实险一大气中二氧化硫的测定 3.二氧化硫见光易分解，故采样时应避免阳光照射。 4.采样后如吸收液混浊，则应离心，取上清液分析。否则，应重新采样。 5.亚硝酸对本法测定有干扰。大气中的NOx遇水可生成亚硝酸。为消除 此干扰，可加入氨基磺酸铵，以去除NO2~的干扰， HNO2+NH4SO3.NH2-NH4HSO4+N21+H2O 实验中，各试剂加入的顺序不能颠倒，否则氨基磺酸铵起不到作用。 6.温度对显色有影响。温度高，显色快。但稳定时间较短，褪色也快： 温度低，显色慢，但稳定时间长。因此，标准系列管和样品管操作要同步，否则 影响测定结果的准确性。 7.甲醛浓度过高，空白值增大，如过低，显色时间延长。为此，采用02% 甲醛较为合适。 8.显色剂的浓度和用量对显色效果有影响，如空白管底色深，可降低盐 酸副玫瑰苯胺溶液的浓度：盐酸副玫瑰苯胺溶液中的盐酸过多，标准系列显色 浅，过少则空白管显色深。为达到足够的灵敏度，又有较低的空白值，盐酸浓 度以6%(VW)为宜。 9.本法吸收液有毒性（含汞）操作时应避免污染环境和伤害操作者，废液 应按有关规定处理
实验一 大气中二氧化硫的测定 4 3. 二氧化硫见光易分解，故采样时应避免阳光照射。 4. 采样后如吸收液混浊，则应离心,取上清液分析。否则，应重新采样。 5. 亚硝酸对本法测定有干扰。大气中的 NOX 遇水可生成亚硝酸。为消除 此干扰，可加入氨基磺酸铵，以去除 NO2 − 的干扰， HNO2+NH4SO3·NH2 NH4HSO4+N2↑+H2O 实验中，各试剂加入的顺序不能颠倒，否则氨基磺酸铵起不到作用。 6. 温度对显色有影响。温度高，显色快．但稳定时间较短，褪色也快； 温度低,显色慢，但稳定时间长。因此，标准系列管和样品管操作要同步，否则 影响测定结果的准确性。 7. 甲醛浓度过高，空白值增大，如过低，显色时间延长。为此，采用 0.2% 甲醛较为合适。 8. 显色剂的浓度和用量对显色效果有影响，如空白管底色深，可降低盐 酸副玫瑰苯胺溶液的浓度；盐酸副玫瑰苯胺溶液中的盐酸过多，标准系列显色 浅，过少则空白管显色深。为达到足够的灵敏度，又有较低的空白值，盐酸浓 度以 6％(V/V)为宜。 9. 本法吸收液有毒性(含汞)操作时应避免污染环境和伤害操作者，废液 应按有关规定处理
实验二甲醛浓度的测定 实验二甲醛浓度的测定 (乙酰丙酮光度法) 一、原理 在过量铵盐存在下，甲醛与乙酰丙酮生成黄色的3,5二乙基1,4二氢卢 剔啶，该有色化合物在波长414m处有最大吸收峰，根据溶液生成的颜色深浅 测量其吸光度定量。 环境空气取样体积30L,最低检出浓度为0.05mgL,测定上限为2.5mgL。 三、仪器 1.大型气泡吸收管。 2.大气采样器流量范围0~Lmin。 3.10ml具塞比色管。 4.分光光度计。 三、试剂 L.吸收液双蒸馏水。 2.4%(mV)氢氧化钠溶液。 3.(1+5)硫酸溶液和(3+97)硫酸溶液。 4.0.05molL碘标准溶液：称取20g碘化钾，溶于少量蒸馏水，加入6.35g 碘，待溶解后稀释至1000ml。 5.0.05moL重铬酸钾标准溶液：准确称取经105~110℃烘干2小时的基 准重铬酸钾2.4516g于烧杯中，用水溶解后移人1000ml容量瓶中，稀释至刻度， 摇匀。 6.1%(mW)淀粉溶液。 7.0.05moL硫代硫酸钠溶液：称取12.5g硫代硫酸钠溶于煮沸并放冷的 水中，稀释至1000ml,加人0.2g碳酸钠，储于棕色瓶内，静置过夜。 硫代硫酸钠的标定方法如下：于250ml碘量瓶中，加人约g碘化钾及50m 水，加入0.05molL重铬酸钾标准溶液20ml,(1+5)硫酸溶液5ml,混匀，于暗 处放置5分钟，用硫代硫酸钠溶液滴定，待滴定至溶液呈淡黄色时，加人淀粉 溶液ml,继续滴定至蓝色刚好褪去，记录用量，按下式计算硫代硫酸钠的浓 度 M1=M×V2W1 5
实验二 甲醛浓度的测定 5 实验二 甲醛浓度的测定 （乙酰丙酮光度法） 一、原理 在过量铵盐存在下，甲醛与乙酰丙酮生成黄色的 3，5-二乙基-1，4-二氢卢 剔啶，该有色化合物在波长 414nm 处有最大吸收峰，根据溶液生成的颜色深浅， 测量其吸光度定量。 环境空气取样体积 30L，最低检出浓度为 0.05mg/L，测定上限为 2.5mg/L。 二、仪器 1. 大型气泡吸收管。 2. 大气采样器流量范围 0～1L/min。 3. 10ml 具塞比色管。 4. 分光光度计。 三、 试剂 1. 吸收液 双蒸馏水。 2. 4％(m/V)氢氧化钠溶液。 3. (1+5)硫酸溶液和(3+97)硫酸溶液。 4. 0.05 mol/L 碘标准溶液：称取 20g 碘化钾，溶于少量蒸馏水，加入 6.35g 碘，待溶解后稀释至 1000ml。 5. 0.05mol/L 重铬酸钾标准溶液：准确称取经 105～110℃烘干 2 小时的基 准重铬酸钾 2.4516g 于烧杯中，用水溶解后移人 1000ml 容量瓶中，稀释至刻度， 摇匀。 6. 1％(m/V)淀粉溶液。 7. 0.05mol/L 硫代硫酸钠溶液：称取 12.5g 硫代硫酸钠溶于煮沸并放冷的 水中，稀释至 1000ml，加人 0.2g 碳酸钠，储于棕色瓶内，静置过夜。 硫代硫酸钠的标定方法如下：于 250ml 碘量瓶中，加人约 lg 碘化钾及 50ml 水，加入 0.05mol/L 重铬酸钾标准溶液 20ml，(1+5)硫酸溶液 5ml，混匀，于暗 处放置 5 分钟，用硫代硫酸钠溶液滴定，待滴定至溶液呈淡黄色时，加人淀粉 溶液 lml，继续滴定至蓝色刚好褪去，记录用量，按下式计算硫代硫酸钠的浓 度： M1=M2×V2/V1
实验二甲醛浓度的测定 式中M1一一硫代硫酸钠溶液浓度(molL): M一一重铬酸钾标准溶液浓度(moL): V1一一滴定时消耗的硫代硫酸钠溶液体积(m1): V2一一重铬酸钾标准溶液体积(m)。 8.乙酰丙酮溶液：称取25g乙酸铵于100ml烧杯中，加适量水溶解，移 入100ml容量瓶中，加入3.0m1冰醋酸和0.25ml新蒸的乙酰丙酮试剂，用水 稀释至刻度，摇匀。 9.甲醛标准储备液：吸取2.8m1甲醛溶液（内含甲醛36%~38%），用水稀 释至1000m1,此溶液每毫升含甲醛约1mg。标定方法如下： 吸取甲醛储备液10.00ml于250ml碘量瓶中，加入0.05mol/L碘液25.00ml、 4%氢氧化钠溶液7.5ml,摇匀，放置15分钟。加(3+97)硫酸10m1,混匀，放 置15分钟。以硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈淡黄色时，加淀粉溶液1ml,继续 滴定至深蓝色刚好褪去为浅蓝色。同时用水代替甲醛溶液做空白试验。按下式 计算甲醛的浓度： 甲醛(HCHO,mgL=(Vo-V1)×M×15×100 式中Vo一一空白消耗硫代硫酸钠溶液的体积(ml): V1一一标定甲醛消耗硫代硫酸钠溶液的体积m: M一一硫代硫酸钠溶液的浓度(molL): 15-一甲醛HCHO)12mol质量(g)。 10.甲醛标准应用液：用水稀释一定量的甲醛标准储备液成5.00μgml的标 准应用液，临用时配制 四、操作步骤 1、空气样品的采集：在大型气泡吸收管（波氏吸收管）内，注入10ml吸收 液和2.00ml乙酰丙酮溶液，连接大气采样器，以流量0.5Lmin采集5~30L气 体样品，在室温下(20~25℃)放置2小时后测定。 2、标准曲线的制作：取7支10ml比色管，分别加入0.00、0.50、1.00、 2.00、3.00、4.00、5.00ml甲醛标准应用液，加纯水至刻度。各管加入2.00ml 乙酰丙酮溶液，混匀。于沸水中加热10分钟，取出冷却，于波长414m处以 纯水为参比，用10mm比色皿测量吸光度。 3、空气样品：将含有样品的吸收管在室温下放置2小时，直接进行比色测 6
实验二 甲醛浓度的测定 6 式中 M1——硫代硫酸钠溶液浓度(mol/L)； M2——重铬酸钾标准溶液浓度(mol/L)； V1——滴定时消耗的硫代硫酸钠溶液体积(m1)； V2——重铬酸钾标准溶液体积(ml)。 8. 乙酰丙酮溶液：称取 25g 乙酸铵于 100m1 烧杯中，加适量水溶解，移 入 100m1 容量瓶中，加入 3.0m1 冰醋酸和 0.25m1 新蒸的乙酰丙酮试剂，用水 稀释至刻度，摇匀。 9. 甲醛标准储备液：吸取 2.8m1 甲醛溶液(内含甲醛 36％～38％)，用水稀 释至 1000m1，此溶液每毫升含甲醛约 1mg。标定方法如下： 吸取甲醛储备液10.00m1于250m1碘量瓶中，加入0.05mol/L碘液25.00m1、 4%氢氧化钠溶液 7.5ml，摇匀，放置 15 分钟。加(3+97)硫酸 10m1，混匀，放 置 15 分钟。以硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈淡黄色时，加淀粉溶液 1ml，继续 滴定至深蓝色刚好褪去为浅蓝色。同时用水代替甲醛溶液做空白试验。按下式 计算甲醛的浓度： 甲醛(HCHO，mg/L)=(V0-V1)×M×15×100 式中 V0——空白消耗硫代硫酸钠溶液的体积(ml)； V1——标定甲醛消耗硫代硫酸钠溶液的体积(ml)； M——硫代硫酸钠溶液的浓度(mol/L)； 15——甲醛(HCHO)1/2mol 质量(g)。 10. 甲醛标准应用液：用水稀释一定量的甲醛标准储备液成 5.00μg/ml 的标 准应用液，临用时配制。 四、 操作步骤 1、空气样品的采集：在大型气泡吸收管(波氏吸收管)内，注入 10ml 吸收 液和 2.00ml 乙酰丙酮溶液，连接大气采样器，以流量 0.5L/min 采集 5～30L 气 体样品，在室温下(20～25℃)放置 2 小时后测定。 2、标准曲线的制作：取 7 支 10ml 比色管，分别加入 0.00、0.50、1.00、 2.00、3.00、4.00、5.00ml 甲醛标准应用液，加纯水至刻度。各管加入 2.00ml 乙酰丙酮溶液，混匀。于沸水中加热 10 分钟，取出冷却，于波长 414nm 处以 纯水为参比，用 10mm 比色皿测量吸光度。 3、 空气样品：将含有样品的吸收管在室温下放置 2 小时，直接进行比色测
实验二甲醛浓度的测定 定。 4、计算 甲醛(mgm3FmN 式中m一一由标准曲线查得的甲醛量(g): V一一换算为标准状态下的采样体积L) 五、注意事项 1、精密度和准确度：测定含甲醛0.163、0.918和1.51mgL的样品，实验 室内相对标准偏差分别为3.7%、1.4%和1.4%。在含甲醛0.15、0.34和0.91mgL 的三种浓度的样品中加入样品量0.30~2.00倍的甲醛标准溶液，测得加标回收 率范围为91%一102%。 文献报道，用乙酰丙酮光度法测定用水配制的含甲醛1.81mgL的统一样 品，经七个实验室分析，实验室内相对标准偏差为0.8%，实验室间相对标准偏 差为2.4%：相对误差为士0.4%。 2、乙酰丙酮及醋酸铵试剂的纯度对空白吸光度影响甚大，应预先进行空白 试验，乙酰丙酮应无色透明，必要时需进行蒸馏精制。 3、甲醛在铵盐存在下与乙酰丙酮形成的黄色产物较稳定，显色完全后，1 小时内无变化，在3小时内吸光度下降3%，11小时内吸光度下降5% 4、甲醛易聚合，制备标准储备液时，应取加硫酸蒸馏后的甲醛溶液稀释， 再标定其含量。 实验三唾液中溶菌酶测定 溶菌酶存在于机体的泪液、唾液、痰、鼻涕及白细胞和血清中。体液或分 泌物中溶菌酶活性，可通过检查其对指定敏感菌株的裂解作用来进行测定。测 定方法有平板打孔测定法和光学测定法两种。光学测定法只适用于测定较窄范 围浓度的溶菌酶，因此常需将待检品的浓度预先作适当的调整，使之适合于限 定范围之内。平板打孔法可在一个较宽的浓度范围内获得满意的结果。本实验 以琼脂平板打孔法为例。 【实验原理】 溶菌酶是一种小分子蛋白，分子量约14kD,由129个氨基酸组成，属一种 碱性蛋白质。它能与细菌牢固结合，并通过水解革兰阳性菌细胞壁中的粘肽成 份，而致细菌溶解。革兰阴性菌的细胞壁粘肽层的外面含有脂多糖和脂蛋白， >
实验二 甲醛浓度的测定 7 定。 4、计算 甲醛(mg/m3 )=m/V 式中 m——由标准曲线查得的甲醛量(μg)； V——换算为标准状态下的采样体积(L)。 五、注意事项 1、精密度和准确度：测定含甲醛 0.163、0.918 和 1.51mg/L 的样品，实验 室内相对标准偏差分别为 3.7%、1.4%和 1.4%。在含甲醛 0.15、0.34 和 0.91mg/L 的三种浓度的样品中加入样品量 0.30～2.00 倍的甲醛标准溶液，测得加标回收 率范围为 91%～102%。 文献报道，用乙酰丙酮光度法测定用水配制的含甲醛 1.81mg/L 的统一样 品，经七个实验室分析，实验室内相对标准偏差为 0.8％，实验室间相对标准偏 差为 2.4%；相对误差为±0.4%。 2、乙酰丙酮及醋酸铵试剂的纯度对空白吸光度影响甚大，应预先进行空白 试验，乙酰丙酮应无色透明，必要时需进行蒸馏精制。 3、甲醛在铵盐存在下与乙酰丙酮形成的黄色产物较稳定，显色完全后，l 小时内无变化，在 3 小时内吸光度下降 3%，11 小时内吸光度下降 5%。 4、甲醛易聚合，制备标准储备液时，应取加硫酸蒸馏后的甲醛溶液稀释， 再标定其含量。 实验三 唾液中溶菌酶测定 溶菌酶存在于机体的泪液、唾液、痰、鼻涕及白细胞和血清中。体液或分 泌物中溶菌酶活性，可通过检查其对指定敏感菌株的裂解作用来进行测定。测 定方法有平板打孔测定法和光学测定法两种。光学测定法只适用于测定较窄范 围浓度的溶菌酶，因此常需将待检品的浓度预先作适当的调整，使之适合于限 定范围之内。平板打孔法可在一个较宽的浓度范围内获得满意的结果。本实验 以琼脂平板打孔法为例。 【实验原理】 溶菌酶是一种小分子蛋白，分子量约 14kD，由 129 个氨基酸组成，属一种 碱性蛋白质。它能与细菌牢固结合，并通过水解革兰阳性菌细胞壁中的粘肽成 份，而致细菌溶解。革兰阴性菌的细胞壁粘肽层的外面含有脂多糖和脂蛋白