一）基因工程工具酶 1、限制性核酸内切酶（restriction endonuclease） 能识别双链DNA分子的特定序列，并在识别位点或其附 近切割DNA的一类内切酶 在细菌细胞内限制性酶与DNA甲基化酶共同构成细菌的限制 –修饰系统，利用限制酶降解进入细胞内的外源DNA，同时 用甲基化酶修饰细菌本身DNA，以避免被酶降解。 识别序列通常由4～8个碱基对组成，具有二重旋转对称 轴，序列呈回文结构（palindromic structure）
一）基因工程工具酶 1、限制性核酸内切酶（restriction endonuclease） 能识别双链DNA分子的特定序列，并在识别位点或其附 近切割DNA的一类内切酶 在细菌细胞内限制性酶与DNA甲基化酶共同构成细菌的限制 –修饰系统，利用限制酶降解进入细胞内的外源DNA，同时 用甲基化酶修饰细菌本身DNA，以避免被酶降解。 识别序列通常由4～8个碱基对组成，具有二重旋转对称 轴，序列呈回文结构（palindromic structure）
Hind III的识别序列： 5`-A A G C T T-3` 3`-T T C G A A-5` 5`-A A G C T T-3` 3`-T T C G A A-5` 粘性末端（cohesive end）
Hind III的识别序列： 5`-A A G C T T-3` 3`-T T C G A A-5` 5`-A A G C T T-3` 3`-T T C G A A-5` 粘性末端（cohesive end）
HpaI的识别序列： 5` - G T T A A C - 3` 3` - C A A T T G - 5` 5` - G T T A A C - 3` 3` - C A A T T G - 5` 平末端（blunt end）
HpaI的识别序列： 5` - G T T A A C - 3` 3` - C A A T T G - 5` 5` - G T T A A C - 3` 3` - C A A T T G - 5` 平末端（blunt end）
2、DNA连接酶（DNA ligase） T4 DNA连接酶 大肠杆菌DNA连接酶 在体外将目的基因和载体共价连接构成 重组DNA分子
2、DNA连接酶（DNA ligase） T4 DNA连接酶 大肠杆菌DNA连接酶 在体外将目的基因和载体共价连接构成 重组DNA分子
3、其它 DNA聚合酶：从大肠杆菌中提取，用于体外合成DNA 碱性磷酸脂酶：用于DNA连接时对载体的某段末端进行 修饰，以减少载体的自身环化 核酸外切酶：用于DNA的缺失分析 单链核酸内切酶：用于修饰粘性末端及进行DNA结构分析
3、其它 DNA聚合酶：从大肠杆菌中提取，用于体外合成DNA 碱性磷酸脂酶：用于DNA连接时对载体的某段末端进行 修饰，以减少载体的自身环化 核酸外切酶：用于DNA的缺失分析 单链核酸内切酶：用于修饰粘性末端及进行DNA结构分析