k1k2米氏方程推导ESE+S.P+EK.1ES的生成速率V,=k,[E][Sf] 十k.2[Pf][Ef] =k,([E]-[ES])[S] (1)式ES的分解速率(2) 式V2=k.,[ES] 十k,[ES]稳态下V,=V2(3)式k,([E]-[ES]) [S] = k-,[ES] + k2[ES]移项得[E][S][ES]=(4)式[S] +(k.,+k2) / k,令Km=(k-,+k2) / k,Km为米氏常数
ES的生成速率 v1= k1 [Ef][Sf] + k-2 [Pf] [Ef] = k1 ([E]-[ES])[S](1)式 ES的分解速率 v2= k-1 [ES] + k2 [ES] (2)式 稳态下v1= v2 k1 ([E]-[ES]) [S] = k-1 [ES] + k2 [ES] (3)式 移项得 [E][S] [S] +(k-1+k2 ) / k1 (4)式 令Km = (k-1+k2 ) / k1 ,Km为米氏常数 米氏方程推导 [ES]=
上式简化为[E][S][ES] =(5)式[S] +Km酶促反应速率可用产物的生成速率表示k?[E][S]v=k2[ES] =(6)式[S] +Km当底物浓度[S]非常大时,所有的酶被底物饱和,[ES] = [E],此时酶促反应速率达到最大值VmaxVmax = k2[ES] = k2[E]代入(6)式得Vmax[S]V=(7) 式稳态理论修正的米氏方程[S] +Km
上式简化为 [E][S] [S]+Km (5)式 酶促反应速率可用产物的生成速率表示 k2 [E][S] [S]+Km (6)式 当底物浓度[S]非常大时,所有的酶被底物饱和,[ES] = [E], 此时酶促反应速率达到最大值Vmax Vmax = k2 [ES] = k2 [E] 代入(6)式得 Vmax [S] [S]+Km 稳态理论修正的米氏方程 (7)式 [ES]= v= k2 [ES] = v=
Vmax[S]Vmax[S]DS[S] +Ks[S]+Km利用米氏方程以D酶促反应初速率v对底物浓度[S]作图,得到一条双曲线,此曲线与蔗糖酶催化的蔗糖水解反应速率曲线基本吻合。Km[S]米式方程曲线
利用米氏方程以 酶促反应初速率ν 对底物浓度[S]作 图,得到一条双 曲线,此曲线与 蔗糖酶催化的蔗 糖水解反应速率 曲线基本吻合
Vmax[S]根据米氏方程可得到以下规律:[S]+Km当底物浓度较低时,[S]<< Km’Km十[S]~KmV=Vmax[S]/Km,由于Vmax和Km为常数,令K=VmaxlKm'v=K[S],v与[S]成正比,符合一级反应动力学。Vmax[S]
u 当底物浓度较低时,[S] Km,Km+[S] ≈ Km ν=Vmax [S]/Km,由于Vmax和Km为常数,令K = Vmax /Km, ν=K[S],ν与[S]成正比,符合一级反应动力学。 根据米氏方程可得到以下规律:
当底物浓度较高时,[S] >>Km,Km十[S]~[S]v=Vmax,底物浓度过量,酶全部被底物所饱和,v与[S]无关,v达到最大,符合零级反应动力学。Vmax[S]VVmax[S]+Km[S]
u 当底物浓度较高时,[S] Km,Km+[S] ≈ [S] ν=Vmax,底物浓度过量,酶全部被底物所饱和,v与[S] 无关,ν达到最大,符合零级反应动力学