第六节 蛋白质的测定 2、仪器 凯氏烧瓶、可调式电炉、蒸汽蒸馏装置
第六节 蛋白质的测定 2、仪器 凯氏烧瓶、可调式电炉、蒸汽蒸馏装置
第六节 蛋白质的测定 (1)硫酸铜(CuSO4·5HO2); (2)硫酸钾; (3)浓硫酸; (4)40%氢氧化钠溶液; (5) 4%硼酸溶液; (6) 0.1mol/L盐酸标准滴定溶液 (7)95%乙醇。 (8)甲基红一次甲基蓝混合指示液 将次甲基蓝 (乙醇溶液1g/L)与甲基红(乙醇溶液1g/L)按1 十2体积比混合
第六节 蛋白质的测定 (1)硫酸铜(CuSO4·5HO2); (2)硫酸钾; (3)浓硫酸; (4)40%氢氧化钠溶液; (5) 4%硼酸溶液; (6) 0.1mol/L盐酸标准滴定溶液 (7)95%乙醇。 (8)甲基红一次甲基蓝混合指示液 将次甲基蓝 (乙醇溶液1g/L)与甲基红(乙醇溶液1g/L)按1 十2体积比混合
第六节 蛋白质的测定 4、操作方法 样品消化→蒸馏→滴定 (1)样品消化 样品+0.2g硫酸 铜+6g硫酸钾 +20ml浓硫酸+ 玻珠数粒 先小火炭化,无泡沫 后,加大火力,液体 变蓝绿透明,继续加 热微沸30分钟 45度角 消化终点 瓶口不能对着人 盖上小漏斗
第六节 蛋白质的测定 4、操作方法 样品消化→蒸馏→滴定 (1)样品消化 样品+0.2g硫酸 铜+6g硫酸钾 +20ml浓硫酸+ 玻珠数粒 先小火炭化,无泡沫 后,加大火力,液体 变蓝绿透明,继续加 热微沸30分钟 45度角 消化终点 瓶口不能对着人 盖上小漏斗
(2)蒸馏 第六节 蛋白质的测定 按下图连接好蒸馏装置图 加水至2/3体积处,加数 滴甲基橙指示剂和硫酸 几毫升,使水呈酸性 夹紧螺旋夹 加热蒸汽发生瓶中的水,检查整套 装置是否有漏气现象,不能漏气
(2)蒸馏 第六节 蛋白质的测定 按下图连接好蒸馏装置图 加水至2/3体积处,加数 滴甲基橙指示剂和硫酸 几毫升,使水呈酸性 夹紧螺旋夹 加热蒸汽发生瓶中的水,检查整套 装置是否有漏气现象,不能漏气
第六节 蛋白质的测定 (2)蒸馏 将消化液全部转移 到100ml容量瓶中 加10ml硼酸溶液和 混合指示剂2~3d 加入NaOH溶液后颜色 为深蓝色或褐色 通入蒸汽开始蒸馏 冷凝管下口浸入 硼酸溶液中 取10ml消化稀释液沿小玻璃杯移入反 应室,少量蒸馏水冲洗,塞紧棒状玻 璃塞,向小玻璃杯内加入10ml40%NaOH, 提起玻璃塞,使NaOH缓慢流入反应室, 立即塞紧玻璃塞,并在小玻璃杯中加 水使之密封
第六节 蛋白质的测定 (2)蒸馏 将消化液全部转移 到100ml容量瓶中 加10ml硼酸溶液和 混合指示剂2~3d 加入NaOH溶液后颜色 为深蓝色或褐色 通入蒸汽开始蒸馏 冷凝管下口浸入 硼酸溶液中 取10ml消化稀释液沿小玻璃杯移入反 应室,少量蒸馏水冲洗,塞紧棒状玻 璃塞,向小玻璃杯内加入10ml40%NaOH, 提起玻璃塞,使NaOH缓慢流入反应室, 立即塞紧玻璃塞,并在小玻璃杯中加 水使之密封