经过体外基因操作和包装后 形成重组噬菌体，可以通过 正常的感染途径进入宿主细 胞；重组噬菌体DNA也可不 经过体外包装而直接通过转 染（转化）方式进入宿主细 胞
经过体外基因操作和包装后 形成重组噬菌体，可以通过 正常的感染途径进入宿主细 胞；重组噬菌体DNA也可不 经过体外包装而直接通过转 染（转化）方式进入宿主细 胞
质粒和噬菌体载体都可用于 构建基因文库； 但后者更有优势： 容纳的外源DNA片段较大； 以感染途径进入宿主细胞的 效率比转化高；
质粒和噬菌体载体都可用于 构建基因文库； 但后者更有优势： 容纳的外源DNA片段较大； 以感染途径进入宿主细胞的 效率比转化高；
Celluiar DNA enzyme Fragments Ligate Ptate phag四 Recombinant DNA day with Hybrid phage mixture e 99999 age ciane 63 母 奥 Figure 15.15 The Use of Lambda Phage as a Vector.()The preparation of a genomic library.Each colony on the bacterial lawn is a recombinant clone carrying a different DNA fra e of the desired recombinant phage
3、柯斯质粒载体 柯斯质粒载体 （cosmid vector）， 又称粘粒，是由λ 噬菌体的粘性末端 和质粒构建而成。 Cosmid (cos site-carrying plasmid) 带有粘性末端位点( cos) 的质粒
3、柯斯质粒载体 柯斯质粒载体 （cosmid vector）， 又称粘粒，是由λ 噬菌体的粘性末端 和质粒构建而成。 Cosmid (cos site-carrying plasmid) 带有粘性末端位点( cos) 的质粒
特点： 1）具有λ噬菌体的特性 在克隆了外源片段后可在体外被包装成噬菌体颗粒， 高效地感染对λ噬菌体敏感的大肠杆菌细胞。进入寄主的 柯斯质粒DNA分子，按照λ噬菌体DNA的方式环化，但无 法按噬菌体的方式生活，更无法形成子代噬菌体颗粒。 2）具有质粒载体的特性 在寄主细胞内如质粒一样进行复制，携带有抗性基因 和克隆位点，并具氯霉素扩增效应。 3）具有高容量的克隆能力 柯斯质粒本身一般只有5～7kb左右，而它克隆外源DNA 片段的极限值竟高达45kb，远远超过质粒载体及λ噬菌体载 体的克隆能力。同时，由于包装限制，柯斯质粒载体的克 隆能力还存在一个最低极限值。例如，5 kb大小的柯斯质 粒载体，插入的外源片段至少不能小于30 kb。 柯斯质粒用于克隆大片段的DNA分子特别有效， 而这种特性对于研究高等生物的基因组十分重要
特点： 1）具有λ噬菌体的特性 在克隆了外源片段后可在体外被包装成噬菌体颗粒， 高效地感染对λ噬菌体敏感的大肠杆菌细胞。进入寄主的 柯斯质粒DNA分子，按照λ噬菌体DNA的方式环化，但无 法按噬菌体的方式生活，更无法形成子代噬菌体颗粒。 2）具有质粒载体的特性 在寄主细胞内如质粒一样进行复制，携带有抗性基因 和克隆位点，并具氯霉素扩增效应。 3）具有高容量的克隆能力 柯斯质粒本身一般只有5～7kb左右，而它克隆外源DNA 片段的极限值竟高达45kb，远远超过质粒载体及λ噬菌体载 体的克隆能力。同时，由于包装限制，柯斯质粒载体的克 隆能力还存在一个最低极限值。例如，5 kb大小的柯斯质 粒载体，插入的外源片段至少不能小于30 kb。 柯斯质粒用于克隆大片段的DNA分子特别有效， 而这种特性对于研究高等生物的基因组十分重要