的主要因素有： ①水化膜； ②同种电荷的互相排斥； ③布郎运 动 蛋白质的沉淀作用是指改变溶液的条件，影响 蛋白质的溶解性，使其从溶液中沉淀出来。 选择性沉淀蛋白质的方法 ： ①盐析法: 大量的中性盐[(NH4 )2SO4、Na2SO4、 NaCl]，使蛋白质脱去水化层而聚集沉淀。 ②有机溶剂沉淀法： 破坏水化膜，降低介电常数， PEG、丙酮、乙醇等 ③重金属盐沉淀：pH＞pI时带负电荷，与重金属 离子（Hg2+ 、Pb2+ 、Cu2+ 等）结成不溶性沉淀 ④生物碱试剂和某些酸类沉淀法：pH小于等电时， 蛋白质带正电荷，易与生物碱试剂和酸类的负离 子生成不溶性沉淀。生物碱试剂：单宁酸、苦味 酸、钨酸。酸类：三氯乙酸、磺基水杨酸。 ⑤加热变性沉淀。 ⑥等电点沉淀法 (1) (2) (3) 1 (4) (5) (6)
物 第四节蛋白质的理化性质 及其分高充化 理化性质 酸碱性质 蛋白质紫外吸收 (2 分子量 大部分蛋白质均含有带芳香环的苯丙 胶体性质 氨酸、酪氨酸和色氨酸。 紫外吸收 这三种氨基酸的在280nm附近有最大 变性作用 吸收，使得大多数蛋白质在280nm附 (6 化学反应 近显示强的吸收。 2分离纯化 利用这个性质，可以对蛋白质进行定 性鉴定。 3 分析鉴定
生物 化学 第四节 蛋白质的理化性质 及其分离纯化 蛋白质紫外吸收 大部分蛋白质均含有带芳香环的苯丙 氨酸、酪氨酸和色氨酸。 这三种氨基酸的在280nm 附近有最大 吸收，使得大多数蛋白质在280nm 附 近显示强的吸收。 利用这个性质，可以对蛋白质进行定 性鉴定。 分离纯化 分析鉴定 理化性质 酸碱性质 分子量 胶体性质 紫外吸收 变性作用 化学反应 (1) (2) (3) 1 (4) (5) (6)