(1)热变性:当升高核酸溶液的温度时,核酸双链间的氢键 发生断裂,核酸的双链逐渐打开。 变性的情况: a.T<70C,DNA几乎不变性; b.70C<T<90C,DNA部分变性; c.T>90C,DNA变性使双链打开,成为单链分子; d.T>100C,DNA双链分离。 所以,一般核酸变性的温度都选在90~100C之间
变性的情况: a. T<700C,DNA几乎不变性; b. 700C<T<900C,DNA部分变性; c. T>900C,DNA变性使双链打开,成为单链分子; d .T>1000C,DNA双链分离。 所以,一般核酸变性的温度都选在90~1000C之间。 (1)热变性:当升高核酸溶液的温度时,核酸双链间的氢键 发生断裂,核酸的双链逐渐打开
(2)酸碱变性:当核酸溶液的pH低于3或高于10时,核酸的双链可 以完全打开成为单链核酸分子。在分子杂交中,最常用的核酸变性方 法是碱变性。因通常需要的核酸的载体如凝胶或膜对热都不稳定。 (3)化学试剂变性:当核酸溶液中含有一定浓度的化学试剂如尿素、 甲醛等时,两条链之间的氢键可以断裂而形成单链核酸分子。 除物理、化学因素外,DNA分子的组成也影响变性。最主要的因 素是DNA分子中的GC含量,GC含量高的DNA不易变性,而AT含量 高的DNA容易变性。另外,环状DNA比线性DNA难于变性
(2)酸碱变性:当核酸溶液的pH低于3或高于10时,核酸的双链可 以完全打开成为单链核酸分子。在分子杂交中,最常用的核酸变性方 法是碱变性。因通常需要的核酸的载体如凝胶或膜对热都不稳定。 (3)化学试剂变性:当核酸溶液中含有一定浓度的化学试剂如尿素、 甲醛等时,两条链之间的氢键可以断裂而形成单链核酸分子。 除物理、化学因素外,DNA分子的组成也影响变性。最主要的因 素是DNA分子中的GC含量,GC含量高的DNA不易变性,而AT含量 高的DNA容易变性。另外,环状DNA比线性DNA难于变性