调整保留值: )调整保留时间:扣除死时间后的保留时间。 tr'=tr ty 2)调整保留体积:扣除死体积后的保留体积。 VR'=VR-VM或VR'=tR'Fo ■相对保留值(relative retention) 在相同的操作条件下,待测组分与参比组分 的调整保留值之比,用r,s表示 圈 超 ri,s LR(s) Vk)
▪ 调整保留值: 1) 调整保留时间:扣除死时间后的保留时间。 tR ׳ =tR – tM 2) 调整保留体积:扣除死体积后的保留体积。 VR ׳ = VR – VM 或 VR tR = ׳ F0 ׳ ▪ 相对保留值(relative retention) 在相同的操作条件下,待测组分与参比组分 的调整保留值之比,用ri,s 表示 ( ) ( ) ( ) ( ) R s R i R s R i i s V V t t r = , =
由此可知:相对保留值应该与柱长、柱径 填充情况、流动相流速等条件无关,而仅与 温度、固定相种类有关。当r,s=1时两个 组分不能分离。 色谱分析的实验依据: 1、根据色谱峰的位置(保留时间)可 以进行定性分析。 2、根据色谱峰的面积或峰高可以进行定 量分析。 3、根据色谱峰的展宽程度,可以对某物 质在实验条件下的分离特性进行评价
▪ 由此可知:相对保留值应该与柱长、柱径、 填充情况、流动相流速等条件无关,而仅与 温度、固定相种类有关。 当ri,s =1时两个 组分不能分离。 ▪ 色谱分析的实验依据: 1、根据色谱峰的位置(保留时间)可 以进行定性分析。 2、根据色谱峰的面积或峰高可以进行定 量分析。 3、根据色谱峰的展宽程度,可以对某物 质在实验条件下的分离特性进行评价
四、色谱柱效能 1、塔板理论(Martin and Synge1941) 塔板理论认为,一根柱子可以分为段,在每段 内组分在两相间很快达到平衡,把每一段称为一块理 论塔板。设柱长为L,理论塔板高度为H,则 H=L/n 式中n为理论塔板数。 理论塔板数(n)可根据色谱图上所测得的保留 时间(t)和峰底宽(w)或半峰宽 (whw2)按下式 推算: 淘 n-16餐
四、色谱柱效能 1、塔板理论( Martin and Synge 1941) ▪ 塔板理论认为,一根柱子可以分为n段,在每段 内组分在两相间很快达到平衡,把每一段称为一块理 论塔板。设柱长为L,理论塔板高度为H,则 ▪ H = L / n ▪ 式中n为理论塔板数。 ▪ 理论塔板数(n)可根据色谱图上所测得的保留 时间(tR)和峰底宽(w)或半峰宽( wh/2 )按下式 推算: 2 16( ) W t n R = 2 2 5.54( ) h R W t 或 n =
有效塔板数 (ner)的计算公式为: n=5.54P=162) Wh/2 Her=L/neff 通常用有效塔板数(netr)来评价柱的效能 比较符合实际。nem越大或Hetr越小,则色谱 柱的柱效越高
有效塔板数(neff)的计算公式为: 2 2 / 2 5.54( ) 16( ) w t w t n R h R eff = = Heff=L/neff 通常用有效塔板数(neff)来评价柱的效能 比较符合实际。neff 越大或Heff越小,则色谱 柱的柱效越高
Mobile Phase 一 AAA Initial Final 0.15 0.10 0.051 15 N