酶-底物中间复合物学说依据上述实验结果,1903年Henri提出了酶-底物中间复合物学说,酶(E)首先与底物(S)结合生成中间复合物(ES),ES再生成产物并释放出酶,反应速率与ES浓度成正比。ESE+S →E+P二最大速度Vmax底物浓度很大时,E全部被饱和,反应速率取决于E浓度,与底物浓度无关,(零级反应)Vml底物浓度增大后,反应速率取决于S和E-S浓度(混合级反应)底物浓度很小时,反应速率取决于底物浓度(一级反应)速度Km底物浓度Substrateconcentration,[S](mM)
酶-底物中间复合物学说 依据上述实验结果,1903年Henri提出了酶-底物中间复合 物学说,酶(E)首先与底物(S) 结合生成中间复合物 (ES) , ES再生成产物并释放出酶,反应速率与ES浓度成正比。 E+S ES E+P
酶促反应的动力学方程1913年Michaelis和Menten根据中间复合物学说提出了表示酶反应速度与底物浓度之间的数学方程式,即米一曼氏方程式,简称米氏方程式(Michaelis equation) :Vmax[S]V:[S] +Ks底物浓度[S]:定量不同ISI时的反应速率V:LeonorMichaelis18751949最大反应速率max:K:ES的解离常数Maud Menten1879-1960
酶促反应的动力学方程 1913年Michaelis和Menten根据中间复合物学说提出 了表示酶反应速度与底物浓度之间的数学方程式,即米- 曼氏方程式,简称米氏方程式 (Michaelis equation): [S]:底物浓度 v:不同[S]时的反应速率 Vmax:最大反应速率 Ks:ES的解离常数 定量
1925年Briggs和Haldame对米氏方程作了一次重要的修正,提出了稳态理论,酶促反应分两步进行。2步反应:(1)酶促反应形成酶一底物中间复合物(ES)(2)ES复合物再分解为产物和游离的酶kik2ESE+SE+ Pk-2k-1
1925年Briggs和Haldame对米氏方程作了一次重要的 修正,提出了稳态理论,酶促反应分两步进行。 2步反应: (1) 酶促反应形成酶-底物中间复合物(ES) (2) ES复合物再分解为产物和游离的酶 k2 k-1 k-2
稳态理论:ES的生成速度、分解速度相等指反应进行一定时间后,福亦即ES的净生成速度为零,此时ES的浓度不再改变,达到恒态,:也称稳态[So][S]e[E]r = [E] + [ES]d[ES]0dt[ES][E]TTime酶促反应过程各物质的浓度变化
指反应进行一定时间后,ES的生成速度、分解速度相等, 亦即ES的净生成速度为零,此时ES的浓度不再改变,达 到恒态,也称稳态。 酶促反应过程各物质的浓度变化 稳态理论:
米氏方程式推导的前提:[Ef]、[Sf]、[Pf]均表示未形成复合物的游离酶、底物、产物的浓度,[E]总酶浓度,[ESI复合物浓度。E与S形成ES的反应是快速平衡反应,而ES分解为E及P的反应为慢反应(限速),反应速度取决于慢反应即 V=k2[ES]。√[S]>>[E],因此在反应的初始阶段,[S]的变化在反应过程可忽略不计,即 [Sf] =[S]-[ES]-[Pf]~[S][Ef]= [E] - [ES]。√研究初始反应,[Pf]→0,忽略P十E→ES这步反应V达到稳态K1k2ESE+SP+EK.1
[Ef]、[Sf]、[Pf]均表示未形成复合物的游离酶、底物、 产物的浓度, [E]总酶浓度, [ES]复合物浓度。 ü E与S形成ES的反应是快速平衡反应,而ES分解为E及P的 反应为慢反应(限速),反应速度取决于慢反应即 V=k2[ES]。 ü [S]>>[E] ,因此在反应的初始阶段,[S]的变化在反应过 程可忽略不计, 即 [Sf] =[S]–[ES]–[Pf]≈[S], [Ef]= [E] – [ES]。 ü 研究初始反应,[Pf]→0,忽略 P+E → ES这步反应 ü 达到稳态 米氏方程式推导的前提: