实验十四碱性磷酸酶米氏常数的测定石艳废门大#自强不息止于至善
自强不息 止于至善 实验十四 碱性磷酸酶米氏常数的测定
科命生一、目的要求景SCE1.学习分光光度法测定的原理和方法2.学习和掌握米氏常数（Km）及最大反应速度（Vm）的测定原理和方法，测出碱性磷酸酶在以对硝基苯酚磷酸为底物时的Km和Vm值。唇门大学自强不息止于至善
自强不息 止于至善 一、目的要求 1.学习分光光度法测定的原理和方法 2.学习和掌握米氏常数（Km）及最大反应速度（Vm）的测定原 理和方法，测出碱性磷酸酶在以对硝基苯酚磷酸为底物时的 Km 和Vm值
科命生学二、 原理来酶促反应v-[S]曲线Vmax [S]VoV-maVoKm(uru/rl)AAVmaxKm[S] (mM)推导出米氏方程为：Vm[S]1Km +[S]其中[S]为底物浓度；v为初速度；Vm为最大反应速度；Km为米氏常数废门大子自强不息止于至善
自强不息 止于至善 二、原理 酶促反应v-[S]曲线 推导出米氏方程为： 其中[S]为底物浓度；v为初速度；Vm为最大反应速度；Km 为 米氏常数 [ ] [ ] K S V S v m m
科命生学来动力学参数的测定1Vmax[S]VVmaxmax2Km + [S]2Km=[S]Km[S]Km值等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度，单位是浓度单位。废门大自强不息止于至善
自强不息 止于至善 Km ＝[S] Km值等于酶促反应速度为最大反应速度一半时 的底物浓度，单位是浓度单位。 2 ＝ Km + [S] Vmax Vmax[S] Vmax v Km [S] Vmax/2 动力学参数的测定
米氏常数Km是酶的一个基本特征常数，它包含着酶与底物结合和解离的性质。特别是同一种酶能够作用于几种不同底物时，米氏常数K?往往可以反映出酶与各种底物的亲和力的强弱。测定Km和Vm/可通过作图法求得。最常用的Lineweaver-Burk双倒数作图法。这个方法是将米氏方程转化为倒数形式，即：TS1m以1/对1/[S1作图，可得一条直线废门大子自强不息止于至善
自强不息 止于至善 米氏常数Km是酶的一个基本特征常数，它包含着 酶与底物结合和解离的性质。特别是同一种酶能够作 用于几种不同底物时，米氏常数Km往往可以反映出 酶与各种底物的亲和力的强弱。 测定Km和Vm，可通过作图法求得。 最常用的 Lineweaver-Burk双倒数作图法。这个方法是将米氏 方程转化为倒数形式，即： 以1/v对1/[S]作图，可得一条直线 m m m V S V K v 1 [ ] 1 1