➢ 凯氏定氮法是测定总有机氮量较为准确、操作 较为简单的方法之一，可用于所有动、植物食 品的分析及各种加工食品的分析，可同时测定 多个样品，故国内外应用较为普遍，是个经典 分析方法，至今仍 被作为标准检验方法。 ➢ 凯氏定氮法：常量法、微量法及改良凯氏定氮 法
➢ 凯氏定氮法是测定总有机氮量较为准确、操作 较为简单的方法之一，可用于所有动、植物食 品的分析及各种加工食品的分析，可同时测定 多个样品，故国内外应用较为普遍，是个经典 分析方法，至今仍 被作为标准检验方法。 ➢ 凯氏定氮法：常量法、微量法及改良凯氏定氮 法
➢ 凯氏定氮法的原理 样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋 白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸 出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫 酸铵。然后加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收后 再以标准盐酸或硫酸溶液滴定。根据标准酸消耗 量可计算出蛋白质的含量。 包括消化、蒸馏、吸收、滴定四个步骤
➢ 凯氏定氮法的原理 样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋 白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸 出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫 酸铵。然后加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收后 再以标准盐酸或硫酸溶液滴定。根据标准酸消耗 量可计算出蛋白质的含量。 包括消化、蒸馏、吸收、滴定四个步骤
① 样品消化： 2 NH2 -(CH2 )2 -COOH + 13H2 SO4 →(NH4 )2 SO4 +6CO2 + 12SO2 + 16H2 O 浓硫酸的作用： 脱水作用—使有机物脱水并碳化为C、H、N 氧化作用—将有机物炭化后的碳氧化为二氧化碳， 硫酸则被还原成二氧化硫 2H2 SO4 ＋C ＝2SO2＋ 2H2 O ＋CO2 二氧化硫使氮还原为氨，本身则被氧化为三氧化 硫，氨与硫酸作用生成硫酸铵留在酸性溶液中
① 样品消化： 2 NH2 -(CH2 )2 -COOH + 13H2 SO4 →(NH4 )2 SO4 +6CO2 + 12SO2 + 16H2 O 浓硫酸的作用： 脱水作用—使有机物脱水并碳化为C、H、N 氧化作用—将有机物炭化后的碳氧化为二氧化碳， 硫酸则被还原成二氧化硫 2H2 SO4 ＋C ＝2SO2＋ 2H2 O ＋CO2 二氧化硫使氮还原为氨，本身则被氧化为三氧化 硫，氨与硫酸作用生成硫酸铵留在酸性溶液中
❖ 加入硫酸钾的作用是：提高溶液沸点而加快 有机物的分解（3380C 4000C） K2 SO4 +H2 SO4 =2KHSO4 2KHSO4 =K2 SO4 +H2 O↑+SO3 但硫酸钾加入量不能太大，否则消化体系温度 过高，又会引起已生成的铵盐发生热分解而 造成损失： （NH4）2 SO4 =NH3↑+(NH4 )HSO4 2(NH4 )HSO4 =2NH3↑+2SO3↑+2H2 O 除硫酸钾外也可加入硫酸钠，氯化钾等盐类来 提高沸点，但效果不如硫酸钾
❖ 加入硫酸钾的作用是：提高溶液沸点而加快 有机物的分解（3380C 4000C） K2 SO4 +H2 SO4 =2KHSO4 2KHSO4 =K2 SO4 +H2 O↑+SO3 但硫酸钾加入量不能太大，否则消化体系温度 过高，又会引起已生成的铵盐发生热分解而 造成损失： （NH4）2 SO4 =NH3↑+(NH4 )HSO4 2(NH4 )HSO4 =2NH3↑+2SO3↑+2H2 O 除硫酸钾外也可加入硫酸钠，氯化钾等盐类来 提高沸点，但效果不如硫酸钾
❖ 加入硫酸铜的作用 催化作用：加速有机物的氧化分解 C＋ 2CuSO4 → Cu2SO4 ＋ SO2↑＋ CO2↑ Cu2 SO4 ＋ 2H2 SO4 → 2CuSO4 ＋ 2H2 O ＋ SO2↑ 此反应不断进行，待有机物被消化完后，不再有硫 酸亚铜（褐色）生成，溶液呈现清澈的蓝绿色。 消化完全指示：蓝绿色；
❖ 加入硫酸铜的作用 催化作用：加速有机物的氧化分解 C＋ 2CuSO4 → Cu2SO4 ＋ SO2↑＋ CO2↑ Cu2 SO4 ＋ 2H2 SO4 → 2CuSO4 ＋ 2H2 O ＋ SO2↑ 此反应不断进行，待有机物被消化完后，不再有硫 酸亚铜（褐色）生成，溶液呈现清澈的蓝绿色。 消化完全指示：蓝绿色；