意义 1、基因文库包含大量的克隆，其数目足以覆盖生物的全部DNA序列， 因此，建立基因文库可供随时调取其中任何一基因的克隆； 2、是分离真核生物基因的有效工具。因为直接从生物的基因组中分 离某一基因是相当困难的，如果有某一基因的探针，通过杂交，就 能获得该基因的克隆； 3、有利于研究真核基因的结构和功能，因为基因文库中被克隆的 DNA都是基因组中各种随机的自然序列。 4、能提供深入研究用的探针，只需将纯化增殖的DNA片段进行标记。 5、用于高等动植物的基因定位。通过基因文库提供大量的探针， 进行染色体的原位分子杂交
意 义 1、基因文库包含大量的克隆，其数目足以覆盖生物的全部DNA序列， 因此，建立基因文库可供随时调取其中任何一基因的克隆； 2、是分离真核生物基因的有效工具。因为直接从生物的基因组中分 离某一基因是相当困难的，如果有某一基因的探针，通过杂交，就 能获得该基因的克隆； 3、有利于研究真核基因的结构和功能，因为基因文库中被克隆的 DNA都是基因组中各种随机的自然序列。 4、能提供深入研究用的探针，只需将纯化增殖的DNA片段进行标记。 5、用于高等动植物的基因定位。通过基因文库提供大量的探针， 进行染色体的原位分子杂交
DNA重组实验的目的通常是为了分离一个生物的特定基因。这些 特定基因的产物在医学上、生物技术上或者了解细胞功能上具 有非常重要的作用。为了克隆这样的基因，必须从大量的基因 中找出目的基因。为了减小工作量，提高选择效率，一般多采 用构建基因文库的方法。 二、构建基因文库的策略 大肠杆菌载体对插入外源DNA片段的容量很有限（小于10Kb), 噬菌体载体约为20Kb,粘粒载体约为40Kb。酵母人工染色体 (YAC)载体以酵母为宿主菌，可插入外源基因片段的长度范 围在0.3~1.2Mb之间
DNA重组实验的目的通常是为了分离一个生物的特定基因。这些 特定基因的产物在医学上、生物技术上或者了解细胞功能上具 有非常重要的作用。为了克隆这样的基因，必须从大量的基因 中找出目的基因。为了减小工作量，提高选择效率，一般多采 用构建基因文库的方法。 二、构建基因文库的策略 大肠杆菌载体对插入外源DNA片段的容量很有限（小于10Kb）， λ噬菌体载体约为20Kb，粘粒载体约为40Kb。酵母人工染色体 （YAC）载体以酵母为宿主菌，可插入外源基因片段的长度范 围在0.3～1.2Mb之间
从基因组DNA或cDNA构建一个有实用价值的重组DNA文库，主 要问题是在所构建的文库中必须有足够多的克隆数，才能确保基 因组DNA或cDNA序列中的每一个序列至少有一个拷贝存在于重 组DNA文库中。基因组DNA和cDNA文库的构建，基本的方法是 相似的。首先，制备基因组DNA或cDNA并选择适当的载体，用 连接酶将载体与制备的DNA或cDNA片段连接起来，通过体外包 装进入噬菌体的头部或通过直接转化而导入大肠杆菌，构建成基 因组DNA或cDNA文库
从基因组DNA或cDNA构建一个有实用价值的重组DNA文库，主 要问题是在所构建的文库中必须有足够多的克隆数，才能确保基 因组DNA或cDNA序列中的每一个序列至少有一个拷贝存在于重 组DNA文库中。基因组DNA和cDNA文库的构建，基本的方法是 相似的。首先，制备基因组DNA或cDNA并选择适当的载体，用 连接酶将载体与制备的DNA或cDNA片段连接起来，通过体外包 装进入λ噬菌体的头部或通过直接转化而导入大肠杆菌，构建成基 因组DNA或cDNA文库
对于构建一个文库，有两大基本要点：首先，保证载体DNA和靶 DNA均不被外源DNA序列污染。如果外源DNA序列可与分离目的克 隆的探针发生假阳性结合，显然将会对文库的筛选带来灾难性 的后果。因此，实验操作时一定要细心、要绝对干净，在可能 的情况下，整个实验过程中尽量使用一次性材料。其次，构建 一个文库最简单的途径就是“电话克隆”，即通过电话等通讯 方式从拥有你所需要的文库的研究者那里索取。一是因为许多 有价值的文库包括人类、哺乳动物基因组或CDNA文库已经成功 地构建多年了。二是因为大多数文库的拥有者十分愿意将他们 构
对于构建一个文库，有两大基本要点：首先，保证载体DNA和靶 DNA均不被外源DNA序列污染。如果外源DNA序列可与分离目的克 隆的探针发生假阳性结合，显然将会对文库的筛选带来灾难性 的后果。因此，实验操作时一定要细心、要绝对干净，在可能 的情况下，整个实验过程中尽量使用一次性材料。其次，构建 一个文库最简单的途径就是“电话克隆”，即通过电话等通讯 方式从拥有你所需要的文库的研究者那里索取。一是因为许多 有价值的文库包括人类、哺乳动物基因组或cDNA文库已经成功 地构建多年了。二是因为大多数文库的拥有者十分愿意将他们 构
建的文库提供给其他的研究者。而许多期刊也要求作者对已发表的文 章中使用的文库或单个克隆免费提供给其他研究者。另外，对于已构 建和保存的许多YAC文库，还可以从一些较大的院校及研究所的实 验室获得；也可以从专门构建和销售文库的公司直接购买文库或定购 特殊的文库。 构建重组DNA文库是一项非常费时和费力的工作，因此，只要有 可能，无论是基因组DNA文库还是cDNA文库，最好从其他实验室 索取或从专门从事文库构建与销售的公司购买或定做。否则，应使 用构建文库的试剂盒。这些试剂盒可以为我们节省大量的金钱和时 间
建的文库提供给其他的研究者。而许多期刊也要求作者对已发表的文 章中使用的文库或单个克隆免费提供给其他研究者。另外，对于已构 建和保存的许多YAC文库，还可以从一些较大的院校及研究所的实 验室获得；也可以从专门构建和销售文库的公司直接购买文库或定购 特殊的文库。 构建重组DNA文库是一项非常费时和费力的工作，因此，只要有 可能，无论是基因组DNA文库还是cDNA文库，最好从其他实验室 索取或从专门从事文库构建与销售的公司购买或定做。否则，应使 用构建文库的试剂盒。这些试剂盒可以为我们节省大量的金钱和时 间