三测定方法 测定方法有取样法和连续法。 取样法是在酶反应开始后不同的时间,从反应 系统中取出一定量的反应液,并用适当的方法停 止其反应后,再根据产物和底物在化学性质上的 差别进行分析,求得单位时间内酶促反应变化量 的方法。 连续法则是基于底物和产物在物理化学性质上 的不同,在反应过程中对反应系统进行直接,连 续观察的方法。显然从准确性和测定效率看连续 法比较好
三 测定方法 测定方法有取样法和连续法。 取样法是在酶反应开始后不同的时间,从反应 系统中取出一定量的反应液,并用适当的方法停 止其反应后,再根据产物和底物在化学性质上的 差别进行分析,求得单位时间内酶促反应变化量 的方法。 连续法则是基于底物和产物在物理化学性质上 的不同,在反应过程中对反应系统进行直接,连 续观察的方法。显然从准确性和测定效率看连续 法比较好
常用的一些测定方法 1化学法 2光学法:(1)光吸收测定法; (2)荧光测定法 (3)旋光测定法 3电化学测定法:(1)离子选择性电极测定法 (2)氧电极测定法; (3)细电流电位测定法 (4)电流测定法 4放射化学测定法 5量气法 6酶偶联分析法
常用的一些测定方法: 1 化学法 2 光学法: (1)光吸收测定法; (2)荧光测定法 ; (3)旋光测定法 3 电化学测定法: (1)离子选择性电极测定法 ; (2)氧电极测定法; (3)细电流电位测定法; (4)电流测定法 4 放射化学测定法 5 量气法 6 酶偶联分析法
1化学法 这是种取样法,停止酶反应通常采用添 加酶的变性剂的办法,或加热使酶失效停 止反应 在化学法中应用何种具体的检测方法要根 据具体的酶反应而定
1.化学法 这是一种取样法,停止酶反应通常采用添 加酶的变性剂的办法,或加热使酶失效停 止反应。 在化学法中应用何种具体的检测方法要根 据具体的酶反应而定
优点:化学法比较古老,但目前仍广泛采用,这 是因为: ()它不需要特殊仪器; (i)几乎所有酶反应都可根据产物或底物的化学 性质找出具体的捡定方法; i)由于色源底物和荧光源底物的发展,可在原 来的底物分子上接上相应的有色基团、发色基团 或荧光基团。 缺点:化学法工作量大;本身包含一定的误差 对速度快的反应常不易得到十分准确的结果,所 以不是理想的测定方法
优点:化学法比较古老,但目前仍广泛采用,这 是因为: (i)它不需要特殊仪器; (ii)几乎所有酶反应都可根据产物或底物的化学 性质找出具体的捡定方法; (iii)由于色源底物和荧光源底物的发展,可在原 来的底物分子上接上相应的有色基团、发色基团 或荧光基团。 缺点:化学法工作量大;本身包含一定的误差, 对速度快的反应常不易得到十分准确的结果,所 以不是理想的测定方法
2光学法 (1)光吸收测定法 原理产物和底物在某一波长或波段上,有明显 的特征吸收差别而建立起来的连续观测方法。 光吸收测定法应用的范围很广,几乎所有氧化 还原酶都可用此法规定。 可以利用光吸收测定的还有那些催化双键饱和 化或双键形成的酶反应,以及那些催化环状结构 变化的酶反应 特点:灵敏度高简便易行,测定可在较短的时间 内完成
2 光学法 (1)光吸收测定法 原理:产物和底物在某一波长或波段上,有明显 的特征吸收差别而建立起来的连续观测方法。 光吸收测定法应用的范围很广,几乎所有氧化 还原酶都可用此法规定。 可以利用光吸收测定的还有那些催化双键饱和 化或双键形成的酶反应,以及那些催化环状结构 变化的酶反应。 特点: 灵敏度高简便易行,测定可在较短的时间 内完成