三、测定方法 测定方法有取样法和连续法。 取样法是在酶反应开始后不同的时间,从反应 系统中取出一定量的反应液,并用适当的方法 停止其反应后,再根据产物和底物在化学性质 上的差别进行分析,求得单位时间内酶促反应 变化量的方法。 连续法则是基于底物和产物在物理化学性质上 的不同,在反应过程中对反应系统进行直接 连续观察的方法。显然从准确性和测定效率看 连续法比较好
三、测定方法 测定方法有取样法和连续法。 取样法是在酶反应开始后不同的时间，从反应 系统中取出一定量的反应液，并用适当的方法 停止其反应后，再根据产物和底物在化学性质 上的差别进行分析，求得单位时间内酶促反应 变化量的方法。 连续法则是基于底物和产物在物理化学性质上 的不同，在反应过程中对反应系统进行直接， 连续观察的方法。显然从准确性和测定效率看 连续法比较好
常用的一些测定方法: 1化学法 2光学法:(1)光吸收测定法; (2)荧光测定法 (3)旋光测定法 3电化学测定法:(1)离子选择性电极测定法; (2)氧电极测定法; (3)细电流电位测定法 (4)电流测定法
常用的一些测定方法： 1 化学法 2 光学法: (1)光吸收测定法; (2)荧光测定法 ; (3)旋光测定法 3 电化学测定法: (1)离子选择性电极测定法 ; (2)氧电极测定法; (3)细电流电位测定法; (4)电流测定法
1化学法 这是种取样法,停止酶反应通常采 用添加酶的变性剂的办法,或加热使 酶失效停止反应
1.化学法 这是一种取样法，停止酶反应通常采 用添加酶的变性剂的办法，或加热使 酶失效停止反应
优 ()它不需要特殊仪器; 几乎所有酶反应都可根据产物或底物的化学 性质找出具体的捡定方法; ⅲ由于色源底物和荧光源底物的发展,可在原 来的底物分子上接上相应的有色基团、发色基团 反荧光基团。 缺点:化学法工作量大;本身包含一定的误差 对速度快的反应常不易得到十分准确的结果,所 以不是理想的测定方法
优点： (i)它不需要特殊仪器； (ii）几乎所有酶反应都可根据产物或底物的化学 性质找出具体的捡定方法； (iii)由于色源底物和荧光源底物的发展，可在原 来的底物分子上接上相应的有色基团、发色基团 或荧光基团。 缺点：化学法工作量大；本身包含一定的误差， 对速度快的反应常不易得到十分准确的结果，所 以不是理想的测定方法
2光学法 (1)光吸收测定法 原理产物和底物在某一波长或波段上,有明 显的特征吸收差别而建立起来的连续观测方法。 光吸收测定法应用的范围很广、几乎所有氧 化还原酶都可用此法规定。还有那些催化双键 饱和化或双键形成的酶反应,以及那些催化环 状结构变化的酶反应 特点:灵敏度高简便易行,测定可在较短的时 间内完成
2 光学法 (1)光吸收测定法 原理:产物和底物在某一波长或波段上，有明 显的特征吸收差别而建立起来的连续观测方法。 光吸收测定法应用的范围很广，几乎所有氧 化还原酶都可用此法规定。还有那些催化双键 饱和化或双键形成的酶反应，以及那些催化环 状结构变化的酶反应。 特点: 灵敏度高简便易行，测定可在较短的时 间内完成