(2)筛选、修饰和重组启动子、增强子、操作子、终止 子等基因的转录调控元件,并将这些元件与外源基因精 细拼接,通过强化外源基因的转录提高其表达水平。 (3)选择、修饰和重组核糖体结合位点及密码子等 mRNA的翻译调控元件,强化受体细胞中蛋白质的生物合 成过程。上述两点均涉及到基因表达调控的分子生物学 原理
(2)筛选、修饰和重组启动子、增强子、操作子、终止 子等基因的转录调控元件,并将这些元件与外源基因精 细拼接,通过强化外源基因的转录提高其表达水平。 (3)选择、修饰和重组核糖体结合位点及密码子等 mRNA的翻译调控元件,强化受体细胞中蛋白质的生物合 成过程。上述两点均涉及到基因表达调控的分子生物学 原理
(4)基因工程菌 (细胞)是现代生物工程中的微型生物 反应器,在强化并维持其最佳生产效能的基础上,从工程 菌(细胞)大规模培养的工程和工艺角度切入,合理控制 微型生物反应器的增殖速度和最终数量,也是提高外源基 因表达产物的主要环节,这里涉及的是生物化学工程学的 基本理论体系。 因此,分子遗传学、分子生物学以及生化工程学 是基因工程原理的三大基石
(4)基因工程菌(细胞)是现代生物工程中的微型生物 反应器,在强化并维持其最佳生产效能的基础上,从工程 菌(细胞)大规模培养的工程和工艺角度切入,合理控制 微型生物反应器的增殖速度和最终数量,也是提高外源基 因表达产物的主要环节,这里涉及的是生物化学工程学的 基本理论体系。 因此,分子遗传学、分子生物学以及生化工程学 是基因工程原理的三大基石
三、基因工程所需材料(元件) (一)工具酶 基因工程中的许多工作都涉及到对DNA进行切割和重组 ,或对DNA进行修饰或合成。这些工作都是通过酶的作用 来完成的。切割、合成、连接、修饰等各种工具酶都是 必不可少的
(一)工具酶 基因工程中的许多工作都涉及到对DNA进行切割和重组 ,或对DNA进行修饰或合成。这些工作都是通过酶的作用 来完成的。切割、合成、连接、修饰等各种工具酶都是 必不可少的。 三、基因工程所需材料(元件)
1、限制酶 限制酶(restriction enzyme)是一类内切核酸酶,因而 又称为限制性内切核酸酶。这类酶能识别双链DNA内部特异 位点并且裂解磷酸二脂键。 (1)限制酶的种类 根据酶结构、作用及与DNA结合和裂解 的特异性,将限制酶分为三型 丨型酶具有限制和DNA修饰作用,这种酶通常在识别位点下 游100~1000bp处切割DNA
限制酶(restriction enzyme)是一类内切核酸酶,因而 又称为限制性内切核酸酶。这类酶能识别双链DNA内部特异 位点并且裂解磷酸二脂键。 (1)限制酶的种类 根据酶结构、作用及与DNA结合和裂解 的特异性,将限制酶分为三型. Ⅰ型酶具有限制和DNA修饰作用,这种酶通常在识别位点下 游100~1000bp处切割DNA。 1、限制酶
II型酶是DNA重组技术中最重要的工具酶,它能在DNA分子 内部的特异位点识别和切割双链DNA,其切割位点的序列可 知、固定。通常所说的限制酶就是指这一类酶。 川型酶与丨型酶一样,具有限制与修饰活性,能在识别位 点附近切割DNA,切割位点很难预测。 所以,在基因克隆中,丨型和川型酶都没有多大的实用价 值
Ⅱ型酶是DNA重组技术中最重要的工具酶,它能在DNA分子 内部的特异位点识别和切割双链DNA,其切割位点的序列可 知、固定。通常所说的限制酶就是指这一类酶。 Ⅲ型酶与Ⅰ型酶一样,具有限制与修饰活性,能在识别位 点附近切割DNA,切割位点很难预测。 所以,在基因克隆中,Ⅰ型和Ⅲ型酶都没有多大的实用价 值