第十五章酶类药物 第一节酶类药物的原料来源 、原料选择 (1)不同酶的用料选择 乙酰化酶(鸽肝)、凝血酶(牛血)、透明质酸酶(羊睾丸) 溶菌酶(鸡蛋清),超氧化物歧化酶(血、肝) (2)注意不同生长发育情况及营养状况 (3)原料来源丰富 (4)从简化提纯步骤着手 (5)如用动物组织作原料,应在此动物宰杀后立即取材
第十五章 酶类药物 第一节 酶类药物的原料来源 一、原料选择 （1）不同酶的用料选择 乙酰化酶（鸽肝）、凝血酶(牛血）、透明质酸酶（羊睾丸）、 溶菌酶（鸡蛋清），超氧化物歧化酶（血、肝） （2）注意不同生长发育情况及营养状况 （3）原料来源丰富 （4）从简化提纯步骤着手 （5）如用动物组织作原料，应在此动物宰杀后立即取材
微生物酶制剂高产菌株的选育 菌种是工业发酵生产酶制剂的重要条件。优良菌种不仅 可以提高酶制剂产量和发酵原料的利用率,而且还与 增加品种,缩短生产周期,改进发酵和提炼工艺条件 等密切相关。优良菌种获得的三种途径: (1)从自然界分离筛选。 (2)用物理或化学的方法处理,诱变 (3)用基因重组与细胞融合技术 、微生物酶制剂生产的发酵技术 (一)培养基 1.碳源(甘薯、玉米、麸皮、米糠) 2氮源(豆饼、花生饼、菜籽饼、硫酸铵、尿素) 3无机盐 4生长因子和产酶促进剂
二、微生物酶制剂高产菌株的选育 菌种是工业发酵生产酶制剂的重要条件。优良菌种不仅 可以提高酶制剂产量和发酵原料的利用率，而且还与 增加品种，缩短生产周期，改进发酵和提炼工艺条件 等密切相关。优良菌种获得的三种途径： （1）从自然界分离筛选。 （2）用物理或化学的方法处理，诱变。 （3）用基因重组与细胞融合技术。 三、微生物酶制剂生产的发酵技术 （一）培养基 1.碳源 （甘薯、玉米、麸皮、米糠） 2.氮源 （豆饼、花生饼、菜籽饼、硫酸铵、尿素） 3.无机盐 4.生长因子和产酶促进剂
(二)培养方法 固体培养法 固体培养法也称麸曲培养法,该法是利用麸皮或米糠为 主要原料,另外视需要添加其它谷糠、豆饼等,加水 拌成含水适度的半固态物料作为培养基 2液体培养法 液体培养法是利用液体培养进行微生物的生长繁殖和产 酶。根据通气方法的不同,又分为液体表面培养和液 体深层培养。深层通气培养是目前应用最广的方法 3影响酶产生的一些因素 除培养基,发酵工艺参数对产酶的影响也十分明显 (1)温度 (2)pH (3)通气
（二）培养方法 1.固体培养法 固体培养法也称麸曲培养法，该法是利用麸皮或米糠为 主要原料，另外视需要添加其它谷糠、豆饼等，加水 拌成含水适度的半固态物料作为培养基。 2.液体培养法 液体培养法是利用液体培养进行微生物的生长繁殖和产 酶。根据通气方法的不同，又分为液体表面培养和液 体深层培养。深层通气培养是目前应用最广的方法。 3.影响酶产生的一些因素 除培养基，发酵工艺参数对产酶的影响也十分明显。 （1）温度 （2）pH （3）通气
(4)搅拌 (5)泡沫 发酵过程中,由于发酵液受到强烈的通气搅拌,培养基 中某些成分的变化及代谢中产生气体,会形成较多的 泡沫,而且气泡不易消失,是由于培养基中蛋白质分 子排在气泡表面形成一层吸附膜,聚集成泡沫层之故。 消泡剂:天然油类,醇类,脂肪酸类,胺类,酰胺类, 磷酸酯类,金属皂类,聚硅氧烷等。 (6)添加诱导剂和抑制剂 诱导酶 抑制剂(表面活性剂)
（4）搅拌 （5）泡沫 发酵过程中，由于发酵液受到强烈的通气搅拌，培养基 中某些成分的变化及代谢中产生气体，会形成较多的 泡沫，而且气泡不易消失，是由于培养基中蛋白质分 子排在气泡表面形成一层吸附膜，聚集成泡沫层之故。 消泡剂：天然油类，醇类，脂肪酸类，胺类，酰胺类， 磷酸酯类，金属皂类，聚硅氧烷等。 （6）添加诱导剂和抑制剂 诱导酶 抑制剂（表面活性剂）
第二节酶类药物的提取和纯化 、生物材料的预处理 (一)动物材料的预处理 1机械处理 2反复冻融 3丙酮粉 组织经过丙酮迅速脱水干燥制成丙酮粉,不仅可以减少 酶的变性,同时因细胞结构成分的破碎使得蛋白质与 脂质结合的某些化学键打开,促使某些结合酶释放到 溶液中。 (二)微生物的预处理 要是胞外酶,则除去菌体后再直接从发酵液中吸附提取 酶。但对胞内酶则需要将菌体细胞破壁,制成无细胞 的悬浮液后再行提取
第二节 酶类药物的提取和纯化 一、生物材料的预处理 （一）动物材料的预处理 1.机械处理 2.反复冻融 3.丙酮粉 组织经过丙酮迅速脱水干燥制成丙酮粉，不仅可以减少 酶的变性，同时因细胞结构成分的破碎使得蛋白质与 脂质结合的某些化学键打开，促使某些结合酶释放到 溶液中。 （二）微生物的预处理 要是胞外酶，则除去菌体后再直接从发酵液中吸附提取 酶。但对胞内酶则需要将菌体细胞破壁，制成无细胞 的悬浮液后再行提取