SDS-PAGE示意图BCAProtein GelProteinSampleSampleWells(afterrunningthroughstacking gel)(loaded)样品胶浓缩胶StackingGel (5%)分离胶WEBIOECOMResolvingGel(6-15%)Cglycine sampleSpacer翻国快离子慢离子蛋白质A为电泳前3层凝胶排列顺序，3层胶中均有快离子，慢离子B显示电泳开始后，蛋白质样品夹在快、慢离子之间被浓缩成极窄的区带。C显示蛋白质样品分离成数个区带
SDS-PAGE示意图 Cl- glycine sample A为电泳前3层凝胶排列顺序，3层胶中均有快离子，慢离子 B显示电泳开始后，蛋白质样品夹在快、慢离子之间被浓缩成极窄的区带。 C显示蛋白质样品分离成数个区带
蛋白质的浓缩宿效应在不连续电泳系统中，含有上、下槽缓冲液（runningbuffer：Tris-GlypH8.3)、浓缩胶缓冲液(stackinggelbuffer：Tris-HCl，pH6.8)、分离胶缓冲液(seperatinggelbuffer：Tris-HCl，pH8.8)浓缩胶：CI-（墙）>Pr>Gly（电中性-消失）由于CI-很快超过蛋白离子，因此在其后面形成一个电导较低、电位梯度较陡的区域，该区电位梯度最高，这是在电泳过程中形成的电位梯度的不连续性，导致蛋自质和Gly离子加快移动，结果使蛋白质在进入分离胶之前，快、慢离子之间浓缩成一薄层，有利于提高电泳的分辨率
蛋白质的浓缩效应 在不连续电泳系统中，含有上、下槽缓冲液(running buffer：Tris-Gly， pH8.3)、浓缩胶缓冲液(stacking gel buffer：Tris-HCl，pH6.8)、分离胶 缓冲液(seperating gel buffer：Tris-HCl，pH8.8) 浓缩胶：Cl-（墙）> Pr- > Gly (电中性-消失） 由于Cl-很快超过蛋白离子，因此在其后面形成一个电导较低、电位梯度较 陡的区域，该区电位梯度最高，这是在电泳过程中形成的电位梯度的不连 续性，导致蛋白质和Gly- 离子加快移动，结果使蛋白质在进入分离胶之前， 快、慢离子之间浓缩成一薄层，有利于提高电泳的分辨率
分子筛效应蛋白质离子进入分离胶后，其pH升高，使Gly解离成负离子的效应增加同时因凝胶的浓度升高，蛋白质的泳动受到影响，迁移率急剧下降。分离胶: CI- > Gly > Pr高电压梯度不复存在，蛋白质便在一个较均一的pH和电压梯度环境中，按其分子的大小移动
蛋白质离子进入分离胶后，其pH 升高，使Gly 解离成负离子的效应增加； 同时因凝胶的浓度升高，蛋白质的泳动受到影响，迁移率急剧下降。 分离胶：Cl- > Gly- > Pr- 高电压梯度不复存在，蛋白质便在一个较均一的pH 和电压梯度环境中，按 其分子的大小移动。 分子筛效应
凝胶浓度的选择kDa97.466.2凝胶浓度越大，孔径越小42.715%胶10%胶31.014.410%分离胶5%浓缩胶kDa00525SDS-PAGE分离胶浓度最佳分离范围三6%胶50-150kD8%胶30-90kD3610%胶20-80kD28二-OUK%股1715%胶10-40kD1012%分离胶
凝胶浓度的选择 15%胶 10%胶 凝胶浓度越大，孔径越小
试剂和材料实验仪器
实验仪器、试剂和材料